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柑橘内参基因筛选及转pthA基因甜橙的表达分析
 
     论文目录
 
摘要第1-5页
ABSTRACT第5-12页
第一章 文献综述第12-26页
 1 荧光定量PCR(qPCR)的研究进展第12-20页
   ·qPCR的原理第12页
   ·qPCR的种类第12-14页
   ·qPCR的定量方法第14-17页
     ·绝对定量第14-15页
     ·相对定量第15-17页
   ·qPCR试验结果的影响因素第17-19页
     ·RNA的完整性第17页
     ·RNA样品中的基因组DNA污染第17-18页
     ·反转录效率第18页
     ·PCR扩增第18页
     ·内参基因的选择第18-19页
   ·qPCR在植物病理学和植物遗传育种研究中的应用第19-20页
     ·qPCR在病原真菌研究中的应用第19页
     ·qPCR在病原细菌检测中的应用第19页
     ·qPCR在植物病毒检测中的应用第19-20页
     ·qPCR在致病相关基因表达分析中的应用第20页
   ·qPCR技术的应用前景第20页
 2 植物抗病分子机制的研究进展第20-25页
   ·两种主要的植物抗病遗传基础模式第21-22页
     ·配体-受体模型第21页
     ·防卫(Guard)模型第21-22页
   ·抗病相关基因及其介导的信号传导第22-24页
     ·抗病基因第22-23页
     ·防卫基因第23页
     ·植物抗病基因介导的信号传导第23-24页
   ·抗病基因的应用第24-25页
 3 研究的目的和意义第25-26页
第二章 转pthA基因甜橙的分子鉴定第26-41页
 1 材料与方法第26-31页
   ·材料第26-27页
     ·植物材料第26页
     ·主要试剂和仪器第26-27页
     ·引物的设计与合成第27页
   ·方法第27-31页
     ·基因组DNA的提取及纯化第27-28页
     ·转化再生甜橙的PCR检测第28页
     ·探针的制备及灵敏度检测第28页
     ·总DNA的限制酶消化第28页
     ·酶切产物电泳第28-29页
     ·转膜及核酸固定第29页
     ·预杂交和杂交第29页
     ·洗膜第29-30页
     ·显影第30页
     ·总RNA的提取及纯化第30-31页
     ·RT-PCR反应第31页
 2 结果与分析第31-38页
   ·转基因甜橙的PCR检测第31-34页
     ·基因组DNA的提取及纯化第31-32页
     ·转化再生甜橙的PCR检测第32-34页
   ·转pthA基因甜橙外源基因southern杂交分析第34-36页
     ·探针灵敏度检测第34页
     ·总DNA的限制酶消化第34-35页
     ·酶切产物电泳第35页
     ·转膜及杂交、显影第35-36页
   ·总RNA提取及纯化第36-37页
   ·RT-PCR分析第37-38页
 3 讨论与小结第38-41页
   ·讨论第38-40页
   ·小结第40-41页
第三章 柑橘内参基因筛选及qPCR体系的建立第41-56页
 1 材料与方法第41-44页
   ·材料第41-43页
     ·植物材料第41页
     ·主要试剂和仪器第41-42页
     ·内参基因及引物第42-43页
   ·方法第43-44页
     ·RNA的提取及纯化第43页
     ·RT-PCR反应第43页
     ·定性PCR反应第43页
     ·定量PCR反应第43页
     ·内参基因表达稳定性的分析第43页
     ·比较2~(-ΔΔCt)法计算基因相对表达量第43-44页
     ·目标基因与内标基因扩增效率一致性的检测第44页
 2 结果与分析第44-54页
   ·总RNA的提取及纯化第44页
   ·引物特异性分析第44-48页
   ·内参基因及稳定性分析第48-52页
   ·目标基因与内参基因扩增效率一致性检测第52-54页
 3 讨论与小结第54-56页
   ·讨论第54-55页
   ·小结第55-56页
第四章 转pthA基因甜橙的表达分析第56-62页
 1.材料与方法第56-57页
   ·材料第56-57页
     ·植物材料第56页
     ·病原菌第56页
     ·主要试剂和仪器第56-57页
   ·方法第57页
     ·RNA的提取及纯化第57页
     ·RT-PCR反应第57页
     ·针刺活体接种转基因甜橙叶片第57页
     ·定量PCR分析甜橙中pthA基因表达水平第57页
 2 结果与分析第57-60页
   ·pthA甜橙接种病原菌前的表达分析第57-59页
   ·pthA-nls甜橙接种病原菌后的表达分析第59-60页
   ·统计部分转pthA-nls甜橙的百孔发病率第60页
 3 讨论与小结第60-62页
   ·讨论第60-61页
   ·小结第61-62页
全文总结第62-64页
参考文献第64-74页
缩略词表第74-75页
致谢第75-76页
个人简历第76页

 
 
论文编号BS402201,这篇论文共76
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