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皱纹盘鲍溶菌酶及两种蛋白酶抑制因子的克隆与表达
 
     论文目录
 
摘要第1-10页
Abstract第10-12页
第一章 文献综述第12-41页
   ·无脊椎动物免疫的研究进展第12-26页
     ·无脊椎动物信号识别第13-14页
     ·病原相关分子模式第14-15页
     ·模式识别受体第15-23页
     ·免疫信号的调整和放大第23-25页
     ·无脊椎动物特异性免疫的研究第25-26页
   ·皱纹盘鲍免疫机制及影响因素研究第26-33页
     ·皱纹盘鲍的细胞免疫第27-30页
     ·体液免疫第30-33页
   ·鲍大规模死亡事件的相关研究第33-38页
     ·鲍的病原第34-37页
     ·影响鲍免疫能力相关因子的研究第37-38页
   ·本研究的目的及意义第38-41页
     ·本研究的目的第38-39页
     ·本研究的意义第39-41页
第二章 材料与方法第41-56页
   ·材料第41-43页
     ·实验动物及组织收集第41页
     ·温度影响实验样品及处理第41页
     ·主要化学试剂第41-42页
     ·主要试剂的配制第42-43页
     ·实验设备第43页
   ·实验方法第43-56页
     ·鲍总RNA 的提取第43-45页
     ·鲍DNA 的提取第45页
     ·感受态细胞的制备第45-46页
     ·琼脂糖凝胶纯化 PCR 产物第46-47页
     ·PCR 产物连接和转化第47-49页
     ·目的基因的生物信息学分析第49-50页
     ·实时定量 PCR 法检测目的基因的表达第50-53页
     ·染色体步移技术第53-56页
第三章 皱纹盘鲍溶菌酶的克隆表达及其重组产物的活性研究第56-82页
   ·研究背景第56-60页
   ·材料与方法第60-67页
     ·皱纹盘鲍C 型溶菌酶cDNA 全长克隆第60-61页
     ·皱纹盘鲍C 型溶菌酶基因全长克隆第61页
     ·溶菌酶表达的实时定量PCR 检测第61-62页
     ·目的基因生物信息学分析第62-63页
     ·原核表达重组质粒构建第63-64页
     ·重组蛋白的表达与检测第64-65页
     ·重组蛋白的纯化第65页
     ·重组蛋白的复性第65-66页
     ·重组蛋白的浓度测定第66页
     ·溶菌酶酶活测定第66-67页
   ·结果第67-76页
     ·皱纹盘鲍HdLysC 基因的cDNA 序列和推导氨基酸序列分析第67-69页
     ·HdLysC 的基因组结构和启动子序列分析第69-73页
     ·皱纹盘鲍HdLysC 基因的分子进化研究第73-74页
     ·HdLysC 基因的mRNA 在皱纹盘鲍体内的组织特异性表达第74页
     ·HdLysC 基因在鳗弧菌刺激后的表达规律分析第74-75页
     ·HdLysC 基因表达蛋白的表达与纯化第75页
     ·重组HdLysC 蛋白的活性测定第75-76页
   ·讨论第76-82页
第四章 皱纹盘鲍一种半胱氨酸蛋白酶抑制因子的克隆与表达研究第82-98页
   ·研究背景第82-89页
     ·抗原呈递作用第84-86页
     ·cystatin 与细胞因子分泌第86-87页
     ·cystatin 与一氧化氮合成第87页
     ·cystatin 的免疫调节作用第87-89页
   ·材料与方法第89-90页
     ·皱纹盘鲍半胱氨酸蛋白酶抑制因子基因全长克隆第89页
     ·皱纹盘鲍半胱氨酸蛋白酶抑制因子基因全长克隆第89页
     ·半胱氨酸蛋白酶抑制因子表达的实时定量PCR 检测第89页
     ·温度对半胱氨酸蛋白酶抑制因子基因表达的影响第89-90页
