| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| Abbreviations | 第11-13页 |
| 一、综述 | 第13-39页 |
| 1.1 WOX概述 | 第13-24页 |
| 1.1.1 WOX调控侧生器官发育 | 第16-22页 |
| 1.1.2 WOX与植物激素之间的相互关系 | 第22-24页 |
| 1.2 细胞分裂素概述 | 第24-35页 |
| 1.2.1 细胞分裂素信号转导 | 第24-26页 |
| 1.2.2 细胞分裂素的生物合成 | 第26-28页 |
| 1.2.3 细胞分裂素的降解途径 | 第28-29页 |
| 1.2.4 细胞分裂素参与的生理功能 | 第29-34页 |
| 1.2.4.1 细胞分裂素影响生物产量 | 第29-30页 |
| 1.2.4.2 细胞分裂素影响植株发育 | 第30-32页 |
| 1.2.4.3 细胞分裂素影响根部发育 | 第32-34页 |
| 1.2.5 细胞分裂素与其他激素之间的相互调控关系 | 第34-35页 |
| 1.3 蒺藜苜蓿概述 | 第35-37页 |
| 1.4 本研究的立项依据和意义 | 第37-39页 |
| 二、实验材料和方法 | 第39-96页 |
| 2.1 实验材料及仪器 | 第39-41页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第39页 |
| 2.1.2 常用菌株 | 第39页 |
| 2.1.3 常用载体 | 第39-40页 |
| 2.1.4 常用实验仪器 | 第40页 |
| 2.1.5 常用实验试剂 | 第40-41页 |
| 2.2 实验方法 | 第41-89页 |
| 2.2.1 常用培养基及溶液配制 | 第41-44页 |
| 2.2.1.1 常用培养基配制 | 第41-43页 |
| 2.2.1.2 常用抗生素及其他贮存溶液 | 第43-44页 |
| 2.2.2 分子克隆相关实验 | 第44-53页 |
| 2.2.2.1 基因扩增 | 第44-45页 |
| 2.2.2.2 目的片段回收 | 第45-46页 |
| 2.2.2.3 连接 | 第46页 |
| 2.2.2.4 Gateway系统载体构建 | 第46-47页 |
| 2.2.2.5 大肠杆菌感受态的制备(CaCl_2法) | 第47-48页 |
| 2.2.2.6 热激法转化大肠杆菌 | 第48页 |
| 2.2.2.7 正确克隆的鉴定 | 第48-49页 |
| 2.2.2.8 碱式裂解法提取质粒 | 第49-50页 |
| 2.2.2.9 大提质粒 | 第50-51页 |
| 2.2.2.10 酶切鉴定 | 第51-52页 |
| 2.2.2.11 农杆菌感受态的制备 | 第52-53页 |
| 2.2.2.12 化学法转化农杆菌 | 第53页 |
| 2.2.3 植物材料培养 | 第53-55页 |
| 2.2.3.1 水稻材料 | 第53页 |
| 2.2.3.2 本生烟草种植 | 第53-54页 |
| 2.2.3.3 蒺藜苜蓿材料 | 第54-55页 |
| 2.2.4 蒺藜苜蓿根构型统计 | 第55页 |
| 2.2.5 蒺藜苜蓿根瘤实验 | 第55页 |
| 2.2.6 水稻Tos17插入突变体鉴定 | 第55-57页 |
| 2.2.6.1 水稻基因组DNA提取 | 第55-56页 |
| 2.2.6.2 PCR鉴定水稻Tos17插入 | 第56-57页 |
| 2.2.7 花序法转化拟南芥 | 第57页 |
| 2.2.8 蒺藜苜蓿叶片DNA提取 | 第57-58页 |
| 2.2.9 蒺藜苜蓿杂交材料的获得和鉴定 | 第58-59页 |
| 2.2.10 CKX酶活活性检测 | 第59-64页 |
| 2.2.10.1 载体构建 | 第59页 |
| 2.2.10.2 酵母转化 | 第59-60页 |
| 2.2.10.3 表达酵母蛋白 | 第60页 |
| 2.2.10.4 CKX酶活测定 | 第60-64页 |
| 2.2.11 水稻转基因材料的获得 | 第64-67页 |
| 2.2.12 目的基因转录水平检测 | 第67-70页 |
| 2.2.12.1 RNA提取 | 第67-68页 |
| 2.2.12.2 RT-PCR检测方法 | 第68-70页 |
| 2.2.12.3 qRT-PCR检测方法 | 第70页 |
| 2.2.13 烟草亚细胞定位 | 第70-71页 |
| 2.2.14 蛋白相关实验 | 第71-78页 |
| 2.2.14.1 蛋白表达以及纯化(His-tag融合蛋白) | 第71-74页 |
