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当前位置:教育论文中心首页--硕士论文--植物抗病抗逆相关基因表达载体的构建
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植物抗病抗逆相关基因表达载体的构建
 
     论文目录
 
摘要第7-9页
Abstract第9-10页
缩略语表第11-12页
1 前言第12-25页
    1.1 提高外源基因在转基因作物中表达的策略第12-17页
        1.1.1 启动子的选择第12-14页
            1.1.1.1 组成型启动子第12-13页
            1.1.1.2 组织特异性启动子第13-14页
            1.1.1.3 诱导型启动子第14页
        1.1.2 添加合适的表达调控元件第14-16页
            1.1.2.1 5’UTR序列第14-15页
            1.1.2.2 内含子第15页
            1.1.2.3 核基质结合区第15-16页
            1.1.2.4 信号肽第16页
        1.1.3 优化外源基因密码子第16-17页
    1.2 提高转基因植物标记基因安全性策略第17-19页
        1.2.1 利用无争议的安全标记基因第17-18页
        1.2.2 剔除抗性标记基因第18-19页
        1.2.3 最小表达框直接转化植物第19页
    1.3 本研究中所涉及的基因第19-24页
        1.3.1 抗病抗逆相关基因第19-23页
            1.3.1.1 GPA1第19-20页
            1.3.1.2 乳铁蛋白第20页
            1.3.1.3 核糖体蛋白第20-21页
            1.3.1.4 几丁质酶第21页
            1.3.1.5 抗菌肽第21-23页
        1.3.2 抗体融合蛋白第23页
        1.3.3 脱毒基因第23-24页
    1.4 研究目的及意义第24-25页
2 材料与方法第25-30页
    2.1 实验材料第25-26页
        2.1.1 菌株及质粒第25页
        2.1.2 酶和试剂第25页
        2.1.3 培养基第25-26页
    2.2 实验方法第26-30页
        2.2.1 PCR扩增第26页
            2.2.1.1 Easy Taq酶扩增第26页
            2.2.1.2 LA Taq高保真酶扩增第26页
            2.2.1.3 KOD-Plus高保真酶扩增第26页
            2.2.1.4 农杆菌菌体PCR第26页
        2.2.2 T4 DNA连接酶连接目的片段和载体第26-27页
        2.2.3 Klenow酶补平片段粘端第27页
        2.2.4 质粒DNA的提取第27-28页
            2.2.4.1 试剂盒提取质粒DNA第27页
            2.2.4.2 煮沸法提取质粒DNA第27-28页
        2.2.5 试剂盒回收DNA片段第28页
        2.2.6 感受态细胞制备及转化第28-30页
            2.2.6.1 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备及转化第28页
            2.2.6.2 农杆菌GV3101感受态细胞的制备及转化第28-30页
3 结果与分析第30-65页
    3.1 小麦表达载体的构建第30-45页
        3.1.1 抗病抗逆相关基因的克隆第30-33页
            3.1.1.1 BLF和amt启动子的全基因合成第30页
            3.1.1.2 抗菌肽ACE、D4E1、EXD4E1及Lfcin B的扩增第30-31页
            3.1.1.3 功能基因GPA1和Hvchi的克隆第31页
            3.1.1.4 抗体基因5’端添加Linker第31-32页
            3.1.1.5 SOE扩增抗体相关融合蛋白第32-33页
        3.1.2 CaMV35S启动子的改造第33-36页
        3.1.3 组织特异性启动子amt和lem1连入基因枪转化载体pXJC第36页
        3.1.4 基因枪转化载体的构建第36-42页
            3.1.4.1 含amt启动子表达载体的构建第36-37页
            3.1.4.2 含cmps启动子表达载体的构建第37-38页
            3.1.4.3 含lem1启动子表达载体的构建第38-39页
            3.1.4.4 含lem2启动子表达载体的构建第39-40页
            3.1.4.5 含Q35S启动子表达载体的构建第40页
            3.1.4.6 含ubi启动子表达载体的构建第40-41页
            3.1.4.7 含vp1启动子表达载体的构建第41-42页
        3.1.5 农杆菌转化载体的构建第42-44页
            3.1.5.1 报告基因连入单边界农杆菌转化载体pTR-BAR第42页
            3.1.5.2 抗病抗逆相关基因连入双边界农杆菌转化载体pTR-LYB第42-44页
        3.1.6 小麦表达载体转化根癌农杆菌第44-45页
    3.2 拟南芥转化载体的构建第45-59页
        3.2.1 脱毒基因或脱毒蛋白-抗体融合基因表达载体的构建第45-50页
            3.2.1.1 全基因合成第45页
            3.2.1.2 伏马菌素脱毒基因-抗体融合蛋白双表达框载体的构建第45-49页
            3.2.1.3 黄曲霉解毒基因-抗体融合蛋白表达载体的构建第49页
            3.2.1.4 解毒基因Epo、NHTD相关表达载体第49-50页
        3.2.2 抗菌肽、抗体相关载体的构建第50-54页
            3.2.2.1 抗菌肽-抗体融合蛋白相关载体的构建第50-53页
            3.2.2.2 单链抗体表达载体的构建第53页
            3.2.2.3 抗菌肽表达载体的构建第53-54页
        3.2.3 报告基因相关表达载体的构建第54-57页
            3.2.3.1 含GUS基因的表达载体构建第54页
            3.2.3.2 受体蛋白-GFP融合蛋白表达载体的构建第54-57页
        3.2.4 拟南芥表达载体转化根癌农杆菌第57-59页
    3.3 构建的植物表达载体总结列表第59-65页
4 讨论第65-67页
参考文献第67-75页
致谢第75-76页
附录第76-77页

 
 
论文编号BS3468713,这篇论文共77
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