     ·目的基因生物信息学分析第90页
   ·实验结果第90-95页
     ·皱纹盘鲍半胱氨酸蛋白酶抑制因子cDNA 序列和推导氨基酸序列分析第90-92页
     ·皱纹盘鲍HdCpi 启动子序列分析第92-93页
     ·皱纹盘鲍HdCpi 基因的分子进化研究第93-94页
     ·皱纹盘鲍HdCpi 基因体内组织特异性表达第94-95页
     ·HdCpi 基因在鳗弧菌刺激后的表达规律分析第95页
   ·讨论第95-98页
第五章 皱纹盘鲍一种丝氨酸蛋白酶抑制因子的克隆与表达研究第98-114页
   ·研究背景第98-101页
     ·Kazal 型丝氨酸蛋白酶抑制剂家族第98-99页
     ·Kunitz 型丝氨酸蛋白酶抑制剂第99页
     ·Serpin 型丝氨酸蛋白酶抑制剂第99-100页
     ·α2-巨球蛋白(α2-macroglobulin)第100页
     ·Pacifastin 型蛋白酶抑制剂第100-101页
   ·丝氨酸蛋白酶抑制剂在无脊椎动物免疫体系中的作用第101-105页
     ·对抗病原体蛋白酶第102页
     ·调节内源性蛋白酶活性第102-103页
     ·血淋巴凝结第103页
     ·酚氧化酶原激活第103-105页
     ·参与机体胚胎发育及抗菌蛋白的诱导表达过程第105页
   ·材料与方法第105-106页
     ·皱纹盘鲍HdSpi 基因全长克隆第105页
     ·皱纹盘鲍HdSpi 基因启动子序列的克隆第105-106页
     ·皱纹盘鲍HdSpi 基因表达的实时定量PCR 检测第106页
     ·目的基因生物信息学分析第106页
   ·结果第106-111页
     ·皱纹盘鲍HdSpi 基因cDNA 序列和推导氨基酸序列分析第106-108页
     ·皱纹盘鲍HdSpi 基因启动子序列分析第108-109页
     ·皱纹盘鲍HdSpi 基因的分子进化研究第109-110页
     ·皱纹盘鲍HdSpi 基因体内组织特异性表达第110-111页
     ·鳗弧菌刺激后皱纹盘鲍HdSpi 基因的表达规律分析第111页
   ·讨论第111-114页
第六章 温度对皱纹盘鲍免疫能力的影响研究第114-131页
   ·研究背景第114-115页
   ·材料与方法第115-120页
     ·样品处理第115页
     ·鲍血淋巴细胞免疫学指标第115-116页
     ·流式细胞仪指标测定第116-119页
     ·免疫相关基因的表达研究第119-120页
     ·实验数据的统计分析第120页
   ·实验结果第120-127页
     ·不同温度条件下皱纹盘鲍血细胞指标第120-121页
     ·不同温度条件下皱纹盘鲍血细胞吞噬能力第121页
     ·不同温度条件下皱纹盘鲍血细胞呼吸爆发能力第121-122页
     ·不同温度条件下皱纹盘鲍鳃组织过氧化氢酶表达比较第122页
     ·不同温度条件下皱纹盘鲍鳃组织溶菌酶表达比较第122-123页
     ·不同温度条件下皱纹盘鲍鳃组织HdSpi 表达比较第123页
     ·不同温度条件下皱纹盘鲍组织 HdCpi 表达比较第123-124页
     ·不同温度条件下皱纹盘鲍细菌刺激后组织过氧化氢酶表达比较第124-125页
     ·不同温度条件下弧菌刺激后皱纹盘鲍鳃组织 HdLys 表达比较第125页
     ·不同温度条件下弧菌刺激后皱纹盘鲍鳃组织 HdCpi 表达比较第125-126页
     ·不同温度条件下弧菌刺激后皱纹盘鲍鳃组织 HdSpi 表达比较第126-127页
   ·讨论第127-131页
结论第131-133页
参考文献第133-154页
博士期间发表的文章第154-155页
致谢第155页

 
 
论文编号BS2712,这篇论文共155
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