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里氏木霉RUT-C30甘露聚糖酶基因man1在毕赤酵母中的高效表达

论文目录

第一章文献综述	第1-25页
1 甘露聚糖酶的研究进展	第11-19页
·甘露聚糖酶作用方式及自然界的来源	第11-13页
·β-甘露聚糖酶的分离纯化和活性测定	第13页
·β-甘露聚糖酶研究的历史和菌种选育	第13-14页
·β-甘露聚糖酶基因工程的研究进展	第14-16页
·甘露聚糖酶的应用	第16-19页
2 巴斯德毕赤酵母表达系统	第19-22页
·毕赤酵母表达宿主菌	第19-20页
·毕赤酵母表达载体	第20页
·蛋白在毕赤酵母中的表达	第20-21页
·蛋白在毕赤酵母中的优化表达	第21-22页
3 研究内容和技术路线	第22-23页
4 本研究的目的和意义	第23-25页
第二章实验	第25-51页
1 材料	第25-28页
·菌株和质粒	第25页
·工具酶	第25页
·试剂	第25页
·培养基和部分溶液的配制	第25-27页
·主要仪器	第27-28页
2 方法	第28-41页
·甘露聚糖酶基因的克隆	第28-31页
·DNA片段与T载体的连接	第31页
·E.coli DH5α感受态细胞制备及转化方法	第31页
·筛选重组子	第31-32页
·质粒DNA的大量提取	第32-33页
·重组载体 pPIC9K-man1的构建	第33-34页
·PEG法转化毕赤酵母	第34-36页
·重组酵母的验证	第36页
·表达产物的检测	第36-37页
·重组酵母的高细胞密度发酵	第37-38页
·重组菌的稳定性检测	第38页
·表达甘露聚糖酶的酶学性质研究	第38-39页
·表达的甘露聚糖酶蛋白浓度测定	第39页
·酶解产物的离子色谱(IC)分析	第39-41页
3 结果	第41-51页
·里氏木霉man1基因全编码序列的克隆	第41-42页
·重组表达载体的构建和验证	第42-43页
·重组毕赤酵母的筛选和鉴定	第43-45页
·重组酵母在5L发酵罐中的细胞高密度发酵	第45-47页
·重组β-甘露聚糖酶的酶学性质	第47-49页
·重组甘露聚糖酶降解终产物分析	第49-51页
第三章讨论	第51-53页
结论	第53-54页
参考文献	第54-61页
致谢	第61-62页
作者简历	第62-64页

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