| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 前言 | 第9-14页 |
| 1 研究目的及意义 | 第9-10页 |
| 2 研究背景及国内外研究进展 | 第10-14页 |
| 2.1 骨关节炎 | 第10-11页 |
| 2.2 骨关节炎的治疗 | 第11-12页 |
| 2.3 骨关节炎分子机制 | 第12-14页 |
| 第一章 鹿角蛋白单酶解考察 | 第14-29页 |
| 1 实验材料与仪器 | 第14-15页 |
| 1.1 实验药材与试剂 | 第14页 |
| 1.2 实验仪器 | 第14-15页 |
| 2 鹿角蛋白的提取及工艺优化 | 第15-20页 |
| 2.1 蛋白质含量测定方法学考察 | 第15-17页 |
| 2.2 鹿角蛋白提取工艺单因素考察 | 第17-18页 |
| 2.3 正交优化鹿角蛋白提取工艺 | 第18-20页 |
| 3 不同酶对鹿角蛋白的酶解作用 | 第20-24页 |
| 3.1 酶活力测定 | 第20-22页 |
| 3.2 不同酶对鹿角蛋白的水解作用 | 第22-24页 |
| 4 鹿角蛋白及其酶解物体外抗氧化活性实验 | 第24-27页 |
| 4.1 羟自由基（·OH）清除率的测定 | 第24-26页 |
| 4.2 超氧阴离子自由基（O_2~-·）抑制率的测定 | 第26-27页 |
| 5 讨论与小结 | 第27-29页 |
| 第二章 鹿角蛋白双酶解响应面法工艺优化 | 第29-42页 |
| 1 实验材料 | 第29-30页 |
| 1.1 药物与试剂 | 第29页 |
| 1.2 实验仪器 | 第29-30页 |
| 2 双酶解工艺单因素考察 | 第30-33页 |
| 2.1 酶解时间考察 | 第30-31页 |
| 2.3 酶解pH考察 | 第31-32页 |
| 2.4 酶解温度考察 | 第32-33页 |
| 2.5 酶添加比例考察 | 第33页 |
| 3 Box-Behnken试验设计鹿角蛋白酶解双目标响应曲面优化 | 第33-35页 |
| 4 响应模型的方差分析 | 第35-39页 |
| 4.1 蛋白酶解物水解度DH%方差分析 | 第35-37页 |
| 4.2 蛋白酶解物O_2~-·抑制率方差分析 | 第37-39页 |
| 5 响应面拟合检验与最优工艺参数 | 第39-40页 |
| 6 讨论与小结 | 第40-42页 |
| 第三章 酶解对鹿角蛋白肠吸收的影响 | 第42-56页 |
| 1 实验材料 | 第42-43页 |
| 1.1 实验动物 | 第42页 |
| 1.2 实验药物与试剂 | 第42-43页 |
| 1.3 实验仪器 | 第43页 |
| 2 实验方法 | 第43-46页 |
| 2.1 溶液配制 | 第43-44页 |
| 2.2 大鼠离体外翻肠囊吸收模型建立 | 第44页 |
| 2.3 肠吸收液中Gly、Hyp的检测 | 第44-46页 |
| 2.4 肠吸收液中总氨基酸含量检测 | 第46页 |
| 2.5 数据处理 | 第46页 |
| 3 结果 | 第46-54页 |
| 3.1 HPLC方法学考察 | 第46-50页 |
| 3.2 鹿角蛋白及鹿角蛋白酶解物中Hyp肠吸收情况 | 第50-51页 |
| 3.3 鹿角蛋白及鹿角蛋白酶解物中Gly肠吸收情况 | 第51-53页 |
| 3.4 鹿角蛋白及鹿角蛋白酶解物中总氨基酸肠吸收情况 | 第53-54页 |
| 4 讨论与小结 | 第54-56页 |
| 第四章 鹿角方对兔膝关节原代软骨细胞的药效作用 | 第56-73页 |
| 1 实验材料 | 第56-57页 |
| 1.1 实验动物 | 第56页 |
| 1.2 药物与试剂 | 第56-57页 |
| 1.3 实验仪器 | 第57页 |
| 2 实验方法 | 第57-61页 |
| 2.1 原代兔膝软骨细胞的分离、培养及鉴定 | 第57-59页 |
| 2.2 细胞模型建立 | 第59页 |
| 2.3 药物对IL-1β 诱导细胞炎症模型增殖活力的影响 | 第59-60页 |
| 2.4 药物对H_2O_2诱导软骨细胞氧化损伤的保护作用 | 第60页 |
| 2.5 酶联免疫分析测定药物对细胞内二型胶原含量的影响 | 第60-61页 |
| 2.6 酶联免疫分析测定药物对细胞培养上清液中糖胺聚糖含量的影响 | 第61页 |
| 3 结果 | 第61-71页 |
| 3.1 体外软骨细胞分离培养及鉴定结果 | 第61-64页 |
| 3.2 软骨细胞实验模型的建立及判定 | 第64-67页 |
| 3.3 药物对IL-1β诱导细胞炎症模型增殖活力的影响 | 第67-68页 |
| 3.4 药物对H_2O_2诱导软骨细胞氧化损伤的保护作用 | 第68-69页 |
| 3.5 酶联免疫分析测定药物对细胞内二型胶原含量的影响 | 第69-70页 |
| 3.6 酶联免疫分析测定药物对细胞培养上清液中糖胺聚糖含量的结果 | 第70-71页 |
| 4 讨论与小结 | 第71-73页 |
| 全文总结 | 第73-76页 |
| 参考文献 | 第76-82页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
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