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miR-17-92基因簇microRNAs对胰腺细胞的调控
 
     论文目录
 
摘要第4-6页
Abstract第6-8页
1 绪论第17-30页
    1.1 胰腺发育的调控第17-20页
        1.1.1 胰腺结构和功能第17页
        1.1.2 胰腺发育过程第17-20页
    1.2 microRNAs与胰腺发育和功能第20-23页
        1.2.1 miRNAs与胰腺细胞分化和增殖第20-21页
        1.2.2 miRNAs与胰岛素合成和分泌第21-23页
        1.2.3 miRNAs与胰腺外分泌功能第23页
    1.3 miR-17-92基因簇miRNAs研究进展第23-29页
        1.3.1 miR-17-92基因簇miRNAs成员第23-25页
        1.3.2 miR-17-92基因簇miRNAs对哺乳动物器官发育和肿瘤发生的调控第25-26页
        1.3.3 miR-17-92基因簇的转录调控和主要靶基因第26-28页
        1.3.4 miR-17-92基因簇miRNAs成员之间的协同与拮抗作用第28-29页
    1.4 本研究的目的和意义第29-30页
2 miR-17-92基因簇miRNAs对胰腺祖细胞的调控第30-56页
    2.1 试验材料第30-32页
        2.1.1 试验动物和细胞系第30页
        2.1.2 载体、miRNAs和siRNAs第30-31页
        2.1.3 主要试剂第31-32页
        2.1.4 主要仪器第32页
    2.2 试验方法第32-41页
        2.2.1 细胞培养第32-33页
        2.2.2 胰腺祖细胞转染第33页
        2.2.3 胰腺祖细胞诱导分化第33页
        2.2.4 胚胎胰腺剥离第33页
        2.2.5 胰芽培养和转染第33-34页
        2.2.6 细胞计数第34页
        2.2.7 CCK8第34页
        2.2.8 EdU检测细胞增殖第34页
        2.2.9 流式细胞术检测细胞周期第34-35页
        2.2.10 细胞凋亡检测第35页
        2.2.11 总RNA提取和反转录第35-38页
        2.2.12 实时定量PCR第38-39页
        2.2.13 Western Blot第39-40页
        2.2.14 组织切片免疫荧光染色第40-41页
        2.2.15 靶基因预测第41页
        2.2.16 载体构建第41页
        2.2.17 双荧光素酶报告系统检测第41页
        2.2.18 统计分析第41页
    2.3 实验结果第41-52页
        2.3.1 miR-17-92基因簇在成体胰腺细胞的差异表达第41-42页
        2.3.2 miR-17-92基因簇miRNAs对胰腺祖细胞增殖的影响第42-43页
        2.3.3 miR-18a抑制胰腺祖细胞增殖的机制第43-50页
        2.3.4 miR-17-92基因簇miRNAs对胰腺祖细胞增殖的拮抗作用第50-51页
        2.3.5 诱导胰腺祖细胞分化后miR-17-92基因簇miRNAs表达变化第51页
        2.3.6 miR-17-92基因簇miRNAs对胰腺祖细胞分化过程中基因表达的影响第51-52页
    2.4 讨论第52-55页
    2.5 本章小结第55-56页
3 miR-17-92基因簇miRNAs对腺泡细胞的调控第56-74页
    3.1 试验材料第56-57页
        3.1.1 细胞系第56页
        3.1.2 裁体和miRNAs第56页
        3.1.3 主要试剂第56-57页
        3.1.4 主要仪器第57页
    3.2 试验方法第57-60页
        3.2.1 细胞培养第57页
        3.2.2 细胞转染第57-58页
        3.2.3 靶基因预测第58页
        3.2.4 载体构建第58-59页
        3.2.5 总RNA提取和反转录第59页
        3.2.6 实时定量PCR第59页
        3.2.7 Western Blot第59-60页
        3.2.8 荧光素酶报告基因检测第60页
        3.2.9 酶联免疫吸附试验第60页
        3.2.10 统计学分析第60页
    3.3 实验结果第60-72页
        3.3.1 预测miR-17-92基因簇调控的胰腺外分泌靶基因第60-61页
        3.3.2 胰腺细胞Ptfla基因的表达模式第61-62页
        3.3.3 miR-17、miR-20a和miR-18a对Pftla基因的调控第62-64页
        3.3.4 双荧光素酶报告系统验证靶基因第64-65页
        3.3.5 miR-17、miR-20a上调Ptfla表达的分析第65-68页
        3.3.6 miR-17、miR-20a和miR-18a对胰腺淀粉酶合成的调控第68-71页
        3.3.7 miR-17、miR-20a和miR-18a对羧肽酶CPAl基因的调控第71-72页
    3.4 讨论第72-73页
    3.5 本章小结第73-74页
4 miR-17-92基因簇miRNAs对β细胞的调控第74-93页
    4.1 试验材料第74-75页
        4.1.1 细胞系第74页
        4.1.2 载体和miRNAs第74页
        4.1.3 主要试剂第74-75页
        4.1.4 主要仪器第75页
    4.2 试验方法第75-81页
        4.2.1 细胞培养第75页
        4.2.2 细胞转染第75-76页
        4.2.3 靶基因预测第76页
        4.2.4 载体构建第76-79页
        4.2.5 总RNA提取和反转录第79页
        4.2.6 实时定量PCR第79页
        4.2.7 Western Blot第79-80页
        4.2.8 细胞免疫荧光染色第80页
        4.2.9 MIN6细胞内胰岛素提取第80页
        4.2.10 葡萄糖刺激的胰岛素释放实验第80-81页
        4.2.11 酶联免疫吸附试验第81页
        4.2.12 荧光素酶报告基因检测第81页
        4.2.13 统计学分析第81页
    4.3 实验结果第81-90页
        4.3.1 筛选miR-17-92基因簇调控的胰腺内分泌靶基因第81-82页
        4.3.2 荧光素酶报告系统验证靶基因第82-84页
        4.3.3 miR-17、miR-20a和miR-18a对Ngn3基因的调控第84-85页
        4.3.4 miR-18a上调Ngn3表达的初步分析第85-88页
        4.3.5 miR-17、miR-20a和miR-18a对β细胞胰岛素基因的调控第88-90页
        4.3.6 miR-17、miR-20a和miR-18a对胰岛素合成和分泌的调控第90页
    4.4 讨论第90-92页
    4.5 本章小结第92-93页
结论第93-94页
参考文献第94-103页
英文缩写词表(Abbreviation)第103-104页
攻读学位期间发表的学术论文第104-105页
致谢第105-107页
附件第107-108页

 
 
论文编号BS4011265,这篇论文共108
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