摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
缩略词表(Abbreviations) | 第11-12页 |
1 前言 | 第12-24页 |
1.1 研究背景 | 第12页 |
1.2 文献综述 | 第12-22页 |
1.2.1 低温胁迫概述 | 第12-13页 |
1.2.2 植物在生理水平对低温的应答 | 第13-14页 |
1.2.3 植物对低温信号的感应机制 | 第14-15页 |
1.2.4 CBF/DREB基因的转录调控在植物低温中的作用 | 第15-18页 |
1.2.5 草坪草对低温胁迫的响应机制 | 第18-22页 |
1.3 本研究的目的和意义 | 第22-24页 |
2 材料与方法 | 第24-44页 |
2.1 实验材料 | 第24-25页 |
2.1.1 植物材料 | 第24页 |
2.1.2 试剂和仪器 | 第24-25页 |
2.2 高羊茅品种的抗寒性筛选及抗性机理 | 第25-30页 |
2.2.1 冻害耐受性评价 | 第25页 |
2.2.2 冻害胁迫对植物生长的影响 | 第25页 |
2.2.3 脯氨酸含量的测定 | 第25-26页 |
2.2.4 可溶性糖含量的测定 | 第26页 |
2.2.5 过氧化物酶(POD)活性测定 | 第26页 |
2.2.6 总超氧化物歧化酶(SOD)活性测定 | 第26-27页 |
2.2.7 过氧化氢酶(CAT)活性测定 | 第27页 |
2.2.8 生理指标的相关分析 | 第27页 |
2.2.9 从转录组数据中鉴定Fa DREB1 基因 | 第27页 |
2.2.10 高羊茅DREB1 的分子系统发育分析 | 第27页 |
2.2.11 实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第27-30页 |
2.2.12 统计数据分析 | 第30页 |
2.3 冻害对暖季型狗牙根和冷季型高羊茅生长及生理指标的影响 | 第30-31页 |
2.3.1 冻害胁迫对狗牙根和高羊茅生长的影响 | 第30页 |
2.3.2 叶片含水量 | 第30页 |
2.3.3 脯氨酸含量的测定 | 第30-31页 |
2.3.4 可溶性糖含量的测定 | 第31页 |
2.3.5 丙二醛(MDA)含量的测定 | 第31页 |
2.3.6 过氧化物酶(POD)活性测定 | 第31页 |
2.3.7 总超氧化物歧化酶(SOD)活性测定 | 第31页 |
2.3.8 过氧化氢酶(CAT)活性测定 | 第31页 |
2.4 暖季型狗牙根和冷季型高羊茅DREB1 基因的克隆和功能解析 | 第31-39页 |
2.4.1 RNA-seq数据分析 | 第31-32页 |
2.4.2 引物的设计和合成 | 第32页 |
2.4.3 RNA的提取 | 第32页 |
2.4.4 cDNA的合成 | 第32页 |
2.4.5 目的基因的克隆 | 第32-34页 |
2.4.6 目的片段与T载体的连接 | 第34页 |
2.4.7 连接产物转化 | 第34页 |
2.4.8 菌落PCR鉴定 | 第34-35页 |
2.4.9 序列比对与进化树分析 | 第35页 |
2.4.10 过表达载体构建 | 第35-39页 |
2.5 狗牙根CdDREB1A和高羊茅FaDREB1A启动子的克隆和分析 | 第39-44页 |
2.5.1 全基因组DNA提取 | 第39-40页 |
2.5.2 FNPI-PCR方法克隆启动子 | 第40-44页 |
3 结果和分析 | 第44-70页 |
3.1 高羊茅品种的抗寒性筛选及抗性机理 | 第44-52页 |
3.1.1 高羊茅品种的抗冻性筛选 | 第44-45页 |
3.1.2 冻害胁迫对高羊茅生长的影响 | 第45-46页 |
3.1.3 冻害胁迫下高羊茅的生理变化 | 第46-47页 |
3.1.4 冻害胁迫对高羊茅抗氧化酶活性的影响 | 第47-48页 |
3.1.5 高羊茅生理指标的相关分析 | 第48-49页 |
3.1.6 高羊茅Fa DREB-like基因的序列分析 | 第49-51页 |
3.1.7 Fa DREB1-like基因在两种高羊茅品种的表达量变化 | 第51-52页 |
3.2 冻害对暖季型狗牙根和冷季型高羊茅生长及生理指标的影响 | 第52-54页 |
3.2.1 冻害胁迫对狗牙根和高羊茅生长的影响 | 第52页 |
3.2.2 冻害胁迫对狗牙根和高羊茅渗透调节物质和MDA的影响 | 第52-53页 |
3.2.3 冻害胁迫对狗牙根和高羊茅抗氧化酶活性的影响 | 第53-54页 |
3.3 狗牙根和高羊茅DREB1 基因的克隆和功能解析 | 第54-67页 |
3.3.1 低温胁迫对狗牙根和高羊茅转录组的影响 | 第54-55页 |
3.3.2 狗牙根和高羊茅低温诱导基因的聚类分析 | 第55-56页 |
3.3.3 低温处理后狗牙根和高羊茅中DEGs的 GO富集分析 | 第56-57页 |
3.3.4 狗牙根和高羊茅DREB1 基因与水稻系统进化树分析 | 第57-59页 |
3.3.5 狗牙根和高羊茅DREB1 基因与水稻氨基酸序列比对 | 第59-60页 |
3.3.6 狗牙根和高羊茅RNA质量检测 | 第60-61页 |
3.3.7 狗牙根和高羊茅DREB1 基因CDS全长的克隆 | 第61页 |
3.3.8 狗牙根和高羊茅DREB1 基因的序列分析 | 第61-62页 |
3.3.9 植物超表达载体的构建 | 第62-63页 |
3.3.10 转基因拟南芥的鉴定 | 第63-64页 |
3.3.11 转基因拟南芥的表达量分析 | 第64-65页 |
3.3.12 转基因拟南芥抗寒性的变化 | 第65-67页 |
3.4 狗牙根和高羊茅DREB1A基因启动子的克隆和分析 | 第67-70页 |
3.4.1 启动子片段的克隆 | 第67页 |
3.4.2 启动子序列Motif分析 | 第67-70页 |
4 讨论 | 第70-76页 |
4.1 草坪草品种间的抗寒性 | 第70-71页 |
4.2 草坪草生理指标与低温应答的关系 | 第71-72页 |
4.3 草坪草低温应答的分子调控机制 | 第72-76页 |
结论 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-95页 |
附录 | 第95-98页 |
作者简历 | 第98页 |
已发表学术论文 | 第98-99页 |
致谢 | 第99页 |