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分泌表达葡萄白藜芦醇合成酶工程菌的构建及发酵条件优化 |
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论文目录 |
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摘要 | 第1-9页 | Abstract | 第9-11页 | 第1章 绪论 | 第11-25页 | ·白藜芦醇的概况 | 第11-12页 | ·白藜芦醇的简介 | 第11页 | ·白藜芦醇的分布 | 第11-12页 | ·白藜芦醇的药理作用 | 第12-14页 | ·抗菌作用 | 第12页 | ·抗肿瘤作用 | 第12-13页 | ·防治心血管疾病的作用 | 第13-14页 | ·保护肝脏的作用 | 第14页 | ·白藜芦醇的制取方法 | 第14-18页 | ·从天然植物中提取 | 第14-15页 | ·化学合成 | 第15-16页 | ·植物细胞培养技术 | 第16-17页 | ·芪合酶转基因技术 | 第17-18页 | ·白藜芦醇合成酶的概况 | 第18-22页 | ·芪合酶的介绍 | 第18页 | ·白藜芦醇合成酶研究进展 | 第18-22页 | ·大肠杆菌表达系统的概况 | 第22页 | ·白藜芦醇的分析测定 | 第22-24页 | ·定性检测方法 | 第22-23页 | ·定量检测方法 | 第23-24页 | ·本课题研究的目的和意义 | 第24-25页 | 第2章 材料与方法 | 第25-35页 | ·材料 | 第25-27页 | ·植物材料 | 第25页 | ·菌种和质粒 | 第25页 | ·酶 | 第25页 | ·仪器设备 | 第25-26页 | ·实验试剂及试剂盒 | 第26-27页 | ·培养基 | 第27页 | ·方法 | 第27-35页 | ·葡萄总 RNA 的提取方法 | 第27-28页 | ·cDNA 文库的构建 | 第28页 | ·PCR(聚合酶链式反应) | 第28-29页 | ·DNA 的快速电泳检测 | 第29页 | ·DNA 的纯化回收 | 第29-30页 | ·DNA 的限制性酶切 | 第30页 | ·质粒与目的片段的连接 | 第30-31页 | ·大肠杆菌感受态的制备 | 第31页 | ·质粒转化大肠杆菌感受态(DH5α和 BL21) | 第31页 | ·菌落 PCR | 第31-32页 | ·大肠杆菌的质粒提取 | 第32页 | ·目的蛋白的诱导表达 | 第32-34页 | ·HPLC 法测定白藜芦醇的含量 | 第34-35页 | 第3章 结果与讨论 | 第35-49页 | ·pET22b 表达载体构建策略 | 第35-36页 | ·分泌表达的设计思路 | 第35页 | ·酶切位点的选择 | 第35页 | ·在 pET22b 表达质粒中插入 RS | 第35-36页 | ·构建工程菌 BL21-pET22b-RS | 第36-41页 | ·设计克隆白藜芦醇合成酶基因的特异性引物 | 第36-37页 | ·PCR 克隆 RS 基因 | 第37页 | ·pET22b 与 RS 的双酶切 | 第37-38页 | ·pET22b 与 RS 的连接 | 第38页 | ·pET22b-RS 转化克隆菌株大肠杆菌 DH5α | 第38-41页 | ·pET22b-RS 转化表达菌株大肠杆菌 BL21 | 第41页 | ·对工程菌 BL21-pET22b-RS 中 RS 基因的诱导表达 | 第41-49页 | ·判断是否有白藜芦醇合成酶的表达 | 第41-42页 | ·判断诱导 RS 表达 IPTG 的最佳诱导浓度 | 第42-43页 | ·产白藜芦醇工程菌发酵条件的优化 | 第43-49页 | 第4章 总结与展望 | 第49-51页 | 参考文献 | 第51-60页 | 致谢 | 第60页 |
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