摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-18页 |
第一章 无脊椎动物的非特异性免疫综述 | 第18-47页 |
1 无脊椎动物的非特异性免疫系统概述 | 第18-23页 |
·无脊椎动物对异己的识别机理 | 第18-22页 |
·无脊椎动物非特异性免疫系统的研究意义 | 第22-23页 |
2 无脊椎动物血细胞的非特异性免疫功能及其研究进展 | 第23-27页 |
·无脊椎动物血细胞的分类 | 第23-25页 |
·甲壳动物血细胞的非特异性免疫功能及其研究进展 | 第25页 |
·贝类动物血细胞的非特异性免疫功能及其研究进展 | 第25-27页 |
3 无脊椎动物体液免疫分子的非特异性免疫功能及其研究进展 | 第27-33页 |
·无脊椎动物酚氧化酶的免疫功能及其研究进展 | 第27-30页 |
·无脊椎动物酚氧化酶的免疫功能 | 第27-28页 |
·无脊椎动物酚氧化酶的研究进展 | 第28-30页 |
·无脊椎动物酚氧化酶的研究价值 | 第30页 |
·无脊椎动物酚氧化酶原激活系统的研究进展 | 第30-32页 |
·酚氧化酶原激活系统的组分及其功能 | 第31-32页 |
·酚氧化酶原激活系统的研究价值 | 第32页 |
·其它体液免疫因子的非特异性免疫功能及其研究进展 | 第32-33页 |
4 动物呼吸蛋白的研究进展 | 第33-42页 |
·动物呼吸蛋白概述 | 第33-34页 |
·血蓝蛋白分子结构及其生物学功能的研究进展 | 第34-37页 |
·血蓝蛋白的分子结构 | 第34-35页 |
·血蓝蛋白的生物学功能 | 第35-37页 |
·血红蛋白分子结构及其生物学功能的研究进展 | 第37-41页 |
·血红蛋白的分子结构 | 第37-39页 |
·血红蛋白的生物学功能 | 第39-41页 |
·蚯蚓血红蛋白的分子结构及其生物学功能的研究进展 | 第41-42页 |
·蚯蚓血红蛋白的分子结构 | 第41页 |
·蚯蚓血红蛋白的生物学功能 | 第41-42页 |
5 无脊椎动物常用的免疫促进剂综述 | 第42-45页 |
·免疫促进剂的主要类别 | 第42-43页 |
·免疫促进剂的生物学功能及其作用机理 | 第43-44页 |
·免疫促进剂的研究价值及其应用前景 | 第44-45页 |
6 本文研究的目的与意义 | 第45-47页 |
·本文研究的目的 | 第45页 |
·研究意义 | 第45-47页 |
第二章 毛蚶血红蛋白的分离纯化及其类酚氧化酶活性鉴定 | 第47-71页 |
1 实验用品 | 第47-51页 |
·实验材料 | 第47页 |
·试剂 | 第47-48页 |
·仪器设备 | 第48页 |
·几种常用溶液的配方 | 第48-51页 |
2 实验方法 | 第51-55页 |
·毛蚶血红蛋白粗品的分离制备 | 第51页 |
·毛蚶血红蛋白的柱层析纯化 | 第51-53页 |
·SDS-PAGE 电泳 | 第53页 |
·Native-PAGE 电泳 | 第53-54页 |
·毛蚶血红蛋白类酚氧化酶活性的鉴定 | 第54页 |
·Native-PAGE 电泳条带的质谱分析 | 第54页 |
·酚氧化酶活性测定 | 第54页 |
·蛋白质浓度测定 | 第54-55页 |
·四种常用激活剂对血红蛋白转化为类酚氧化酶样酶的激活作用 | 第55页 |
3 实验结果 | 第55-66页 |
·毛蚶血红蛋白的分离纯化 | 第55-61页 |
·各种血红蛋白样品的SDS-PAGE 电泳 | 第61-62页 |
·各种血红蛋白样品的Native-PAGE 电泳 | 第62-63页 |
·各纯化步骤对毛蚶血红蛋白的纯化效率 | 第63-64页 |
·毛蚶血红蛋白类酚氧化酶活性的鉴定 | 第64-65页 |
·Native-PAGE 电泳条带的质谱分析 | 第65页 |
·四种常用激活剂对血红蛋白转化为类酚氧化酶样酶的激活作用 | 第65-66页 |
4 讨论 | 第66-70页 |
·毛蚶血红蛋白的分离纯化 | 第66-67页 |
·毛蚶血红蛋白类酚氧化酶活性的鉴定 | 第67-68页 |
·四种常用激活剂对血红蛋白转化为类酚氧化酶样酶的激活作用 | 第68-70页 |
5 结论 | 第70-71页 |
第三章 毛蚶血红蛋白的生物化学性质与酶性质研究 | 第71-84页 |
1 实验用品 | 第71-72页 |
·实验材料 | 第71页 |
·试剂 | 第71-72页 |
·仪器设备 | 第72页 |
2 实验方法 | 第72-74页 |
·血红蛋白的酚氧化酶活性测定 | 第72-73页 |
·不同温度对毛蚶血红蛋白类酚氧化酶活性的影响 | 第73页 |
·不同pH 对毛蚶血红蛋白类酚氧化酶活性的影响 | 第73页 |
·毛蚶血红蛋白类酚氧化酶活性的酶动力学曲线测定 | 第73页 |
·不同氧化酶抑制剂对毛蚶血红蛋白类酚氧化酶活性的影响 | 第73-74页 |
·金属螯合剂和金属离子对毛蚶血红蛋白类酚氧化酶活性的影响 | 第74页 |
