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当前位置:教育论文中心首页--硕士论文--工程改造马克斯克鲁维酵母进行混合糖共利用
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工程改造马克斯克鲁维酵母进行混合糖共利用
 
     论文目录
 
摘要第5-7页
ABSTRACT第7-8页
第1章 绪论第12-20页
    1.1 马克思克鲁维酵母作为发酵菌株的优势第12页
    1.2 马克思克鲁维酵母的工业应用第12-15页
        1.2.1 生产耐热酶类第13页
        1.2.2 生产乙醇或木糖醇第13-15页
    1.3 马克思克鲁维酵母的研究方向第15-19页
    1.4 本论文代谢工程改造思路第19-20页
第2章 实验材料和方法第20-42页
    2.1 实验试剂与设备第20-21页
        2.1.1 实验所用培养基第20页
        2.1.2 实验使用酶与试剂第20-21页
        2.1.3 实验使用的仪器设备第21页
    2.2 实验菌株、载体及引物第21-23页
        2.2.1 菌株与质粒第21-22页
        2.2.2 实验所用引物第22-23页
    2.3 实验方法第23-29页
        2.3.1 大肠杆菌感受态细胞的制备第23-24页
        2.3.2 大肠杆菌的化学法转化第24页
        2.3.3 质粒提取第24-25页
        2.3.4 凝胶中DNA以及PCR产物的回收第25页
        2.3.5 酶切产物或PCR产物的纯化第25页
        2.3.6 DNA的乙醇沉淀法回收第25-26页
        2.3.7 马克斯克鲁维酵母的转化第26页
        2.3.8 提取酵母基因组的方法第26-27页
        2.3.9 酵母RNA提取的流程第27页
        2.3.10 RNA反转录合成cDNA第27-28页
        2.3.11 RT-PCR程序第28页
        2.3.12 Bradford法测定蛋白含量第28页
        2.3.13 酵母糖类代谢分析培养及发酵流程第28-29页
        2.3.14 XR、DH、XK酶活的测定第29页
    2.4 质粒与菌株的构建第29-42页
        2.4.1 KmHXK的克隆第29-31页
        2.4.2 KmHXK基因敲除框的构建第31-33页
        2.4.3 KmGLK的克隆第33-34页
        2.4.4 KmGLK基因敲除框的构建第34-35页
        2.4.5 KmGLK基因过表达质粒的构建第35-37页
        2.4.6 KmMIG1的克隆第37-38页
        2.4.7 KmMIG1基因敲除框的构建第38-39页
        2.4.8 基因工程改造马克斯克鲁维酵母工程菌株第39-40页
        2.4.9 基因工程改造马克斯克鲁维酵母木糖醇生产菌株第40-42页
第3章 实验结果和讨论第42-64页
    3.1 葡萄糖抑制相关基因的敲除与表型分析第42-47页
        3.1.1 葡萄糖抑制相关基因的敲除第42-43页
        3.1.2 葡萄糖类似物(2-DG)鉴定敲除菌株葡萄糖抑制效应第43-45页
        3.1.3 通过混合碳源的利用鉴定葡萄糖抑制效应第45-47页
    3.2 在YLM001的基础上过表达KmGLK对酵母生长的影响第47-49页
    3.3 YLM001基础上过表达KmGLK对酵母葡萄糖抑制效应的影响第49-57页
        3.3.1 混合碳源利用的结果第49-50页
        3.3.2 葡萄糖类似物2-DG鉴定敲除菌株葡萄糖抑制效应第50-51页
        3.3.3 Real-time PCR分析第51-55页
        3.3.4 木糖代谢酶类酶活分析第55-57页
    3.4 改造生产木糖醇的菌株验证发酵第57-61页
        3.4.1 低OD发酵中单糖及木糖醇含量的分析第57-59页
        3.4.2 高OD发酵中单糖及木糖醇含量的分析第59-61页
    3.5 小结第61-64页
参考文献第64-70页
致谢第70-72页
在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果第72页

 
 
论文编号BS3312161,这篇论文共72
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