致谢 | 第7-10页 |
摘要 | 第10-12页 |
ABSTRACT | 第12-14页 |
英文缩写表 | 第25-27页 |
第一章 绪论 | 第27-62页 |
1.1 研究背景及意义 | 第27-31页 |
1.1.1 食源性致病菌 | 第27-28页 |
1.1.2 大肠杆菌O157:H7 | 第28-31页 |
1.2 传统检测方法 | 第31-39页 |
1.2.1 培养计数法 | 第31-34页 |
1.2.2 免疫学检测方法 | 第34页 |
1.2.3 分子生物学方法 | 第34-39页 |
1.3 比色传感检测方法 | 第39-49页 |
1.3.1 生物传感器 | 第39-40页 |
1.3.2 比色生物传感方法检测大肠杆菌O157:H7 | 第40-49页 |
1.4 AMP为生物识别元件检测食源性致病菌 | 第49-58页 |
1.4.1 抗菌肽 | 第50页 |
1.4.2 AMP的抗菌机理 | 第50-52页 |
1.4.3 以AMP为生物传感元件检测食源性致病菌 | 第52-58页 |
1.5 国内外研究尚存在的问题 | 第58页 |
1.6 本文研究目的和意义 | 第58-62页 |
1.6.1 本文研究主要内容 | 第60-61页 |
1.6.2 技术路线图 | 第61-62页 |
第二章 免疫磁分离技术在分离大肠杆菌O157:H7中的应用 | 第62-76页 |
2.1 引言 | 第62-63页 |
2.2 材料和方法 | 第63-68页 |
2.2.1 试剂与仪器 | 第63-64页 |
2.2.2 细菌的培养和计数 | 第64页 |
2.2.3 150nm免疫磁珠的制备 | 第64-65页 |
2.2.4 IMP-150对大肠杆菌O157:H7捕获效率 | 第65-66页 |
2.2.5 IMP-150用量及其与细菌孵育时间的优化 | 第66页 |
2.2.6 酶标法检测大肠杆菌O157:H7 | 第66页 |
2.2.7 “磁分离-洗脱”免疫磁珠的制备 | 第66-67页 |
2.2.8 大肠杆菌O157:H7的捕获和洗脱 | 第67-68页 |
2.3 结果与讨论 | 第68-75页 |
2.3.1 IMP-150的制备 | 第68-69页 |
2.3.2 IMP-150捕获大肠杆菌O157:H7条件优化 | 第69-70页 |
2.3.3 酶联免疫法检测大肠杆菌O157:H7 | 第70-71页 |
2.3.4 IMP-1k对大肠杆菌O157:H7捕获效率 | 第71-73页 |
2.3.5 IMP-1k的洗脱效率 | 第73-74页 |
2.3.6 磁珠捕获的特异性 | 第74-75页 |
2.4 本章小结 | 第75-76页 |
第三章 基于生物素-抗菌肽识别检测大肠杆菌O157:H7 | 第76-87页 |
3.1 引言 | 第76-77页 |
3.2 材料和方法 | 第77-79页 |
3.2.1 试剂与仪器 | 第77-78页 |
3.2.2 细菌的培养和计数 | 第78页 |
3.2.3 检测生物素化的AMP(bio-AMP) | 第78-79页 |
3.2.4 检测大肠杆菌O157:H7 | 第79页 |
3.3 结果与讨论 | 第79-86页 |
3.3.1 原理可行性验证 | 第79-80页 |
3.3.2 条件优化 | 第80-83页 |
3.3.3 检测bio-AMP浓度 | 第83-84页 |
3.3.4 检测大肠杆菌O157:H7 | 第84-86页 |
3.4 本章小结 | 第86-87页 |
第四章 基于抗菌肽-辣根过氧化物酶的快速灵敏检测大肠杆菌O157:H7的比色分析法 | 第87-103页 |
4.1 引言 | 第87-89页 |
4.2 材料和方法 | 第89-92页 |
4.2.1 试剂与仪器 | 第89-90页 |
4.2.2 细菌的培养和计数 | 第90页 |
4.2.3 AMP-辣根过氧化物酶(AMP-HRP)探针制备 | 第90-91页 |
4.2.4 抗体-辣根过氧化物酶(Ab-HRP)探针制备及其条件优化 | 第91页 |
4.2.5 AMP-HRP探针与大肠杆菌O157:H7结合 | 第91页 |
4.2.6 IMP-150捕获大肠杆菌O157:H7直接检测 | 第91页 |
4.2.7 过滤法检测大肠杆菌O157:H7 | 第91-92页 |
4.2.8 检测食品掺杂样本中的大肠杆菌O157:H7 | 第92页 |
4.3 结果与讨论 | 第92-102页 |
4.3.1 AMP-HRP的结合活性 | 第92-93页 |
4.3.2 条件优化 | 第93-96页 |
4.3.3 IMP-150捕获大肠杆菌O157:H7后直接检测 | 第96-98页 |
4.3.4 检测大肠杆菌O157:H7 | 第98页 |
4.3.5 基于AMP检测平台的特异性 | 第98-99页 |
4.3.6 提高检测大肠杆菌O157:H7的特异性 | 第99-101页 |
4.3.7 检测食品样本中的大肠杆菌O157:H7 | 第101-102页 |
4.4 本章小结 | 第102-103页 |
第五章 基于抗菌肽-磁纳米颗粒和免标记脲酶检测大肠杆菌O157:H7 | 第103-117页 |
5.1 引言 | 第103-105页 |
5.2 材料和方法 | 第105-107页 |
5.2.1 试剂与仪器 | 第105页 |
5.2.2 细菌的培养、计数和磁分离洗脱 | 第105-106页 |
5.2.3 抗菌肽修饰纳米磁珠的制备 | 第106页 |
5.2.4 MNP-AMP对大肠杆菌0157:H7捕获效率 | 第106页 |
5.2.5 检测大肠杆菌O157:H7 | 第106页 |
5.2.6 食品掺杂样本处理 | 第106-107页 |
5.3 结果与讨论 | 第107-115页 |
5.3.1 原理可行性验证 | 第107-109页 |
5.3.2 条优化件 | 第109-112页 |
5.3.3 大肠杆菌0157:H7的检测 | 第112-113页 |
5.3.4 AMP-MNP检测系统的特异性 | 第113-114页 |
5.3.5 检测食品样本中的大肠杆菌O157:H7 | 第114-115页 |
5.4 本章小结 | 第115-117页 |
第六章 结论与展望 | 第117-120页 |
6.1 研究结论 | 第117-118页 |
6.2 研究展望 | 第118-120页 |
参考文献 | 第120-132页 |
个人简历 | 第132-133页 |