| 中文摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 序言 | 第12-16页 |
| 第一部分 TGF-β1/miRNA/靶基因轴生物信息学研究 | 第16-40页 |
| 1.1 引言 | 第16页 |
| 1.2 材料与方法 | 第16页 |
| 1.2.1 搜集目标miRNA的靶基因 | 第16页 |
| 1.2.2 目标miRNA的靶基因抑瘤功能预测分析 | 第16页 |
| 1.2.3 筛选TGF-β1/miRNA/靶基因轴 | 第16页 |
| 1.3 结果 | 第16-34页 |
| 1.3.1 目标miRNA名称在不同数据库中的对应关系 | 第16-17页 |
| 1.3.2 目标miRNA靶基因预测 | 第17-21页 |
| 1.3.3 目标miRNA靶基因的Gene Ontology和KEGG pathway分析 | 第21-29页 |
| 1.3.4 目标miRNA靶基因谱中与肿瘤相关的基因 | 第29-31页 |
| 1.3.5 筛选目标miRNA靶基因谱中与肿瘤相关的基因 | 第31-34页 |
| 1.4 讨论 | 第34-39页 |
| 1.5 结论 | 第39-40页 |
| 第二部分 人皮肤鳞癌A431细胞TGF-β1/ miR-27a-3p /FBXW7轴的验证与鉴定 | 第40-63页 |
| 2.1 引言 | 第40页 |
| 2.2 材料与方法 | 第40-51页 |
| 2.2.1 主要仪器 | 第40-41页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第41-43页 |
| 2.2.3 主要试剂配制 | 第43页 |
| 2.2.4 人皮肤鳞癌A431细胞的常规培养 | 第43-45页 |
| 2.2.5 TGF-β1 siRNA转染人皮肤鳞癌A431细胞 | 第45页 |
| 2.2.6 QPCR检测明确TGF-β1同向水平变化的miRNA | 第45-48页 |
| 2.2.7 双荧光素酶报告基因检测miR与预测靶基因的关系 | 第48-51页 |
| 2.3 结果 | 第51-60页 |
| 2.3.1 人皮肤鳞癌A431细胞的常规培养 | 第51-52页 |
| 2.3.2 TGF-β1 siRNA对人皮肤鳞癌A431细胞增殖的影响 | 第52-53页 |
| 2.3.3 QPCR检测TGF-β1与目标miRNA水平变化方向 | 第53-58页 |
| 2.3.4 miR-27a-3p对FBXW7基因靶向的验证 | 第58-60页 |
| 2.4 讨论 | 第60-62页 |
| 2.5 结论 | 第62-63页 |
| 第三部分 TGF-β1/miR-27a-3p/FBXW7轴在皮肤鳞癌细胞增殖、细胞周期、侵袭中的作用 | 第63-89页 |
| 3.1 引言 | 第63页 |
| 3.2 材料与方法 | 第63-74页 |
| 3.2.1 仪器 | 第63-64页 |
| 3.2.2 试剂 | 第64-65页 |
| 3.2.3 主要试剂配制 | 第65页 |
| 3.2.4 FBXW7过表质粒载体构建 | 第65-67页 |
| 3.2.5 FBXW7干扰质粒载体构建 | 第67-68页 |
| 3.2.6 miR-27a-3pmimic、miR-27a-3p inhibitor、FBXW7基因过表达质粒、干扰质粒转染细胞 | 第68-70页 |
| 3.2.7 CCK-8检测miR-27a-3p和FBXW7基因过表达干扰对细胞增殖的影响 | 第70-71页 |
| 3.2.8 流式检测miR-27a-3p和FBXW7基因过表达干扰对细胞周期改变的影响 | 第71-72页 |
| 3.2.9 Transwell侵袭实验检测miR-27a-3p和FBXW7基因过表达干扰对细胞侵袭能力的影响 | 第72-74页 |
| 3.3 结果 | 第74-85页 |
| 3.3.1 重组载体pcDNA3.1- FBXW7构建 | 第74页 |
| 3.3.2 重组载体SD1211-si- FBXW7的构建 | 第74页 |
| 3.3.3 miR-27a-3p与FBXW7表达对人皮肤鳞癌A431细胞增殖中的影响 | 第74-77页 |
| 3.3.4 miR-27a-3p与FBXW7表达对人皮肤鳞癌A431细胞周期中的影响 | 第77-81页 |
| 3.3.5 miR-27a-3p与FBXW7表达对人皮肤鳞癌A431细胞侵袭能力的影响 | 第81-85页 |
| 3.4 讨论 | 第85-88页 |
| 3.5 结论 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-101页 |
| 综述 | 第101-112页 |
| 参考文献 | 第105-112页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文及科研成果 | 第112-113页 |
| 致谢 | 第113页 |
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