| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-17页 |
| ·菌核病研究进展 | 第10-12页 |
| ·菌核病 | 第10页 |
| ·生物学特性 | 第10页 |
| ·致病机制 | 第10-11页 |
| ·抗病研究进展 | 第11-12页 |
| ·拟南芥相关研究进展 | 第12-16页 |
| ·模式植物拟南芥 | 第12-14页 |
| ·一般生物学特性 | 第12-13页 |
| ·分子生物学特性 | 第13-14页 |
| ·拟南芥的分子生物学研究策略 | 第14-16页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第16-17页 |
| 2.材料与方法 | 第17-29页 |
| ·实验材料 | 第17-19页 |
| ·拟南芥 | 第17页 |
| ·菌株 | 第17页 |
| ·质粒载体 | 第17-18页 |
| ·试剂 | 第18-19页 |
| ·主要生化试剂 | 第18-19页 |
| ·其他试剂 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-29页 |
| ·拟南芥的种植 | 第19-20页 |
| ·菌核病菌的培养与接种 | 第20-21页 |
| ·过量表达载体的构建 | 第21-26页 |
| ·技术路线 | 第21-22页 |
| ·PCR扩增目的片段 | 第22-23页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物 | 第23-24页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第24页 |
| ·PCR产物的连接 | 第24-25页 |
| ·连接反应物转化感受态细胞 | 第25页 |
| ·质粒的小量提取 | 第25-26页 |
| ·质粒的酶切与连接 | 第26页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第26页 |
| ·构建好的质粒载体转化农杆菌感受态细胞 | 第26页 |
| ·农杆菌转化拟南芥(浸花法) | 第26-27页 |
| ·Basta土壤筛选转化植株 | 第27页 |
| ·拟南芥总RNA的提取 | 第27-28页 |
| ·反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR) | 第28-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-40页 |
| ·T-DNA插入激活标签突变体的抗菌核病筛选 | 第29页 |
| ·At2g30870基因的T-DNA插入失活突变体功能验证 | 第29-30页 |
| ·抗菌核病基因At2g30870、At3g16530、At4g13180的分子克隆 | 第30-34页 |
| ·高保真酶PCR扩增基因At2g30870、At3g16530、At4g13180的结果 | 第30-31页 |
| ·PCR产物的T-A克隆 | 第31-32页 |
| ·序列测定和分析 | 第32页 |
| ·重组质粒的菌液PCR验证及酶切验证 | 第32-33页 |
| ·重组质粒转化农杆菌感受态细胞及菌液PCR验证 | 第33-34页 |
| ·抗草酸基因At2g39700、At2g39710、At5g10460的分子克隆 | 第34-38页 |
| ·利用高保真酶进行PCR扩增At2g39700、At2g39710等基因 | 第34-35页 |
| ·PCR产物的T-A克隆 | 第35-36页 |
| ·序列测定和分析 | 第36页 |
| ·重组质粒的菌液PCR验证及酶切验证 | 第36-37页 |
| ·重组质粒转化农杆菌感受态细胞及菌液PCR验证 | 第37-38页 |
| ·基因的功能验证 | 第38-40页 |
| ·纯合突变体筛选 | 第38页 |
| ·RT-PCR验证基因的表达情况 | 第38-39页 |
| ·突变体的表型分析 | 第39-40页 |
| 4.结论与讨论 | 第40-42页 |
| ·菌核病抗性增强突变体的筛选 | 第40页 |
| ·T-DNA插入失活突变体抗/感菌状念 核病验证 | 第40页 |
| ·基因的功能分析 | 第40-42页 |
| 小结 | 第42-43页 |
| 附录1 | 第43-48页 |
| 附录2 | 第48-56页 |
| 参考文献 | 第56-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
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