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分泌表达葡萄白藜芦醇合成酶工程菌的构建及发酵条件优化
 
     论文目录
 
摘要第1-9页
Abstract第9-11页
第1章 绪论第11-25页
   ·白藜芦醇的概况第11-12页
     ·白藜芦醇的简介第11页
     ·白藜芦醇的分布第11-12页
   ·白藜芦醇的药理作用第12-14页
     ·抗菌作用第12页
     ·抗肿瘤作用第12-13页
     ·防治心血管疾病的作用第13-14页
     ·保护肝脏的作用第14页
   ·白藜芦醇的制取方法第14-18页
     ·从天然植物中提取第14-15页
     ·化学合成第15-16页
     ·植物细胞培养技术第16-17页
     ·芪合酶转基因技术第17-18页
   ·白藜芦醇合成酶的概况第18-22页
     ·芪合酶的介绍第18页
     ·白藜芦醇合成酶研究进展第18-22页
   ·大肠杆菌表达系统的概况第22页
   ·白藜芦醇的分析测定第22-24页
     ·定性检测方法第22-23页
     ·定量检测方法第23-24页
   ·本课题研究的目的和意义第24-25页
第2章 材料与方法第25-35页
   ·材料第25-27页
     ·植物材料第25页
     ·菌种和质粒第25页
     ·酶第25页
     ·仪器设备第25-26页
     ·实验试剂及试剂盒第26-27页
     ·培养基第27页
   ·方法第27-35页
     ·葡萄总 RNA 的提取方法第27-28页
     ·cDNA 文库的构建第28页
     ·PCR(聚合酶链式反应)第28-29页
     ·DNA 的快速电泳检测第29页
     ·DNA 的纯化回收第29-30页
     ·DNA 的限制性酶切第30页
     ·质粒与目的片段的连接第30-31页
     ·大肠杆菌感受态的制备第31页
     ·质粒转化大肠杆菌感受态(DH5α和 BL21)第31页
     ·菌落 PCR第31-32页
     ·大肠杆菌的质粒提取第32页
     ·目的蛋白的诱导表达第32-34页
     ·HPLC 法测定白藜芦醇的含量第34-35页
第3章 结果与讨论第35-49页
   ·pET22b 表达载体构建策略第35-36页
     ·分泌表达的设计思路第35页
     ·酶切位点的选择第35页
     ·在 pET22b 表达质粒中插入 RS第35-36页
   ·构建工程菌 BL21-pET22b-RS第36-41页
     ·设计克隆白藜芦醇合成酶基因的特异性引物第36-37页
     ·PCR 克隆 RS 基因第37页
     ·pET22b 与 RS 的双酶切第37-38页
     ·pET22b 与 RS 的连接第38页
     ·pET22b-RS 转化克隆菌株大肠杆菌 DH5α第38-41页
     ·pET22b-RS 转化表达菌株大肠杆菌 BL21第41页
   ·对工程菌 BL21-pET22b-RS 中 RS 基因的诱导表达第41-49页
     ·判断是否有白藜芦醇合成酶的表达第41-42页
     ·判断诱导 RS 表达 IPTG 的最佳诱导浓度第42-43页
     ·产白藜芦醇工程菌发酵条件的优化第43-49页
第4章 总结与展望第49-51页
参考文献第51-60页
致谢第60页

 
 
论文编号BS2169501,这篇论文共60
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