摘要 | 第14-17页 |
Abstract | 第17-21页 |
第一章 绪论 | 第22-65页 |
引言 | 第22-25页 |
1.1 荧光过程与荧光显微镜 | 第25-32页 |
1.1.1 单光子荧光过程与斯托克斯位移 | 第25-27页 |
1.1.2 荧光显微镜与分光技术 | 第27-28页 |
1.1.3 共聚焦显微镜与分光技术 | 第28-29页 |
1.1.4 双光子荧光过程与反斯托克斯位移 | 第29-31页 |
1.1.5 双光子荧光显微镜与分光技术 | 第31-32页 |
1.2 荧光探针的识别机理 | 第32-43页 |
1.2.1 荧光探针的作用 | 第32页 |
1.2.2 光诱导电子转移(Photoinduced Electron Transfer, PET) | 第32-34页 |
1.2.3 分子内电荷转移(Intramolecular charge transfer, ICT) | 第34-36页 |
1.2.4 荧光共振能量转移(Fluorescence resonance energy transfer, FRET) | 第36-38页 |
1.2.5 激基缔/复合物(excimers/exciplexes) | 第38-40页 |
1.2.6 激发态分子内质子转移(excited-state intramolecular proton transfer,ESIPT) | 第40-42页 |
1.2.7 聚集诱导发光(aggregation-induced emission,AIE) | 第42-43页 |
1.3 成像组织中线粒体探针的研究现状 | 第43-46页 |
1.3.1 成像组织中线粒体的意义 | 第43-45页 |
1.3.2 成像组织中线粒体探针的研究现状 | 第45-46页 |
1.4 线粒体追踪型探针的研究现状 | 第46-48页 |
1.4.1 追踪线粒体的意义 | 第46页 |
1.4.2 线粒体追踪型探针的研究现状 | 第46-48页 |
1.5 成像细胞质膜上脂筏/非脂筏微区探针的研究现状 | 第48-53页 |
1.5.1 成像细胞质膜上脂筏/非脂筏微区的意义 | 第48-49页 |
1.5.2 基于黏度原理成像细胞质膜上脂筏/非脂筏微区探针的研究现状 | 第49页 |
1.5.3 基于极性原理成像细胞质膜上脂筏/非脂筏微区探针的研究现状 | 第49-52页 |
1.5.4 基于聚集/单体原理成像细胞质膜上脂筏/非脂筏微区探针的研究现状 | 第52-53页 |
1.6 本论文的主要内容和创新 | 第53-55页 |
参考文献 | 第55-65页 |
第二章 探针的合成与表征 | 第65-75页 |
2.1 原位、高保真地成像组织中线粒体探针的合成与表征 | 第65-66页 |
2.2 带有长烷基链的线粒体追踪型探针的合成与表征 | 第66-70页 |
2.2.1 ECPI-12的合成与表征 | 第67-68页 |
2.2.2 IVPI-12的合成与表征 | 第68-69页 |
2.2.3 ECPI-2的合成与表征 | 第69-70页 |
2.2.4 IVPI-2的合成与表征 | 第70页 |
2.3 双光子细胞膜探针的合成与表征 | 第70-71页 |
2.4 区分成像细胞膜上脂筏/非脂筏微区探针的合成与表征 | 第71-75页 |
2.4.1 DSPI-18的合成与表征 | 第72-73页 |
2.4.2 DSPI-12的合成与表征 | 第73-75页 |
第三章 带有双靶向基团的线粒体探针用于原位高保真组织成像 | 第75-98页 |
引言 | 第75-76页 |
3.1 具有超高选择性的线粒体探针的设计思路 | 第76-77页 |
3.2 实验方法 | 第77-79页 |
3.2.1 紫外吸收谱与荧光发射谱的测试方法 | 第77页 |
3.2.2 荧光量子产率的计算 | 第77-78页 |
3.2.3 细胞培养和染色方法 | 第78页 |
3.2.4 毒性测试 | 第78页 |
3.2.5 活性组织染色 | 第78-79页 |
3.2.6 荧光成像 | 第79页 |
3.3 光物理性质测试 | 第79-80页 |
3.4 细胞成像及复染实验 | 第80-82页 |
3.5 高分辨率成像线粒体内膜 | 第82-84页 |
3.6 在活细胞中快速、高保真地成像线粒体 | 第84-85页 |
3.7 在活性组织中快速、高保真度地成像线粒体 | 第85-89页 |
3.8 实时追踪线粒体裂分的动态过程 | 第89-90页 |
3.9 光稳定性和细胞毒性测试 | 第90-92页 |
3.10 小结 | 第92-93页 |
参考文献 | 第93-98页 |
