摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
英文缩写表 | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第8-14页 |
1.1 钙与根毛顶端生长 | 第8-9页 |
1.2 微丝骨架与根毛顶端生长 | 第9-10页 |
1.3 结瘤因子与根毛 | 第10-11页 |
1.4 结瘤因子与钙 | 第11-12页 |
1.5 结瘤因子与微丝 | 第12-13页 |
1.6 本论文工作拟解决的问题 | 第13-14页 |
第二章 结瘤因子的提取 | 第14-23页 |
2.1 引言 | 第14页 |
2.2 材料和方法 | 第14-16页 |
2.2.1 材料来源 | 第14页 |
2.2.2 化学试剂 | 第14页 |
2.2.3 苜蓿中华根瘤菌的培养 | 第14-15页 |
2.2.4 生长曲线测定 | 第15页 |
2.2.5 结瘤因子分离和纯化 | 第15-16页 |
2.2.6 根毛变形实验 | 第16页 |
2.3 实验结果与分析 | 第16-21页 |
2.3.1 苜蓿中华根瘤菌生长曲线 | 第16-17页 |
2.3.2 HPLC纯化结果 | 第17-20页 |
2.3.3 HPLC纯化的结瘤因子活性检测 | 第20-21页 |
2.4 讨论 | 第21-23页 |
2.4.1 野生型菌株Sm83060和转基因菌株Sm1021(pEK327)色谱图比较 | 第21-22页 |
2.4.2 转基因菌株Sm1021(pEK327)分泌的结瘤闪子活性检测 | 第22-23页 |
第三章 钙、微丝对结瘤因子诱导的紫花苜蓿根毛变形的影响 | 第23-30页 |
3.1 引言 | 第23页 |
3.2 材料和方法 | 第23-24页 |
3.2.1 试剂 | 第23页 |
3.2.2 苜蓿中华根瘤菌结瘤因子的提取 | 第23页 |
3.2.3 紫花苜蓿幼苗的培养 | 第23页 |
3.2.4 钙与结瘤因子诱导的紫花苜蓿根毛变形关系实验 | 第23-24页 |
3.2.5 LatA对紫花苜蓿根毛生长速度的影响 | 第24页 |
3.2.6 微丝与结瘤因子诱导的紫花苜蓿根毛变形关系实验 | 第24页 |
3.2.7 微丝和钙共同作用与结瘤因子诱导的苜蓿根毛变形实验关系实验 | 第24页 |
3.3 结果与分析 | 第24-29页 |
3.3.1 钙对结瘤因子诱导的紫花苜蓿根毛的影响 | 第24-25页 |
3.3.2 LatA对紫花苜蓿根毛生长速度的影响 | 第25-26页 |
3.3.3 微丝对结瘤因子诱导的紫花苜蓿根毛变形的影响 | 第26-28页 |
3.3.4 钙、微丝在结瘤因子诱导的紫花苜蓿根毛变形中的相互作用 | 第28-29页 |
3.4 讨论 | 第29-30页 |
第四章 钙、微丝双标载体的构建以及紫花苜蓿的转化 | 第30-41页 |
4.1 引言 | 第30页 |
4.2 材料与方法 | 第30-35页 |
4.2.1 菌株和质粒 | 第30-31页 |
4.2.2 酶、试剂盒及主要化学试剂 | 第31-32页 |
4.2.3 培养基配制 | 第32-33页 |
4.2.4 溶液配制 | 第33-34页 |
4.2.5 实验方法 | 第34-35页 |
4.3 结果与分析 | 第35-40页 |
4.3.1 根毛特异启动子LeEXTI的克隆 | 第35-36页 |
4.3.2 载体LeEXTI::GFP-mtalin和LeEXTl::cameleon的构建 | 第36-37页 |
4.3.3 双标载体LeEXTI::GFP-mtalin+LeEXTl::cameleon的构建 | 第37-38页 |
4.3.4 红色荧光蛋白DsRed基因的克隆 | 第38页 |
4.3.5 载体LeEXTl::DsRed-mtalin的构建 | 第38-39页 |
4.3.6 双标载体LeEXTl::DsRed-mtalin+LeEXTI::cameleon的构建 | 第39页 |
4.3.7 紫花苜蓿的转化 | 第39-40页 |
4.4 讨论 | 第40-41页 |
第五章 结论与展望 | 第41-42页 |
5.1 结论 | 第41页 |
5.2 展望 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-49页 |
致谢 | 第49页 |