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D1样受体激动剂和klotho启动子激活剂的药物筛选
 
     论文目录
 
摘要第1-7页
Abstract第7-11页
英文缩略表第11-19页
1 绪论第19-45页
   ·高通量筛选是药物发现早期阶段的最好工具之一第19-24页
     ·高通量筛选四要素第20-21页
     ·高通量筛选策略第21-24页
   ·高通量筛选基本方法简介第24-33页
     ·荧光微体积数字图象测定技术第24页
     ·荧光偏振第24-25页
     ·竞争性ELISA测定第25页
     ·闪烁邻近测定法第25页
     ·共振能量转移第25-26页
     ·均相时间分辨荧光第26-27页
     ·载黑色素细胞测定法第27页
     ·报告基因测定法第27-28页
     ·钙离子测定法第28页
     ·基于核磁共振(NMR)技术的筛选方法第28-29页
     ·多道毛细管电泳第29-30页
     ·大小排除色谱法第30-31页
     ·过滤板法第31页
     ·生物传感器第31-32页
     ·基于MS的高通量筛选方法第32-33页
   ·高通量药物筛选的药靶第33-35页
   ·G-蛋白偶联受体的高通量药物筛选第35-42页
     ·G蛋白偶联受体概述第35-37页
     ·G蛋白偶联受体的药物筛选方法第37-42页
     ·测定方法的选择及发展前景第42页
   ·本文的研究内容第42-45页
2 D1样受体及其激动剂筛选的意义、原理和技术路线第45-67页
   ·D1样受体分布、结构与功能第45-47页
     ·分布第45-46页
     ·结构第46页
     ·功能与药理学第46-47页
   ·筛选D1样受体激动剂的重要意义第47-63页
     ·D1样激动剂与Parkinson病的治疗第47-52页
     ·D1激动剂与记忆的改善第52-56页
     ·D1激动剂与药物成瘾的治疗第56-63页
   ·D1样受体激动剂筛选的原理和技术路线第63-67页
3 报告基因系统第67-85页
   ·G-蛋白偶联受体的高通量筛选报告基因方法概述第67-71页
     ·报告基因系统的组成第67-71页
     ·报告基因系统的工作原理第71页
   ·报告基因的构建第71-78页
     ·材料第71-72页
     ·方法第72-74页
     ·结果第74-78页
   ·报告基因系统的功能第78-83页
     ·材料和方法第78-79页
     ·结果第79-83页
   ·讨论第83-85页
4 D1样受体激动剂的筛选第85-107页
   ·D1样受体的克隆第85-88页
     ·D1受体的克隆第85-87页
     ·D5受体的克隆第87-88页
   ·D1激动剂药物筛选细胞模型的建立第88-93页
     ·筛选细胞株的建立第88-89页
     ·细胞模型的评估第89-92页
     ·讨论第92-93页
   ·筛选条件的优化第93-96页
     ·细胞数目对筛选的影响第93-94页
     ·细胞与药物共孵时间对筛选的影响第94页
     ·DMSO浓度对筛选的影响第94-95页
     ·萤火虫荧光素酶底物的浓度对测试结果的影响第95-96页
   ·D1 激动剂筛选方法的评估第96-99页
     ·评估的原理和方法第96-98页
     ·系统的稳定性评估第98页
     ·筛选系统的Zˊ因子分析第98-99页
     ·讨论第99页
   ·D1激动剂的筛选和活性物质的确认第99-104页
     ·筛选的实施第99-100页
     ·活性候选物的确认第100-101页
     ·排除假阳性第101-104页
     ·进一步确证第104页
   ·讨论第104-107页
5 D5受体的多态性,D5B和它的功能第107-125页
   ·D5受体的多态性第107-108页
     ·D5的多态性第107-108页
     ·D5的假基因第108页
   ·D5B的序列分析第108-120页
     ·BLAST分析第108-116页
     ·D5B、D5和D5一个假基因D5Ψ的序列对比第116-117页
     ·D5B与D1-like受体的比较及功能分析第117-120页
   ·D5B的功能第120-123页
     ·报告基因方法评估D5B的功能第120-122页
     ·cAMP测定第122-123页
   ·讨论第123-125页
6 klotho基因及其启动激活剂筛选的意义、原理和技术路线第125-133页
   ·klotho基因及其功能第125-129页
     ·klotho基因与衰老相关疾病第125-126页
     ·klotho基因及其编码的蛋白第126-127页
     ·klotho小鼠衰老表型可能的分子机机制第127-129页
   ·体内调节klotho表达的重要意义第129-131页
     ·Klotho蛋白的功能第129-130页
     ·人的klotho基因与衰老相关的疾病第130-131页
   ·klotho启动子激活剂筛选的原理和技术路线第131-133页
7 klotho启动子激活剂的筛选第133-149页
   ·klotho启动子的克隆第133-137页
     ·klotho启动子的扫描分析第133-134页
     ·klotho启动子的克隆第134-137页
   ·筛选模型的建立第137-140页
     ·建立稳定的细胞株第137页
     ·建立衰老细胞模型第137-139页
     ·讨论第139-140页
   ·筛选条件的优化和筛选方法的评估第140-142页
     ·细胞与药物和H2O2共孵时间对筛选的影响第140页
     ·细胞数目和DMSO对筛选的影响第140-141页
     ·筛选系统的评估第141-142页
   ·klotho启动子激活剂的筛选和活性物质的确认第142-146页
     ·筛选的实施第142-144页
     ·激活剂的活性表征第144-146页
   ·讨论第146-149页
8 天然化合物的提取和活性物质的生物活性导向分离第149-155页
   ·天然物提取和天然物库第149-151页
     ·中药材的选择第149页
     ·中药的提取和提取物库的建设第149页
     ·讨论第149-151页
   ·klotho启动子激活剂的生物活性导向分离第151-155页
     ·药物活性的检测第151页
     ·SBG530中活性成份的导向分离第151-154页
     ·讨论第154-155页
9 结论第155-157页
致谢第157-159页
参考文献第159-181页
附图与附录第181-197页

 
 
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