| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-16页 |
| 符号说明 | 第16-17页 |
| 前言 | 第17-19页 |
| 第一部分 人maspin基因启动子的克隆及活性测定 | 第19-36页 |
| 材料 | 第19-20页 |
| 试剂 | 第19-20页 |
| 主要仪器 | 第20页 |
| 方法 | 第20-29页 |
| 人基因组DNA的提取 | 第21页 |
| Maspin基因5′上游847bp启动子片段的PCR扩增及纯化 | 第21-22页 |
| 847bp启动子片段的T-载体亚克隆 | 第22-25页 |
| 荧光素酶报道基因载体pGL3-847质粒的构建 | 第25-28页 |
| 细胞的培养 | 第28页 |
| 细胞转染实验 | 第28-29页 |
| 荧光素酶活性测定 | 第29页 |
| 结果 | 第29-33页 |
| PCR扩增maspin基因5′上游847bp启动子片段及其T克隆鉴定 | 第29-30页 |
| pGL_3-847bp启动子质粒的鉴定及测序 | 第30-31页 |
| pGL_3-847bp启动子转染LNCaP细胞及双荧光素酶活性测定 | 第31-32页 |
| 雄激素类似物R1881在LNCaP细胞中对pGL_3-847bp启动子活性的影响 | 第32页 |
| 雄激素及其受体在PC-3M细胞中对pGL_3-847bp启动子活性的影响 | 第32-33页 |
| 讨论 | 第33-35页 |
| 第一部分 总结 | 第35-36页 |
| 第二部分 Maspin基因启动区ARE和Spl元件的鉴定 | 第36-56页 |
| 材料 | 第36-37页 |
| 试剂 | 第36-37页 |
| 主要仪器 | 第37页 |
| 方法 | 第37-46页 |
| 荧光素酶报道基因-847bp启动子缺失突变体的构建 | 第37-40页 |
| 细胞培养 | 第40页 |
| 细胞转染实验见第一部分 | 第40页 |
| 双荧光素酶活性测定见第一部分 | 第40页 |
| 核蛋白的制备及浓度测定 | 第40-42页 |
| 电泳迁移率变动分析(eleetrophoretie mobility shift assay，BMSA) | 第42-46页 |
| 探针的标记 | 第42-44页 |
| 核蛋白结合反应 | 第44-45页 |
| 非变性聚丙烯酞胺凝胶电泳(PAGE) | 第45页 |
| 化学发光检测 | 第45-46页 |
| 结果 | 第46-54页 |
| 847bp启动子缺失突变体的酶切鉴定 | 第46-47页 |
| 847bp启动子缺失字亦休的姗良J扭 | 第47-48页 |
| ARE缺失突变体在LNCaP中的启动子活性测定 | 第48页 |
| ARE缺失突变体在PC一3M中的启动子活性测定 | 第48-49页 |
| Spl缺失突变体在LNCaP细胞中的启动子活性测定 | 第49-50页 |
| Spl缺失突变体在PC一3M中的启动子活性测定 | 第50-51页 |
| SPI和ARE元件探针标记效率的检测 | 第51-52页 |
| AR结合甜sP初启动子中的ARE元件 | 第52-53页 |
| Maspin启动子中的Spl元件与前列腺癌中的一些蛋白结 | 第53-54页 |
| 讨论 | 第54-56页 |
| 第二部分 总结 | 第56页 |
| 第三部分 乳香脂通过抑制AR的功能和增强Spl的结合活性升高maspin基因的表达 | 第56-71页 |
| 材料 | 第56-57页 |
| 试剂 | 第56-57页 |
| 主要仪器 | 第57页 |
| 方法 | 第57-63页 |
| LNCaP细胞的培养及处理 | 第57-58页 |
| MTT法检测细胞的生长情况 | 第58页 |
| 总蛋白的制备和定量 | 第58页 |
| 蛋白免疫印迹分析 | 第58-61页 |
| 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第59-60页 |
| 蛋白印迹 | 第60-61页 |
| 化学发光试剂盒显色 | 第61页 |
| RT-PCR | 第61-63页 |
| RNA的提取及浓度测定 | 第61页 |
| 逆转录反应: | 第61-62页 |
| PCR反应 | 第62页 |
| PCR产物的琼脂糖凝胶电泳鉴定 | 第62-63页 |
| 细胞转染实验与双荧光素酶活性测定.详细步骤参见第一部分 | 第63页 |
| 电泳迁移率结合分析，详细步骤参见第二部分 | 第63页 |
| 结果 | 第63-69页 |
| 乳香脂抑制雄激素依赖性前列腺癌细胞LNCaP的生长。 | 第63页 |
| 乳香脂在蛋白表达水平升高朋sP初基因的表达 | 第63-64页 |
| 乳香脂在转录水平升高，sP初基因的表达 | 第64-65页 |
| 乳香脂增强朋sPz’n基因847bp启动子的活性 | 第65-66页 |
| 乳香脂抑制细胞核中AR的表达 | 第66-67页 |
| 乳香脂抑制朋sPz’n启动子中ARE的结合活性 | 第67-68页 |
| 乳香脂增强诩sPz’n启动子中Spl元件的结合活性 | 第68-69页 |
| 讨论 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-78页 |
| 博士在读期间发表的论文目录 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 附图 | 第80-89页 |
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