致谢 | 第5-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
abstract | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第14-22页 |
1.1 作物基因功能研究的常用方法 | 第14-17页 |
1.1.1 生物信息学分析 | 第14页 |
1.1.2 微阵列分析 | 第14-15页 |
1.1.3 转录组/蛋白组测序分析 | 第15页 |
1.1.4 转基因技术 | 第15-17页 |
1.1.5 病毒诱导基因沉默 | 第17页 |
1.2 甘蓝类蔬菜常用的遗传转化方法 | 第17-19页 |
1.2.1 农杆菌介导法 | 第18页 |
1.2.2 基因枪法 | 第18页 |
1.2.3 PEG法 | 第18-19页 |
1.3 甘蓝类作物中农杆菌介导的遗传转化体系研究进展 | 第19-20页 |
1.3.1 甘蓝类蔬菜体外再生体系的研究进展 | 第19页 |
1.3.2 甘蓝类蔬菜农杆菌介导的转化体系研究进展 | 第19-20页 |
1.4 CCD4基因研究进展 | 第20-22页 |
第二章 引言 | 第22-24页 |
2.1 立题依据及意义 | 第22-23页 |
2.2 技术路线 | 第23-24页 |
第三章 试验材料与方法 | 第24-32页 |
3.1 试验材料 | 第24-25页 |
3.1.1 植物材料 | 第24页 |
3.1.2 质粒与菌株 | 第24页 |
3.1.3 主要试剂 | 第24页 |
3.1.4 培养基组成 | 第24-25页 |
3.1.5 引物序列 | 第25页 |
3.2 试验方法 | 第25-32页 |
3.2.1 表达载体构建 | 第25-28页 |
3.2.2 热激法转化农杆菌 | 第28-29页 |
3.2.3 结球甘蓝YL-1遗传转化体系的建立 | 第29-30页 |
3.2.4 转基因植株的获得及PCR检测 | 第30-31页 |
3.2.5 阳性植株的表型观察及花瓣中BolC.cpc-1基因RT-PCR表达分析 | 第31-32页 |
第四章 试验结果与分析 | 第32-43页 |
4.1 载体构建 | 第32-34页 |
4.1.1 目的片段获得 | 第32页 |
4.1.2 大肠杆菌阳性克隆检测及酶切验证 | 第32-33页 |
4.1.3 重组质粒转化根癌农杆菌 | 第33-34页 |
4.2 遗传转化体系建立 | 第34-40页 |
4.2.1 基因型及外植体类型对不定芽诱导的影响 | 第34-35页 |
4.2.2 光照强度对YL-1不定芽诱导的影响 | 第35-36页 |
4.2.3 苗龄对YL-1不定芽诱导的影响 | 第36-37页 |
4.2.4 除草剂浓度对YL-1遗传转化的影响 | 第37-38页 |
4.2.5 侵染浓度对YL-1遗传转化的影响 | 第38-39页 |
4.2.6 不同AS浓度对YL-1对遗传转化的影响 | 第39-40页 |
4.2.7 不同共培养温度对YL-1遗传转化的影响 | 第40页 |
4.3 转基因植株获得与表达分析 | 第40-43页 |
4.3.1 转基因植株获得及PCR检测 | 第40-42页 |
4.3.2 阳性植株表型观察及花瓣中BolC.cpc-1基因RT-PCR分析 | 第42-43页 |
第五章 讨论 | 第43-48页 |
5.1 结球甘蓝遗传转化体系受多种因素影响 | 第43-46页 |
5.1.2 基因型及外植体类型对不定芽诱导的影响 | 第43-44页 |
5.1.3 光照条件对不定芽诱导的影响 | 第44页 |
5.1.4 苗龄对不定芽诱导的影响 | 第44-45页 |
5.1.5 除草剂浓度对遗传转化的影响 | 第45页 |
5.1.6 农杆菌侵染浓度对遗传转化的影响 | 第45页 |
5.1.7 乙酰丁香酮浓度对遗传转化的影响 | 第45-46页 |
5.1.8 共培养温度对遗传转化的影响 | 第46页 |
5.2 Bolc.cpc-1基因参与调控结球甘蓝花瓣中类胡萝卜素的降解 | 第46-48页 |
第六章 全文结论 | 第48-49页 |
6.1 建立了结球甘蓝YL-1的遗传转化体系 | 第48页 |
6.2 构建了pBWA(V)BS-BolC.cpc-1过表达载体 | 第48页 |
6.3 获得转基因植株 | 第48页 |
6.4 阳性植株表型观察及表达分析 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-58页 |
作者简介 | 第58页 |