摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-7页 |
缩写词表 | 第8-11页 |
1 引言 | 第11-16页 |
1.1 玉米大斑病及其致病病原菌 | 第11页 |
1.2 MAPK信号转导通路概述 | 第11-12页 |
1.3 模式真菌酿酒酵母中的MAPK信号转导通路 | 第12-13页 |
1.4 病原真菌中CWI-MAPK途径的研究现状 | 第13-14页 |
1.5 真菌的细胞壁组成及功能 | 第14-15页 |
1.6 本研究目的与意义 | 第15-16页 |
2 材料和方法 | 第16-26页 |
2.1 菌株与质粒 | 第16页 |
2.2 培养基 | 第16页 |
2.3 试剂及配制 | 第16-17页 |
2.4 主要仪器 | 第17页 |
2.5 玉米大斑病菌StSLT2 基因的生物信息学分析 | 第17-19页 |
2.5.1 玉米大斑病菌StSLT2 的鉴定 | 第17-18页 |
2.5.2 生物信息学分析 | 第18页 |
2.5.3 StSLT2 的同源序列比对及系统发育分析 | 第18页 |
2.5.4 玉米大斑病菌StSLT2 基因在不同发育时期的表达模式 | 第18-19页 |
2.6 玉米大斑病菌StSLT2 基因敲除载体的构建 | 第19-20页 |
2.6.1 全基因组DNA的提取 | 第19页 |
2.6.2 StSLT2 基因侧翼序列及草铵膦(BAR)基因序列的PCR扩增 | 第19页 |
2.6.3 目的片段的回收、连接、转化与测序 | 第19-20页 |
2.6.4 StSLT2 基因侧翼片段与基因敲除载体pBluescriptⅡSK(-)的拼接 | 第20页 |
2.7 玉米大斑病菌StSLT2 基因敲除突变体的获得和验证 | 第20-22页 |
2.7.1 原生质体介导的转化及抗性筛选 | 第20-21页 |
2.7.2 StSLT2 基因敲除突变体的验证 | 第21-22页 |
2.8 玉米大斑病菌StSLT2 基因的功能分析 | 第22-26页 |
2.8.1 StSLT2 基因对病菌生长发育的影响 | 第22页 |
2.8.2 StSLT2 基因对细胞壁发育的影响 | 第22-24页 |
2.8.3 StSLT2 基因对病菌附着胞发育的影响 | 第24-26页 |
3 结果与分析 | 第26-40页 |
3.1 玉米大斑病菌StSLT2 基因的生物信息学分析 | 第26-28页 |
3.1.1 StSLT2 的鉴定和理化性质预测 | 第26页 |
3.1.2 StSLT2 基因结构分析 | 第26页 |
3.1.3 StSLT2 保守结构域和磷酸化位点分析 | 第26-27页 |
3.1.4 玉米大斑病菌St SLT2 蛋白二级结构特征和亚细胞定位分析 | 第27页 |
3.1.5 StSLT2 的同源序列比对及系统发育分析 | 第27-28页 |
3.2 玉米大斑病菌StSLT2 基因敲除载体的构建 | 第28-30页 |
3.2.1 StSLT2 基因侧翼序列及BAR基因扩增 | 第28-29页 |
3.2.2 StSLT2-pBS敲除载体的酶切验证 | 第29-30页 |
3.3 玉米大斑病菌StSLT2 基因敲除突变体的获得 | 第30-31页 |
3.3.1 突变体草铵膦抗性筛选 | 第30页 |
3.3.2 StSLT2 敲除突变体BAR基因的PCR验证 | 第30页 |
3.3.3 StSLT2 敲除突变体的特异引物验证 | 第30-31页 |
3.3.4 StSLT2 敲除突变体的RT-PCR验证 | 第31页 |
3.4 玉米大斑病菌StSLT2 基因的功能分析 | 第31-40页 |
3.4.1 StSLT2 的表达模式分析 | 第31-32页 |
3.4.2 StSLT2 基因对病菌生长发育的影响 | 第32-34页 |
3.4.3 StSLT2 基因对病菌细胞壁发育影响 | 第34-37页 |
3.4.4 StSLT2 基因突变体致病性测定 | 第37-40页 |
4 讨论 | 第40-42页 |
4.1 真菌中的SLT2 同源基因参与细胞的极性生长 | 第40页 |
4.2 植物病原真菌中的SLT2 同源基因对病菌生长发育的影响 | 第40-41页 |
4.3 植物病原真菌中SLT2 同源基因对病菌致病性的影响 | 第41-42页 |
5 结论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-49页 |
在读期间发表的学术论文 | 第49-50页 |
作者简历 | 第50-51页 |
致谢 | 第51页 |