| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 缩写词表 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-21页 |
| ·生物碱概述 | 第13页 |
| ·托品烷生物碱 | 第13-15页 |
| ·樟柳碱 | 第13-14页 |
| ·山莨菪碱 | 第14页 |
| ·莨菪碱 | 第14页 |
| ·东莨菪碱 | 第14-15页 |
| ·托品烷生物碱合成的进一步研究 | 第15-16页 |
| ·药用植物三分三简介 | 第16-17页 |
| ·提高托品烷生物碱含量的方法 | 第17-19页 |
| ·诱导法 | 第17-18页 |
| ·基因工程方法 | 第18页 |
| ·反义RNA 或RNAi 干扰 | 第18-19页 |
| ·调控转录因子法 | 第19页 |
| ·生物转化法 | 第19页 |
| ·本课题研究的目的和意义 | 第19-21页 |
| 第二章 材料与方法 | 第21-32页 |
| ·实验材料 | 第21-23页 |
| ·植物材料 | 第21页 |
| ·载体及菌种 | 第21页 |
| ·主要仪器设备 | 第21-22页 |
| ·购买的试剂、酶及药品等 | 第22页 |
| ·常用试剂 | 第22-23页 |
| ·AaPMT 和AaTRI 的植物双价表达载体的构建 | 第23-30页 |
| ·载体pCAMBIA1304~+的构成 | 第23-24页 |
| ·pCAMBIA1304~++AaPMT+AaTRI 植物双价表达载体的构建 | 第24-25页 |
| ·三分三的遗传转化 | 第25-30页 |
| ·制备发根农杆菌C58C1 感受态细胞 | 第25页 |
| ·带有目的基因的C58C1 菌株的获得 | 第25-26页 |
| ·用带有转基因质粒的C58C1 遗传转化三分三 | 第26-27页 |
| ·转基因三分三毛状根的PCR 检测 | 第27页 |
| ·转基因毛状根的表达谱分析 | 第27-28页 |
| ·利用HPLC 检测转基因毛状根中托品烷生物碱的含量 | 第28-29页 |
| ·DPPH 清除自由基法测定托品烷生物碱的抗氧化活性 | 第29-30页 |
| ·AaTRI 正、反植物表达载体的构建及遗传转化 | 第30-31页 |
| ·AaTRI 正、反植物表达载体的构建 | 第30页 |
| ·C58C1 介导的三分三遗传转化 | 第30-31页 |
| ·托品烷生物碱不同成分之间的生物转化研究 | 第31-32页 |
| ·向非转基因三分三毛状根中添加山莨菪碱、樟柳碱和东莨菪碱标品 | 第31页 |
| ·经过处理后的毛状根的表达谱分析 | 第31页 |
| ·利用HPLC 检测经过处理的毛状根中托品烷生物碱的含量 | 第31-32页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第32-59页 |
| ·托品烷生物碱四种成分的标准品HPLC 标准曲线和HPLC 图谱 | 第32-34页 |
| ·AaPMT 和 AaTRI 双基因共转化三分三 | 第34-48页 |
| ·pCAMBIA130~4++AaPMT+AaTRI 的植物双价表达载体的构建 | 第34-36页 |
| ·转基因毛状根的PCR 验证 | 第36-37页 |
| ·转基因毛状根的形态学特征 | 第37-39页 |
| ·转基因毛状根基因表达谱分析 | 第39-40页 |
| ·转基因毛状根中的托品烷生物碱的含量分析 | 第40-46页 |
| ·DPPH 清除自由基法测定托品烷生物碱的抗氧化活性 | 第46-47页 |
| ·以上转基因毛状根的结果分析 | 第47-48页 |
| ·AaTRI 正、反基因分别转化三分三 | 第48-51页 |
| ·AaTRI 正、反植物表达载体的构建 | 第48-50页 |
| ·转基因毛状根的获得及其结果分析 | 第50-51页 |
| ·三分三非转基因毛状根中托品烷生物碱不同成分间的生物转化 | 第51-59页 |
| ·添加山莨菪碱标品对毛状根中托品烷生物碱含量的影响 | 第51-53页 |
| ·添加樟柳碱、东莨菪碱标品对毛状根中托品烷生物碱含量的影响 | 第53-59页 |
| 第四章 总结与展望 | 第59-62页 |
| ·研究结论 | 第59-60页 |
| ·后续研究方向 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-67页 |
| 硕士期间发表的论文及成果 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
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