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当前位置:教育论文中心首页--硕士论文--中国水仙凝集素基因的克隆与表达
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中国水仙凝集素基因的克隆与表达
 
     论文目录
 
摘要第1-5页
Abstract第5-10页
1 引言第10-19页
   ·抗虫基因研究进展第10-11页
     ·Bt 基因第10页
     ·蛋白酶抑制剂基因第10-11页
     ·淀粉酶抑制剂基因第11页
     ·外源凝集素基因第11页
   ·植物凝集素基因研究进展第11-17页
     ·凝集素的研究起源与定义第12页
     ·凝集素的结构与功能第12-13页
     ·凝集素抗虫机理第13-15页
     ·植物凝集素转基因抗虫研究进展第15-16页
     ·转凝集素基因植株抗蚜虫研究法第16-17页
     ·水仙属植物凝集素研究进展第17页
   ·立题依据第17-18页
   ·研究方法与技术路线第18-19页
2 材料与方法第19-32页
   ·实验材料第19-21页
     ·植物材料与菌株第19-20页
     ·主要仪器第20页
     ·抗生素、培养基与缓冲液配方第20-21页
   ·中国水仙凝集素基因的克隆第21-26页
     ·RNA 提取与质量检测第21-22页
     ·cDNA 第一链的反转录合成第22页
     ·引物设计第22页
     ·PCR 反应体系第22-23页
     ·PCR 产物回收第23页
     ·PCR 产物与pGEM-Teasy 载体的连接第23页
     ·连接产物的纯化与电击转化第23-24页
     ·质粒DNA 的小量制备第24-25页
     ·质粒酶切与电泳检测第25页
     ·感受态细胞的制备第25-26页
     ·cDNA 序列测定与分析第26页
   ·中国水仙凝集素基因的原核表达第26-28页
     ·原核表达载体构建第26页
     ·目的蛋白经IPTG 诱导表达第26-27页
     ·蛋白质SDS-PAGE 电泳检测第27-28页
     ·包涵体检验第28页
   ·植物表达载体构建及转化拟南芥与烟草第28-32页
     ·植物表达载体构建第28-29页
     ·侵染液的准备及转化拟南芥第29-30页
     ·侵染液的准备及转化烟草第30页
     ·烟草与拟南芥基因组DNA 提取第30-31页
     ·转基因植株的筛选鉴定第31-32页
3 结果与分析第32-44页
   ·中国水仙凝集素基因的克隆及性质分析第32-36页
     ·中国水仙凝集素基因的克隆第32页
     ·石蒜科凝集素氨基酸系统进化树比较第32-35页
     ·几种凝集素二级结构比较第35页
     ·几种凝集素三级结构比较第35-36页
   ·NTL1 在不同部位的组织特异性表达第36-37页
   ·NTL1 基因的原核表达第37-42页
     ·原核表达载体的构建第37-38页
     ·NTL1 成熟蛋白在大肠杆菌中的表达第38页
     ·不同诱导时间对表达效果的影响第38-39页
     ·加入2%的葡萄糖对本底表达的抑制效果第39页
     ·4℃过夜处理对表达的影响第39-41页
     ·重组pET-NTL1-mature 包涵体的检测第41-42页
   ·NTL1 转化烟草及拟南芥第42-44页
     ·植物表达载体的构建第42页
     ·NTL1 基因转化烟草及转基因植株PCR 检测第42-43页
     ·NTL1 基因转化拟南芥及转基因植株PCR 检测第43-44页
4 讨论第44-50页
   ·NTL1 基因的克隆与序列分析第44-45页
     ·NTL1 与典型的MBL 高度相似第44页
     ·NTL1 作为抗虫候选基因的优势第44-45页
   ·NTL1 表达模式分析第45页
   ·NTL1 基因转入烟草与拟南芥第45-47页
     ·NTL1 基因可使拟南芥花期提前第46页
     ·适于拟南芥抗虫实验的培养条件第46页
     ·转基因抗虫作物的潜在风险与控制第46-47页
   ·pET-NTL1-mature 原核表达效果第47-49页
     ·4℃过夜对表达效果的影响第47页
     ·IPTG 的双重作用第47-48页
     ·本底表达的消除与利用第48页
     ·包涵体对蛋白表达的影响第48-49页
   ·研究展望第49-50页
5 结论第50-51页
参考文献第51-56页
附录 图版第56-59页
在读期间发表的学术论文第59-60页
作者简介第60-61页
致谢第61页

 
 
论文编号BS675414,这篇论文共61
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