第四章 带有长烷基链的非反应型线粒体追踪探针及其在线粒体自噬观测中的应用 | 第98-133页 |
引言 | 第98-99页 |
4.1 非反应型线粒体追踪剂的设计思路 | 第99-101页 |
4.2 实验方法 | 第101-103页 |
4.2.1 光物理性质的测试方法 | 第101页 |
4.2.2 荧光量子产率和双光子吸收截面的计算 | 第101-102页 |
4.2.3 细胞培养、染色方法和组织染色 | 第102页 |
4.2.4 毒性测试 | 第102-103页 |
4.2.5 荧光成像 | 第103页 |
4.3 单光子光物理性质 | 第103-105页 |
4.4 复染实验 | 第105-110页 |
4.4.1 在活细胞中的复染实验 | 第105-107页 |
4.4.2 在线粒体膜电位降低的活细胞中的复染实验 | 第107-108页 |
4.4.3 在固定细胞中的复染实验 | 第108-110页 |
4.5 机理探讨 | 第110-113页 |
4.6 毒性测试 | 第113-115页 |
4.7 双光子测试 | 第115-119页 |
4.7.1 双光子光物理性质测试 | 第115-116页 |
4.7.2 双光子细胞成像 | 第116-117页 |
4.7.3 双光子组织成像 | 第117-119页 |
4.8 追踪线粒体自噬 | 第119-127页 |
4.9 小结 | 第127-129页 |
参考文献 | 第129-133页 |
第五章 双光子细胞质膜探针的设计、合成及其在生物成像中的应用 | 第133-146页 |
引言 | 第133页 |
5.1 双光子细胞质膜探针的设计思路 | 第133-134页 |
5.2 实验方法 | 第134-136页 |
5.2.1 紫外吸收谱与荧光发射谱的测试方法 | 第134页 |
5.2.2 荧光量子产率和双光子吸收截面的计算 | 第134-135页 |
5.2.3 细胞培养和染色方法 | 第135页 |
5.2.4 毒性测试 | 第135页 |
5.2.5 荧光成像 | 第135-136页 |
5.3 光物理性质测试 | 第136-138页 |
5.3.1 单光子光物理性质测试 | 第136-137页 |
5.3.2 双光子光物理性质测试 | 第137-138页 |
5.4 单/双光子成像 | 第138-140页 |
5.5 ECPI-18与S-11348的共染实验和毒性实验 | 第140-141页 |
5.5.1 ECPI-18与S-11348的共染实验 | 第140页 |
5.5.2 毒性实验 | 第140-141页 |
5.6 ECPI-18与Hoechst33342和MTDR的多染实验 | 第141-142页 |
5.7 小结 | 第142-143页 |
参考文献 | 第143-146页 |
第六章 区分成像细胞质膜上脂筏/非脂筏微区的荧光探针 | 第146-163页 |
引言 | 第146-147页 |
6.1 探针设计思路 | 第147-148页 |
6.2 实验方法 | 第148-151页 |
6.2.1 光物理性质的测试方法 | 第148页 |
6.2.2 荧光量子产率的计算 | 第148-149页 |
6.2.3 细胞培养和染色方法 | 第149页 |
6.2.4 囊泡的制备和染色 | 第149-150页 |
6.2.5 实彩成像方法 | 第150页 |
6.2.6 毒性测试 | 第150-151页 |
6.2.7 荧光成像 | 第151页 |
6.3 光物理性质测试 | 第151-153页 |
6.4 实彩成像人工囊泡上的脂筏/非脂筏微区 | 第153-155页 |
6.5 探针对细胞质膜的选择性 | 第155-156页 |
6.6 实彩成像细胞膜上的脂筏/非脂筏微区 | 第156-157页 |
6.7 毒性测试 | 第157-158页 |
6.8 DSPI-12和DSPI-18的内在化研究 | 第158-160页 |
6.9 小结 | 第160-161页 |
参考文献 | 第161-163页 |
第七章 总结与展望 | 第163-166页 |
7.1 论文总结 | 第163-164页 |
7.2 创新点 | 第164页 |
7.3 工作展望:有待发展的新型荧光探针 | 第164-166页 |
7.3.1 带有双靶向基团的荧光探针 | 第164-165页 |
7.3.2 单分子双靶标荧光探针 | 第165页 |
7.3.3 靶向细胞器中的超微结构的荧光探针 | 第165-166页 |
致谢 | 第166-167页 |
攻读博士学位期间取得的成果 | 第167-169页 |
附录 | 第169-199页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第199页 |