| 2.2.14.2 SDS PAGE及Western Blot | 第74-78页 |
| 2.2.15 DNA-蛋白结合实验 | 第78-82页 |
| 2.2.16 PEG转化水稻原生质体 | 第82-84页 |
| 2.2.17 水稻染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第84-89页 |
| 2.17 实验所需引物 | 第89-96页 |
| 三、实验结果与分析 | 第96-118页 |
| 3.1 STF影响叶片与茎秆的发育 | 第96-101页 |
| 3.1.1 STF过表达材料表型检测 | 第96-99页 |
| 3.1.1.1 水稻STF过表达材料表型检测 | 第97页 |
| 3.1.1.2 二穗短柄草STF过表达材料表型检测 | 第97-98页 |
| 3.1.1.3 柳枝稷STF过表达表型检测 | 第98-99页 |
| 3.1.2 STF过表达植株组织学分析 | 第99-101页 |
| 3.2 STF影响CKX的表达 | 第101-105页 |
| 3.2.1 柳枝稷STF过表达植株体内基因表达变化 | 第101-102页 |
| 3.2.2 STF抑制CKX表达 | 第102-104页 |
| 3.2.3 不同物种CKX同源进化关系 | 第104-105页 |
| 3.3 STF具有转录抑制活性 | 第105-110页 |
| 3.3.1 STF有体外结合活性 | 第105-106页 |
| 3.3.2 STF抑制CKY表达 | 第106-108页 |
| 3.3.3 STF体内直接结合于CKX启动子 | 第108-110页 |
| 3.4 蒺藜首蓿MTCKX家族功能研究 | 第110-118页 |
| 3.4.1 蒺藜苜蓿MtCKXs系统进化分析及基因克隆 | 第110-111页 |
| 3.4.2 MtCKXs亚细胞定位分析 | 第111-112页 |
| 3.4.3 MtCKXs组织表达模式分析 | 第112-113页 |
| 3.4.4 MtCKXs受细胞分裂素诱导表达 | 第113-114页 |
| 3.4.5 mtckxs单突变体表型检测 | 第114-115页 |
| 3.4.6 MtCKX4B影响蒺藜苜蓿根发育 | 第115-118页 |
| 四、结论与讨论 | 第118-126页 |
| 4.1 WOX成员影响侧生器官发育 | 第118-119页 |
| 4.2 STF直接调控CKX的表达 | 第119-120页 |
| 4.3 CKX变化引起植物体内CK变化 | 第120-121页 |
| 4.4 MtCKXs存在功能冗余现象 | 第121-122页 |
| 4.5 MtCKX参与根瘤发育 | 第122-123页 |
| 4.6 MtCKX有细胞分裂素氧化酶活性 | 第123-126页 |
| 参考文献 | 第126-134页 |
| 附录 | 第134-151页 |
| 一、综述 | 第134-137页 |
| 1.1 NATs概述 | 第134页 |
| 1.2 NATs调控基因表达的作用机制 | 第134-137页 |
| 1.2.1 转录干扰 | 第135页 |
| 1.2.2 RNA封闭 | 第135页 |
| 1.2.3 双链依赖的调节机制 | 第135-136页 |
| 1.2.4 染色质修饰 | 第136-137页 |
| 二、实验结果与分析 | 第137-147页 |
| 2.1 水稻OsCKX家族基因表达模式 | 第137-138页 |
| 2.2 水稻OsCKX9组织表达模式 | 第138-139页 |
| 2.3 水稻OsCKX9亚细胞定位 | 第139页 |
| 2.4 osckx9突变体及表型鉴定 | 第139-141页 |
| 2.5 OsCKX9过表达表型检测 | 第141-143页 |
| 2.6 ak100353突变体鉴定及表型检测 | 第143-144页 |
| 2.7 AK100353过表达表型检测 | 第144-145页 |
| 2.8 AK100353在转录水平和蛋白水平上调控OsCKX9 | 第145-147页 |
| 三、结论与讨论 | 第147-151页 |
| 3.1 水稻CKX家族成员功能冗余 | 第147-148页 |
| 3.2 OsCKX9与AK100353之间的调控关系 | 第148-151页 |
| 博士期间发表论文 | 第151-152页 |
| 博士后期间发表论文 | 第152-153页 |
| 个人简历 | 第153-154页 |
| 致谢 | 第154-155页 |
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