| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 常用中英文缩略词表 | 第13-14页 |
| 第1章 文献综述 | 第14-26页 |
| 1.1 胎盘滋养层细胞分类及主要作用 | 第14-15页 |
| 1.1.1 胎盘滋养层细胞分类 | 第14页 |
| 1.1.2 胎盘滋养层细胞在反刍动物胚胎附植中的作用 | 第14-15页 |
| 1.1.3 胎盘滋养层细胞在反刍动物胎盘形成中的作用 | 第15页 |
| 1.2 胎盘滋养层细胞迁移和侵袭概述 | 第15-20页 |
| 1.2.1 迁移和侵袭释义 | 第15页 |
| 1.2.2 胎盘滋养层细胞和恶性肿瘤细胞迁移和侵袭行为的比较 | 第15-16页 |
| 1.2.3 胎盘滋养层细胞迁移和侵袭的表观遗传调控 | 第16-20页 |
| 1.3 MMPs和 TIMPs | 第20-21页 |
| 1.3.1 MMPs和 TIMPs简述 | 第20-21页 |
| 1.3.2 MMPs和 TIMPs与胎盘滋养层细胞迁移和侵袭的关系 | 第21页 |
| 1.4 TET1 概述 | 第21-26页 |
| 1.4.1 TET1 蛋白结构及作用机制简述 | 第21-23页 |
| 1.4.2 TET1 对生殖细胞形成的影响 | 第23-24页 |
| 1.4.3 TET1 蛋白对胚胎发育的影响 | 第24-26页 |
| 第2章 引言 | 第26-28页 |
| 2.1 研究目的和意义 | 第26-27页 |
| 2.2 技术路线 | 第27-28页 |
| 第3章 试验材料与方法 | 第28-42页 |
| 3.1 试验材料 | 第28-32页 |
| 3.1.1 试验样品 | 第28页 |
| 3.1.2 实验耗材 | 第28页 |
| 3.1.3 主要药品和试剂 | 第28-29页 |
| 3.1.4 主要仪器设备 | 第29-30页 |
| 3.1.5 主要试剂配制 | 第30-32页 |
| 3.2 试验方法 | 第32-42页 |
| 3.2.1 试验组织获取 | 第32页 |
| 3.2.2 RNA提取 | 第32-33页 |
| 3.2.3 cDNA第一条链合成及qRT-PCR | 第33-35页 |
| 3.2.4 免疫组化 | 第35页 |
| 3.2.5 GTCs培养 | 第35-36页 |
| 3.2.6 慢病毒制备与感染 | 第36-37页 |
| 3.2.7 免疫荧光 | 第37-38页 |
| 3.2.8 细胞增殖试验 | 第38页 |
| 3.2.9 迁移和侵袭试验 | 第38-39页 |
| 3.2.10 总蛋白提取、浓度测定 | 第39页 |
| 3.2.11 Western blot | 第39-40页 |
| 3.2.12 数据统计分析 | 第40-42页 |
| 第4章 试验结果与分析 | 第42-58页 |
| 4.1 TET1 在山羊妊娠早期胎盘滋养层中的表达 | 第42-47页 |
| 4.1.1 山羊妊娠早期胎盘滋养层的获取 | 第42-43页 |
| 4.1.2 TET1与TET2、TET3 在山羊妊娠早期胎盘滋养层中的差异性表达比较 | 第43-45页 |
| 4.1.3 TET1 蛋白在山羊妊娠早期胎盘滋养层中的分布 | 第45-47页 |
| 4.2 TET1 基因干扰慢病毒构建及感染 | 第47-50页 |
| 4.2.1 永生化滋养层细胞(GTCs)鉴定 | 第47页 |
| 4.2.2 慢病毒滴加浓度的筛选 | 第47-49页 |
| 4.2.3 嘌呤霉素筛选未感染成功GTCs | 第49页 |
| 4.2.4 TET1 基因干扰慢病毒感染效果检测 | 第49-50页 |
| 4.3 TET1 低表达对GTCs迁移、侵袭、增殖的影响 | 第50-53页 |
| 4.3.1 TET1 低表达对GTCs迁移的影响 | 第50-51页 |
| 4.3.2 TET1 低表达对GTCs侵袭的影响 | 第51-52页 |
| 4.3.3 TET1 低表达对GTCs增殖的影响 | 第52-53页 |
| 4.4 TET1 低表达对MMPs和 TIMPs的影响 | 第53-54页 |
| 4.4.1 TET1 低表达对MMPs的影响 | 第53页 |
| 4.4.2 TET1 低表达对TIMPs的影响 | 第53-54页 |
| 4.5 MMPs和 TIMPs在山羊妊娠早期胎盘滋养层中的表达 | 第54-58页 |
| 4.5.1 MMP2、MMP9、TIMP1、TIMP2 基因相对表达量 | 第54-56页 |
| 4.5.2 MMP9 蛋白在山羊妊娠早期胎盘滋养层中的分布 | 第56-58页 |
| 第5章 讨论 | 第58-64页 |
| 5.1 TETs、MMPs和 TIMPs在山羊妊娠早期滋养层中的表达规律 | 第58-59页 |
| 5.2 山羊TET1 基因干扰慢病毒构建与感染 | 第59-60页 |
| 5.3 TET1对GTCs迁移和侵袭能力的影响 | 第60-61页 |
| 5.4 TET1对MMPs和 TIMPs的影响 | 第61-64页 |
| 第6章 结论 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-76页 |
| 致谢 | 第76-78页 |
| 发表论文及参研课题一览表 | 第78-80页 |
| 附录1 | 第80-82页 |
| 附录2 | 第82-83页 |
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