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鸭瘟病毒囊膜糖蛋白gH的原核表达及其间接ELISA方法的建立 |
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论文目录 |
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摘要 | 第1-4页 | Abstract | 第4-8页 | 第一章 文献综述 | 第8-19页 | ·鸭瘟病原研究进展 | 第8-10页 | ·鸭瘟流行病学研究进展 | 第10页 | ·鸭瘟病毒基因结构与外膜蛋白的研究 | 第10-12页 | ·病原分子生物学研究进展 | 第12-13页 | ·鸭瘟病毒诊断方法的研究 | 第13-17页 | ·疫苗的研究进展 | 第17-19页 | 第二章 实验研究 | 第19-45页 | 实验一 鸭瘟病毒囊膜糖蛋白gH 的原核表达、纯化和免疫印迹 | 第19-32页 | ·材料 | 第19页 | ·菌株和质粒 | 第19页 | ·生物学试剂 | 第19页 | ·常用缓冲液及培养基配置 | 第19页 | ·方法 | 第19-25页 | ·gH基因的PCR扩增 | 第19-21页 | ·gH 基因的 T 载体克隆 | 第21-22页 | ·表达载体pET_(28)—gH的构建与鉴定 | 第22-24页 | ·重组gH蛋白的诱导表达 | 第24页 | ·重组gH 蛋白的变性 Ni-NTA 纯化 | 第24-25页 | ·纯化gH蛋白的浓度测定 | 第25页 | ·表达蛋白的免疫原性分析 | 第25页 | ·结果 | 第25-30页 | ·gH 基因的扩增 | 第25-26页 | ·重组质粒pET_(28)-gH的克隆及鉴定 | 第26-27页 | ·gH蛋白的表达和纯化 | 第27-29页 | ·纯化gH蛋白的浓度测定 | 第29-30页 | ·重组表达蛋白 Western-blot 检测 | 第30页 | ·讨论 | 第30-32页 | 实验二 gH 蛋白抗原检测 DEV 抗体间接 ELISA 方法的建立 | 第32-45页 | ·材料 | 第32页 | ·主要试剂 | 第32页 | ·DEV 阳性血清和阴性血清 | 第32页 | ·方法 | 第32-36页 | ·重组gH 蛋白抗原最适包被浓度和抗体最佳稀释度的确定 | 第32-33页 | ·抗原包被条件的确定 | 第33页 | ·封闭液的确定 | 第33页 | ·封闭时间的确定 | 第33-34页 | ·血清最佳反应时间的确定 | 第34页 | ·酶标二抗工作时间的确定 | 第34页 | ·间接 ELISA 操作程序和结果判定 | 第34页 | ·特异性试验 | 第34-35页 | ·敏感性实验 | 第35页 | ·重复性试验 | 第35页 | ·ELISA方法的应用 | 第35-36页 | ·结果 | 第36-43页 | ·抗原最佳包被浓度与血清最佳稀释度的确定 | 第36页 | ·重组蛋白抗原包被条件的确定 | 第36-37页 | ·封闭液的确定 | 第37页 | ·封闭时间的确定 | 第37-38页 | ·血清最佳反应时间的确定 | 第38-39页 | ·酶标二抗工作时间的确定 | 第39页 | ·接 ELISA 操作程序和结果判定 | 第39-40页 | ·特异性试验 | 第40页 | ·敏感性实验 | 第40-41页 | ·重复性试验 | 第41-42页 | ·ELISA方法的应用 | 第42-43页 | ·讨论 | 第43-45页 | 结论 | 第45-46页 | 参考文献 | 第46-53页 | 附录 | 第53-63页 | 致谢 | 第63-64页 | 作者简介 | 第64页 |
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