致谢 | 第5-6页 |
中文摘要 | 第6-11页 |
ABSTRACT | 第11-16页 |
缩略词 | 第18-22页 |
绪论 | 第22-27页 |
1 第一章 IL6与IL6R信号调控胚胎HSCS生成、增殖与分化发育 | 第27-63页 |
1.1 引言 | 第27-28页 |
1.2 实验材料与方法 | 第28-48页 |
1.2.1 实验仪器与基本耗材 | 第28-30页 |
1.2.2 主要试剂 | 第30-31页 |
1.2.3 本论文所用斑马鱼品系与胚胎培养 | 第31页 |
1.2.4 原位杂交用探针的载体构建 | 第31-34页 |
1.2.5 斑马鱼胚胎总RNA的提取 | 第34-35页 |
1.2.6 cDNA的获取 | 第35-36页 |
1.2.7 PCR扩增目的片段 | 第36-37页 |
1.2.8 PCR产物纯化 | 第37页 |
1.2.9 目的基因片段与线性化pEASY-T质粒连接 | 第37-38页 |
1.2.10 LB培养基的配制 | 第38页 |
1.2.11 感受态细胞制备与鉴定 | 第38-40页 |
1.2.12 探针合成 | 第40-41页 |
1.2.13 原位杂交实验 | 第41-45页 |
1.2.14 Morpholino的设计与合成 | 第45-46页 |
1.2.15 显微注射 | 第46-47页 |
1.2.16 MO效力优化 | 第47页 |
1.2.17 胚胎拍照 | 第47-48页 |
1.2.18 公共数据分析 | 第48页 |
1.2.19 统计分析 | 第48页 |
1.3 实验结果 | 第48-61页 |
1.3.1 构建质粒的鉴定与探针合成 | 第48页 |
1.3.2 MO最优工作浓度确定 | 第48-51页 |
1.3.3 MO靶向性验证 | 第51-53页 |
1.3.4 基因16、IL6R与GP130表达情况分析 | 第53-54页 |
1.3.5 IL6与IL6R信号维持HSCs | 第54-56页 |
1.3.6 IL6与IL6R信号调控EHT过程 | 第56-57页 |
1.3.7 IL6与IL6R信号促进HSCs增殖与自我更新 | 第57-59页 |
1.3.8 阻断IL6与IL6R信号使T淋巴细胞生成受阻 | 第59-60页 |
1.3.9 阻断IL6与IL6R信号使中性粒细胞生成受阻 | 第60-61页 |
1.4 讨论 | 第61-63页 |
2 第二章 IL6与IL6R信号调控HSCs生成与发育的机制研究 | 第63-82页 |
2.1 引言 | 第63-65页 |
2.2 材料与方法 | 第65-68页 |
2.2.1 斑马鱼胚胎 | 第65页 |
2.2.2 探针的合成 | 第65页 |
2.2.3 质粒构建与mRNA合成 | 第65-67页 |
2.2.4 小分子药物的配制 | 第67-68页 |
2.2.5 TUNEL免疫荧光法检测凋亡细胞 | 第68页 |
2.2.6 其他实验设备与试剂 | 第68页 |
2.3 实验结果 | 第68-79页 |
2.3.1 阻断IL6与IL6R信号对血管发育的影响 | 第68-70页 |
2.3.2 阻断IL6与IL6R信号对原始红细胞发育的影响 | 第70页 |
2.3.3 阻断IL6与IL6R信号对ECs与HSCs凋亡的影响 | 第70-71页 |
2.3.4 Notchla与IL6R上下游关系探索 | 第71-76页 |
2.3.5 阻断IL6与IL6R信号对原始髓系细胞发育的影响 | 第76-79页 |
2.4 讨论 | 第79-82页 |
3 全文总结 | 第82-86页 |
3.1 本论文的创新发现 | 第82-83页 |
3.2 本论文近期研究计划 | 第83-84页 |
3.3 前炎症因子调控胚胎HSCs的研究展望 | 第84-86页 |
参考文献 | 第86-92页 |
综述 | 第92-119页 |
参考文献 | 第107-119页 |
作者简历与在读期间的科研成果 | 第119-120页 |