| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-23页 |
| ·植物病原细菌的致病因子及致病基因 | 第9-16页 |
| ·胞外多糖 | 第9-11页 |
| ·脂多糖 | 第11-12页 |
| ·胞外酶 | 第12-13页 |
| ·毒素 | 第13-14页 |
| ·依赖于Ⅲ型分泌系统(TTSS)的效应物 | 第14-16页 |
| ·动植物病原菌致病机制的相似性 | 第16-19页 |
| ·巨噬细胞感染增强子(Mip)研究概况 | 第19-20页 |
| ·野油菜黄单胞菌野油菜致病变种致病机制研究进展 | 第20-23页 |
| 第二章 材料和方法 | 第23-43页 |
| ·材料 | 第23-26页 |
| ·研究用细菌菌株 | 第23-24页 |
| ·研究用质粒 | 第24-25页 |
| ·研究用引物 | 第25-26页 |
| ·抗生素 | 第26-27页 |
| ·培养基 | 第27页 |
| ·溶液 | 第27-30页 |
| ·实验用菌株的培养条件和保存方法 | 第30页 |
| ·菌株培养条件 | 第30页 |
| ·菌株保存方法 | 第30页 |
| ·Xcc总DNA提取 | 第30-31页 |
| ·质粒提取 | 第31页 |
| ·PCR扩增 | 第31-32页 |
| ·DNA片段纯化 | 第32页 |
| ·限制性内切酶酶切 | 第32页 |
| ·DNA连接 | 第32-33页 |
| ·转化实验 | 第33-34页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第33页 |
| ·细菌细胞的转化 | 第33-34页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第34页 |
| ·蛋白质的SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第34-35页 |
| ·SDS聚丙烯酰胺凝胶的配制 | 第34-35页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第35页 |
| ·考马斯亮蓝染色 | 第35页 |
| ·6×His蛋白的表达和纯化 | 第35-36页 |
| ·目的基因在表达载体上的克隆 | 第35页 |
| ·目的蛋白的表达 | 第35页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第35-36页 |
| ·肽基脯氨酰基顺反异构酶酶活性及Km和Kcat的测定 | 第36-37页 |
| ·PPIase酶活性的测定 | 第36页 |
| ·肽基脯氨酰基顺反异构酶的抑制物对酶活性影响的测定 | 第36页 |
| ·肽基脯氨酰基顺反异构酶的Km和Kcat的测定 | 第36-37页 |
| ·整合突变体的构建及其验证 | 第37-38页 |
| ·非极性整合突变体的构建 | 第37-38页 |
| ·非极性整合突变体的验证 | 第38页 |
| ·定点突变——引物介导法 | 第38-39页 |
| ·互补株的构建 | 第39页 |
| ·植株致病性实验 | 第39-40页 |
| ·病原菌生长特性检测 | 第40页 |
| ·在萝卜叶内的生长检测 | 第40页 |
| ·在培养基中的生长繁殖检测 | 第40页 |
| ·过敏性反应实验 | 第40-41页 |
| ·致病因子的检测 | 第41-43页 |
| ·胞外多糖的检测 | 第41页 |
| ·胞外酶的检测 | 第41-43页 |
| 第三章 结果 | 第43-81页 |
| ·植物病原菌野油菜黄单胞菌野油菜致病变种8004中存在一个Mip-like蛋白 | 第43-46页 |
| ·XC2699演绎的氨基酸序列与嗜肺军团菌的Mip蛋白具有同源性 | 第43-44页 |
| ·XC2699演绎的蛋白的N-端具有信号肽 | 第44-46页 |
| ·野油菜黄单胞菌野油菜致病变种8004的Mip-like蛋白是一个FKBP型的肽基脯氨酰基顺反异构酶 | 第46-52页 |
| ·野油菜黄单胞菌野油菜致病变种8004带六组氨酸标签的Mip-like蛋白的纯化 | 第46-49页 |
| ·野油菜黄单胞菌野油菜致病变种8004的6×His-Mip-like蛋白的酶活性鉴定 | 第49-50页 |
| ·6×His-Mip-like蛋白的肽基脯氨酰基顺反异构酶的动力学分析 | 第50-51页 |
| ·6×His-Mip-like蛋白的PPIase活性的抑制特性分析 | 第51-52页 |
| ·mip-like基因是野油菜黄单胞菌野油菜致病变种中致病和在寄主体内生长所需要的 | 第52-60页 |
| ·mip-like基因非极性整合突变体的构建 | 第52-54页 |
| ·mip-like基因突变体的互补菌株的构建 | 第54-57页 |
| ·mip-like基因突变体和互补菌株的致病力检测 | 第57-58页 |
| ·mip-like基因突变体在植株中的生长的检测 | 第58-59页 |
| ·mip-like基因的突变不影响野油菜黄单胞菌野油菜致病变种在非寄主辣椒上的HR反应 | 第59-60页 |
| ·mip-like基因是野油菜黄单胞菌野油菜致病变种在基本培养基上生长所需要的 | 第60-61页 |
| ·mip-Iike基因是野油菜黄单胞菌野油菜致病变种胞外酶和胞外多糖产生所需要的 | 第61-63页 |
| ·野油菜黄单胞菌野油菜致病变种的mip-like基因突变对胞外多糖的影响 | 第61-62页 |
| ·野油菜黄单胞菌野油菜致病变种的mip-like基因突变对胞外蛋白酶、胞外淀粉酶、胞外纤维素酶活性的影响 | 第62-63页 |
| ·野油菜黄单胞菌野油菜致病变种8004的mip-like基因编码的PPIase的酶活性对致病性没有贡献 | 第63-81页 |
| ·Xcc Mip-like蛋白的PPIase活性必需氨基酸残基的鉴定 | 第63-69页 |
| ·Mip-like突变体蛋白的酶活性分析 | 第69-72页 |
| ·Mip-like突变体蛋白的功能分析 | 第72-81页 |
| 第四章 讨论 | 第81-84页 |
| 参考文献 | 第84-99页 |
| 致谢 | 第99页 |
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