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草酸脱羧酶的晶体制备及响应面优化mPEG修饰条件的研究

论文目录

摘要	第1-4页
Abstract	第4-10页
1 前言	第10-21页
·研究背景	第10-13页
·草酸的来源及性质	第10页
·草酸的危害	第10-11页
·自然界草酸降解酶	第11页
·草酸脱羧酶来源及理化性质	第11-12页
·草酸脱羧酶的研究进展	第12-13页
·蛋白质结晶技术	第13-17页
·蛋白质结晶原理	第13页
·蛋白质结晶方法	第13-15页
·分批结晶	第13页
·液-液扩散结晶	第13页
·蒸气扩散	第13-14页
·透析法	第14-15页
·蛋白质的结晶过程	第15页
·成核	第15页
·生长	第15页
·停止生长	第15页
·影响蛋白质结晶的因素	第15-17页
·蛋白质的纯度	第15-16页
·过饱和度	第16页
·温度	第16页
·pH 值	第16页
·结晶剂	第16页
·压力及外加物理场	第16-17页
·其他因素	第17页
·蛋白质的化学修饰	第17-19页
·蛋白质化学修饰的类型	第17-18页
·侧链基团的修饰	第17页
·主链结构的修饰	第17-18页
·修饰剂类型	第18页
·蛋白质的聚乙二醇修饰	第18-19页
·聚乙二醇的性质	第18页
·聚乙二醇的用途	第18-19页
·响应面优化法	第19-20页
·响应面定义	第19页
·实验设计与建模分析	第19-20页
·研究目的及意义	第20-21页
2 草酸脱羧酶的表达及诱导条件的优化	第21-29页
·主要材料	第21-22页
·培养基及菌种	第21页
·主要试剂	第21-22页
·主要仪器	第22页
·实验方法	第22-23页
·草酸脱羧酶的制备	第22页
·快速蛋白层析系统（FPLC）对草酸脱羧酶的纯化	第22-23页
·包涵体的检测	第23页
·酶活性的检测	第23页
·生长曲线的测定	第23页
·诱导条件对重组草酸脱羧酶表达的影响	第23页
·正交试验	第23页
·结果与分析	第23-28页
·草酸脱羧酶在大肠杆菌中的重组表达	第23-24页
·生长曲线	第24页
·发酵液初始 pH 对诱导表达的影响	第24-25页
·诱导时机对诱导表达的影响	第25页
·诱导时间对诱导表达的影响	第25-26页
·IPTG 浓度对诱导表达的影响	第26-27页
·锰离子浓度对诱导表达的影响	第27页
·正交试验结果	第27-28页
·小结	第28-29页
3 草酸脱羧酶晶体制备条件的初步探索	第29-38页
·实验材料	第29-30页
·培养基及菌种	第29页
·主要试剂	第29-30页
·主要仪器	第30页
·方法	第30-33页
·草酸脱羧酶的制备	第30页
·快速蛋白质液相系统(FPLC)纯化草酸脱羧酶	第30-31页
·草酸脱羧酶纯酶液的浓缩	第31页
·草酸脱羧酶的结晶	第31页
·悬滴法	第31页
·静置法	第31页
·蛋白质 SDS-PAGE 电泳	第31-33页
·场发射扫描电镜分析	第33页
·结果与分析	第33-37页
·草酸脱羧酶的表达浓缩	第33页
·草酸脱羧酶的晶体制备	第33-35页
·SDS-PAGE 结果分析	第35-36页
·晶体表面的表征分析	第36-37页
·小结	第37-38页
4 mPEG-醛对草酸脱羧酶的修饰研究	第38-48页
·实验材料	第38-39页
·培养基及菌种	第38页
·主要试剂	第38-39页
·主要仪器	第39页
·实验方法	第39-41页
·草酸脱羧酶的制备及纯化	第39-40页
·草酸脱羧酶的酶活检测	第40页
·mPEG-醛的制备及活化率的测定	第40页
·草酸脱羧酶 mPEG 化的单因素优化	第40-41页
·红外光谱分析	第41页
·SDS-PAGE 分析	第41页
·酶学性质的研究	第41页
·最适 PH	第41页
·温度对酶活的影响	第41页
·对胰蛋白酶的耐受性	第41页
·结果与分析	第41-46页
·草酸脱羧酶 mPEG 化的单因素优化	第41-44页
·mPEG-醛/Oxdc 摩尔比	第41-42页
·反应 pH	第42页
·反应温度	第42-43页
·反应时间	第43-44页
·IR 分析结果	第44页
·SDS-PAGE 分析	第44-45页
·部分酶学性质的比较	第45-46页
·最适 pH	第45页
·温度对酶活的影响	第45-46页
·对胰蛋白酶的耐受性	第46页
·小结	第46-48页
5 响应面优化草酸脱羧酶 mPEG 化条件的研究	第48-59页
·实验材料	第48-49页
·培养基及菌种	第48页
·主要试剂	第48-49页
·主要仪器	第49页
·方法	第49-52页
·草酸脱羧酶的制备	第49-50页
·快速蛋白层析系统对草酸脱羧酶的纯化	第50页
·酶活性的检测	第50页
·mPEG-醛的制备及活化率测定	第50页
·草酸脱羧酶的 mPEG-醛修饰	第50-51页
·响应面实验设计	第51页
·模型的验证	第51-52页
·结果分析	第52-58页
·方差分析	第52-55页
·不同因素间的交互作用	第55-58页
·优化反应条件和模型验证	第58页
·小结	第58-59页
6 结论与展望	第59-61页
·结论	第59-60页
·展望	第60-61页
参考文献	第61-65页
致谢	第65-66页
攻读学位期间发表的学术论文目录	第66页

论文编号BS2279062，这篇论文共66页会员购买按0.35元/页下载，共需支付23.1元。直接购买按0.5元/页下载，共需要支付33元。

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