| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 缩略词表 | 第7-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-21页 |
| 1.1 NAC转录因子 | 第10-13页 |
| 1.1.1 NAC转录因子的结构特点 | 第10-11页 |
| 1.1.2 NAC转录因子的生物调控功能 | 第11-13页 |
| 1.2 乙烯与番茄果实成熟 | 第13-17页 |
| 1.2.1 番茄果实成熟过程中的乙烯合成作用 | 第13-15页 |
| 1.2.2 番茄果实成熟过程中的乙烯信号转导过程 | 第15-17页 |
| 1.3 病毒诱导基因沉默技术 | 第17-19页 |
| 1.3.1 VIGS基本原理 | 第17-18页 |
| 1.3.2 VIGS在番茄基因功能研究上的应用 | 第18-19页 |
| 1.4 研究目的及意义 | 第19页 |
| 1.5 研究主要内容及技术路线 | 第19-21页 |
| 第二章 NAC转录因子及乙烯相关基因的生物信息学分析 | 第21-35页 |
| 2.1 实验方法 | 第21-22页 |
| 2.1.1 番茄SNAC4-9 蛋白生物调控功能预测 | 第21页 |
| 2.1.2 番茄SNAC4-9 蛋白高级结构及结构域预测 | 第21页 |
| 2.1.3 番茄乙烯合成及信号转导相关基因启动子分析 | 第21-22页 |
| 2.2 结果与分析 | 第22-33页 |
| 2.2.1 番茄SNAC4-9 蛋白生物调控功能预测 | 第22页 |
| 2.2.2 番茄SNAC4-9 蛋白高级结构及结构域预测 | 第22-31页 |
| 2.2.3 番茄乙烯合成及信号转导相关基因启动子分析 | 第31-33页 |
| 2.3 讨论 | 第33-34页 |
| 2.4 本章小结 | 第34-35页 |
| 第三章 构建重组病毒载体及农杆菌转化 | 第35-57页 |
| 3.1 实验材料 | 第35-38页 |
| 3.1.1 菌株和质粒 | 第35页 |
| 3.1.2 酶与试剂 | 第35页 |
| 3.1.3 常用试剂配置 | 第35-37页 |
| 3.1.4 实验仪器 | 第37页 |
| 3.1.5 实验器具灭酶处理 | 第37-38页 |
| 3.2 实验方法 | 第38-47页 |
| 3.2.1 总RNA的提取及检测 | 第38-39页 |
| 3.2.2 RNA的消化及cDNA的合成 | 第39-40页 |
| 3.2.3 引物的设计与合成 | 第40-41页 |
| 3.2.4 PCR扩增反应 | 第41-42页 |
| 3.2.5 目的片段DNA回收 | 第42页 |
| 3.2.6 DNA回收片段与pUC-T载体的连接 | 第42-43页 |
| 3.2.7 大肠杆菌DH5α 的转化 | 第43-44页 |
| 3.2.8 质粒提取 | 第44-45页 |
| 3.2.9 质粒DNA双酶切验证 | 第45页 |
| 3.2.10 pTRV2重组载体的构建 | 第45-46页 |
| 3.2.11 表达载体转化农杆菌 | 第46-47页 |
| 3.3 结果与分析 | 第47-55页 |
| 3.3.1 RNA提取 | 第47页 |
| 3.3.2 扩增目的基因 | 第47-48页 |
| 3.3.3 目的基因片段的回收 | 第48-49页 |
| 3.3.4 重组T载体的菌液PCR验证及测序分析 | 第49-50页 |
| 3.3.5 重组T载体的双酶切鉴定和回收 | 第50-52页 |
| 3.3.6 重组pTRV2质粒的构建 | 第52-53页 |
| 3.3.7 重组pTRV2质粒的菌液PCR检测及测序分析 | 第53-54页 |
| 3.3.8 重组pTRV2质粒转入农杆菌及转化检测 | 第54-55页 |
| 3.4 本章小结 | 第55-57页 |
| 第四章 NAC与乙烯合成及信号转导间的相互调控关系 | 第57-78页 |
| 4.1 实验材料 | 第57-58页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第57页 |
| 4.1.2 菌株 | 第57页 |
| 4.1.3 试剂 | 第57-58页 |
| 4.1.4 主要仪器设备 | 第58页 |
| 4.2 实验方法 | 第58-61页 |
| 4.2.1 农杆菌侵染液的制备 | 第58页 |
| 4.2.2 侵染方法 | 第58页 |
| 4.2.3 VIGS侵染果实的分子鉴定 | 第58-61页 |
| 4.2.4 VIGS侵染果实乙烯生成量测定 | 第61页 |
| 4.3 结果与分析 | 第61-75页 |
| 4.3.1 番茄果实基因沉默表型分析 | 第61-63页 |
| 4.3.2 目的基因片段的PCR扩增 | 第63-64页 |
| 4.3.3 番茄果实沉默基因表达水平检测 | 第64-65页 |
| 4.3.4 SNAC基因沉默番茄果实的乙烯相关基因转录表达分析 | 第65-70页 |
| 4.3.5 乙烯相关基因沉默番茄果实的SNAC基因转录表达分析 | 第70-74页 |
| 4.3.6 乙烯释放速率 | 第74-75页 |
| 4.4 讨论 | 第75-76页 |
| 4.5 本章小结 | 第76-78页 |
| 第五章 全文结论及展望 | 第78-80页 |
| 5.1 结论 | 第78页 |
| 5.2 展望 | 第78-80页 |
| 参考文献 | 第80-87页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第87-88页 |
| 致谢 | 第88-90页 |
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