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重组组织型纤溶酶原激活剂变异体(RETEPLASE)工程菌的培养与体外复性的研究 |
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论文目录 |
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中文摘要 | 第1-11页 | Abstract | 第11-16页 | 论文缩写词表 | 第16-17页 | 第一章 绪论 | 第17-41页 | ·溶血栓药物的研究概况 | 第17-19页 | ·表达系统研究概况 | 第19-29页 | ·酵母和丝状真菌表达体系 | 第21-22页 | ·培养哺乳动物细胞生产重组蛋白 | 第22-24页 | ·E.coil表达体系 | 第24-29页 | ·利用E.coli生产重组蛋白 | 第29-36页 | ·包涵体的体外复性 | 第29-30页 | ·复性过程中的"瓶颈" | 第30-32页 | ·二硫键的形成 | 第32-34页 | ·包涵体蛋白的复性方法 | 第34-36页 | 参考文献 | 第36-41页 | 第二章 表达体系的选择与构建 | 第41-55页 | ·材料与仪器 | 第42-43页 | ·菌株及质粒 | 第42页 | ·试剂 | 第42-43页 | ·主要仪器 | 第43页 | ·培养基 | 第43页 | ·实验方法 | 第43-47页 | ·Escherichia coli工程菌的构建 | 第43-45页 | ·Pichia pastoris工程菌的构建 | 第45-46页 | ·免疫印迹(Western-Blot assay)鉴定 | 第46-47页 | ·结果 | 第47-52页 | ·E.coli工程菌的构建 | 第47-50页 | ·P.pastoris工程菌的构建 | 第50-52页 | ·讨论 | 第52-53页 | 小结 | 第53-54页 | 参考文献 | 第54-55页 | 第三章 发酵条件的优化和Reteplase包涵体的制备 | 第55-71页 | ·材料和仪器 | 第58-59页 | ·试剂 | 第58页 | ·仪器与设备 | 第58页 | ·菌株 | 第58页 | ·培养基 | 第58-59页 | ·实验方法 | 第59-60页 | ·摇瓶培养 | 第59页 | ·发酵罐培养 | 第59页 | ·包涵体洗涤 | 第59页 | ·包涵体的溶解 | 第59-60页 | ·超声波法辅助包涵体溶解 | 第60页 | ·其他检测方法 | 第60页 | ·结果 | 第60-64页 | ·IPTG浓度的影响 | 第60-61页 | ·诱导时间的确定 | 第61-62页 | ·葡萄糖浓度对目的蛋白表达量的影响 | 第62-63页 | ·诱导后提高培养温度 | 第63页 | ·包涵体的表达及洗涤 | 第63-64页 | ·包涵体溶解及超声波法辅助包涵体溶解 | 第64页 | ·讨论 | 第64-68页 | 小结 | 第68-69页 | 参考文献 | 第69-71页 | 第四章 Reteplase体外复性的研究 | 第71-100页 | ·材料与仪器 | 第74-76页 | ·试剂 | 第74-75页 | ·主要实验仪器 | 第75-76页 | ·实验方法 | 第76-78页 | ·稀释复性 | 第76页 | ·PDI辅助蛋白复性 | 第76页 | ·SEC辅助Reteplase蛋白复性 | 第76-77页 | ·ETI亲和层析纯化Reteplase | 第77页 | ·其他分析方法 | 第77-78页 | ·结果 | 第78-86页 | ·稀释复性 | 第78-79页 | ·PDI辅助蛋白复性 | 第79-80页 | ·色谱法辅助复性 | 第80-84页 | ·不同方法复性率的比较 | 第84-85页 | ·ETI亲和层析纯化Reteplase | 第85-86页 | ·讨论 | 第86-95页 | 小结 | 第95-96页 | 参考文献 | 第96-100页 | 总结与展望 | 第100-105页 | 致谢 | 第105-106页 | 在读期间发表论文情况 | 第106-107页 | 学位论文评阅及答辩情况表 | 第107页 |
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