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当前位置:教育论文中心首页--硕士论文--中枢神经系统中miRNA对RFRP信号通路调控的分子机制研究
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中枢神经系统中miRNA对RFRP信号通路调控的分子机制研究
 
     论文目录
 
中文摘要第3-5页
英文摘要第5-6页
英文缩略词对照表第10-12页
1 绪论第12-28页
    1.1 哺乳动物的生殖调控第12-13页
    1.2 GnRH对生殖调控的影响第13-15页
    1.3 RFRP-3/Npffr1对生殖调控的影响第15-18页
    1.4 microRNA在哺乳动物生殖调控中的重要作用第18-25页
        1.4.1 miRNA概述第18-21页
        1.4.2 miRNA在下丘脑水平对生殖调控的影响第21-23页
        1.4.3 miRNA在垂体水平对生殖调控的影响第23-25页
    1.5 研究目的与意义第25-28页
2 与RFRP信号通路相关miRNA的筛选第28-42页
    2.1 引言第28-30页
    2.2 实验材料第30-31页
        2.2.1 实验仪器第30页
        2.2.2 实验试剂第30-31页
        2.2.3 实验用部分溶液及其配制方法第31页
        2.2.4 分析软件与网址第31页
    2.3 实验方法与步骤第31-36页
        2.3.1 细胞的培养、接种、冻存及复苏第31-32页
        2.3.2 RFRP3-8处理GT1-7细胞第32-33页
        2.3.3 Trizol法提取细胞总RNA第33页
        2.3.4 测序数据的处理及差异miRNA的筛选第33-35页
        2.3.5 靶基因预测及功能和信号通路的富集分析第35页
        2.3.6 与RFRP信号通路相关miRNA及其靶基因网络的构建第35-36页
    2.4 实验结果第36-39页
        2.4.1 测序数据的处理及差异miRNA的筛选第36-37页
        2.4.2 靶基因预测及功能和信号通路的富集分析第37-38页
        2.4.3 与RFRP信号通路相关miRNA及其靶基因的筛选第38-39页
    2.5 讨论第39-40页
    2.6 本章小结第40-42页
3 miR155,429可以靶向调控Npffr1基因的表达第42-62页
    3.1 引言第42页
    3.2 实验材料第42-46页
        3.2.1 实验仪器第42-43页
        3.2.2 实验试剂第43页
        3.2.3 实验用部分溶液及其配制方法第43页
        3.2.4 分析软件与网址第43-44页
        3.2.5 主要试剂盒第44页
        3.2.6 主要内切酶及载体第44页
        3.2.7 定量引物及酶切引物设计第44-46页
    3.3 实验方法与步骤第46-53页
        3.3.1 载体的构建第46-50页
        3.3.2 质粒的提取第50-51页
        3.3.3 目的条带的切胶回收第51-52页
        3.3.4 细胞转染第52页
        3.3.5 荧光素酶报告实验第52-53页
    3.4 实验结果第53-58页
        3.4.1 TargetScan中miR155及miR429的靶位点预测第53-54页
        3.4.2 miR155及miR429可特异性结合Npffr1的3’UTR序列第54-56页
        3.4.3 miR155及miR429在Npffr1-3’UTR序列上靶位点的截断分析第56-57页
        3.4.4 miR155及miR429在Npffr1-3’UTR序列上靶位点的突变分析第57-58页
    3.5 讨论第58-60页
    3.6 本章小结第60-62页
4 miR155,429与其靶基因Npffr1功能的初步验证第62-84页
    4.1 引言第62-63页
    4.2 实验材料第63-66页
        4.2.1 实验仪器第63页
        4.2.2 实验试剂第63-64页
        4.2.3 实验用部分溶液及其配制方法第64页
        4.2.4 分析软件与网址第64页
        4.2.5 主要试剂盒第64页
        4.2.6 主要内切酶及载体第64页
        4.2.7 抗体第64-65页
        4.2.8 定量引物及酶切引物设计第65-66页
    4.3 实验方法与步骤第66-73页
        4.3.1 细胞的培养、接种、冻存及复苏第66页
        4.3.2 Npffr1超表达载体的构建第66-67页
        4.3.3 细胞转染第67-68页
        4.3.4 实时荧光定量PCR检测第68-70页
        4.3.5 Western-blot检测第70-73页
        4.3.6 统计学分析第73页
    4.4 实验结果第73-81页
        4.4.1 超表达miR155,429后抑制了Npffr1mRNA及蛋白的表达第73-77页
        4.4.2 下调miR155,429后促进了Npffr1mRNA及蛋白的表达第77-78页
        4.4.3 超表达miR155,429后促进了Npffr1下游基因mRNA的表达第78-79页
        4.4.4 miR155,429通过下调Npffr1促进下游基因的表达第79-81页
    4.5 讨论第81-82页
    4.6 本章小结第82-84页
5 全文讨论第84-88页
6 后期展望第88-90页
致谢第90-92页
参考文献第92-100页
附录第100页
    A.作者在攻读学位期间发表的论文目录第100页

 
 
论文编号BS4185012,这篇论文共100
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