·铁离子对EDTA 预处理毛蚶血红蛋白的类酚氧化酶活性的回复作用 | 第74页 |
3 实验结果 | 第74-80页 |
·不同温度对毛蚶血红蛋白类酚氧化酶活性的影响 | 第74-76页 |
·不同pH 对毛蚶血红蛋白类酚氧化酶活性的影响 | 第76页 |
·毛蚶血红蛋白类酚氧化酶活性的酶动力学曲线测定 | 第76-77页 |
·不同氧化酶抑制剂对毛蚶血红蛋白类酚氧化酶活性的影响 | 第77-78页 |
·金属螯合剂和金属离子对毛蚶血红蛋白类酚氧化酶活性的影响 | 第78-79页 |
·铁离子对EDTA 预处理毛蚶血红蛋白的类酚氧化酶活性回复作用 | 第79-80页 |
4 讨论 | 第80-82页 |
5 结论 | 第82-84页 |
第四章 免疫促进剂对毛蚶血红蛋白和血细胞的影响作用研究 | 第84-93页 |
1 实验用品 | 第84-85页 |
·实验材料 | 第84-85页 |
·试剂 | 第85页 |
·仪器设备 | 第85页 |
2 实验方法 | 第85-87页 |
·灭活哈维氏弧菌、灭活鳗弧菌悬液的制备 | 第85-86页 |
·四种免疫促进剂处理毛蚶的方法 | 第86页 |
·免疫促进剂处理后毛蚶血红蛋白样品的制备 | 第86页 |
·毛蚶血细胞的获得 | 第86-87页 |
3 实验结果 | 第87-89页 |
·四种免疫促进剂对毛蚶血红蛋白产量的影响 | 第87页 |
·四种免疫促进剂对毛蚶血红蛋白类酚氧化酶活性的影响 | 第87-88页 |
·四种免疫促进剂对毛蚶血细胞数量的影响 | 第88-89页 |
4 讨论 | 第89-91页 |
5 结论 | 第91-93页 |
第五章 细菌感染对毛蚶血红蛋白和血细胞影响作用的研究 | 第93-100页 |
1 实验用品 | 第93-94页 |
·实验材料 | 第93-94页 |
·试剂 | 第94页 |
·仪器设备 | 第94页 |
2 实验方法 | 第94-95页 |
·哈维氏弧菌、鳗弧菌悬液的制备 | 第94-95页 |
·哈维氏弧菌、鳗弧菌处理毛蚶的方法 | 第95页 |
·处理后毛蚶血红蛋白样品的制备 | 第95页 |
·毛蚶血细胞的获得 | 第95页 |
3 实验结果 | 第95-97页 |
·哈维氏弧菌和鳗弧菌对毛蚶血红蛋白产量及其类酚氧化酶活性的影响 | 第95-96页 |
·哈维氏弧菌和鳗弧菌对毛蚶血细胞数量的影响 | 第96-97页 |
4 讨论 | 第97-99页 |
5 结论 | 第99-100页 |
第六章 毛蚶血红蛋白基因的cDNA 克隆 | 第100-129页 |
1 实验用品 | 第100-103页 |
·实验材料 | 第100-101页 |
·主要试剂盒、载体和工具酶 | 第101页 |
·仪器设备 | 第101-102页 |
·主要试剂配制 | 第102页 |
·PCR 引物 | 第102-103页 |
2 实验方法 | 第103-113页 |
·毛蚶血细胞的制备和总RNA 的提取 | 第103-104页 |
·cDNA 第一条链的合成 | 第104-105页 |
·cDNA 保守序列的PCR 扩增 | 第105页 |
·RACE 扩增 | 第105-108页 |
·cDNA 全长的PCR 扩增 | 第108页 |
·基因组DNA 的提取 | 第108-109页 |
·DNA 全长的 PCR 扩增 | 第109-110页 |
·凝胶电泳中 DNA 片段的回收 | 第110页 |
·DNA 片段与克隆载体 pMD18-T 的连接 | 第110-111页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第111页 |
·质粒向大肠杆菌转化(热激法) | 第111-112页 |
·PCR 快速鉴定阳性克隆 | 第112页 |
·核酸序列测定 | 第112页 |
·序列分析 | 第112-113页 |
3 实验结果 | 第113-126页 |
·总RNA 的获得与鉴定 | 第113-114页 |
·保守片段 cDNA 结果 | 第114-115页 |
·3’RACE 扩增 | 第115-116页 |
·5’RACE 扩增 | 第116页 |
·毛蚶血红蛋白全长 cDNA 序列及分析 | 第116-119页 |
·毛蚶血红蛋白的推测氨基酸序列 | 第119页 |
·毛蚶血红蛋白的同源性分析 | 第119-121页 |
·毛蚶血红蛋白的分子系统进化分析 | 第121-123页 |
·毛蚶血红蛋白与酚氧化酶的同源性分析 | 第123-125页 |
·毛蚶血红蛋白与血蓝蛋白的同源性分析 | 第125-126页 |
4 讨论 | 第126-127页 |
5 结论 | 第127-129页 |
全文总结 | 第129-132页 |
参考文献 | 第132-141页 |
本文所用缩写词 | 第141-143页 |
个人简历 | 第143-144页 |
在学期间发表的学术论文及专利 | 第144-145页 |
致谢 | 第145页 |