| 第一部分：基因对结直肠癌HT-29细胞增殖和迁移影响的研究 | 第3-38页 |
| 中文摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-11页 |
| 1.1 散发性结直肠癌研究进展 | 第8-9页 |
| 1.2 确定候选基因胱 | 第9-10页 |
| 1.2.1 预实验结果 | 第9页 |
| 1.2.2 DDI2研究进展 | 第9-10页 |
| 1.3 研究内容及意义 | 第10-11页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第11-30页 |
| 2.1 试剂与仪器 | 第11-14页 |
| 2.1.1 试剂 | 第11-12页 |
| 2.1.2 主要实验仪器 | 第12页 |
| 2.1.3 主要溶液配置 | 第12-14页 |
| 2.2 实验方法及步骤 | 第14-30页 |
| 2.2.1 野生型DDl2目的片段的扩增 | 第14-17页 |
| 2.2.2 pDM18-T与W-DDI2克隆重组载体的构建 | 第17-18页 |
| 2.2.3 突变型DDI2载体构建 | 第18-20页 |
| 2.2.4 野生型和突变型DDI2重组表达载体的构建 | 第20-23页 |
| 2.2.5 Western Blot实验 | 第23-26页 |
| 2.2.6 实时定量荧光PCR实验 | 第26页 |
| 2.2.7 细胞增殖实验 | 第26-28页 |
| 2.2.8 细胞克隆形成实验 | 第28页 |
| 2.2.9 细胞迁移实验 | 第28-30页 |
| 第三章 实验结果 | 第30-36页 |
| 3.1 野生型及突变型重组P表达载体的鉴定 | 第30-32页 |
| 3.1.1 pCDNA3.1表达载体构建结果 | 第30-31页 |
| 3.1.2 pIRES2表达载体构建结果 | 第31页 |
| 3.1.3 pEGFP-C2表达载体构建结果 | 第31-32页 |
| 3.2 Western Blot实验结果 | 第32页 |
| 3.3 实时定量荧光PCR结果 | 第32-33页 |
| 3.4 细胞增殖实验结果 | 第33页 |
| 3.5 细胞克隆形成实验结果 | 第33-34页 |
| 3.6 细胞迁移实验结果 | 第34-36页 |
| 第四章 讨论与结论 | 第36-38页 |
| 第二部分：蹄查和确定散发性结直肠癌候选基因rGFB/?2 3' UTR功能性遗传标识 | 第38-63页 |
| 中文摘要 | 第38-39页 |
| Abstract | 第39-40页 |
| 第一章 绪论 | 第40-46页 |
| 1.1 结直肠癌研究进展 | 第40页 |
| 1.2 微小RNA(microRNA,miRNA)研究进展 | 第40-43页 |
| 1.2.1 miRNA的简介 | 第40-41页 |
| 1.2.2 miRNA的加工过程 | 第41页 |
| 1.2.3 miRNA与肿瘤的关系 | 第41-42页 |
| 1.2.4 miRNA靶位点多态性对miRNA调控的影响 | 第42-43页 |
| 1.2.5 miRNAs靶结合区功能性SNP位点的预测 | 第43页 |
| 1.3 候选基因TGFBR2 | 第43-44页 |
| 1.4 研究内容及意义 | 第44-46页 |
| 第二章 材料与方法 | 第46-58页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第46-47页 |
| 2.1.1 实验试剂 | 第46页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第46-47页 |
| 2.1.3 主要溶液配置 | 第47页 |
| 2.2 实验方法及步骤 | 第47-58页 |
| 2.2.1 结直肠癌候选基因的选择 | 第48页 |
| 2.2.2 候选基因3'UTR miRNAs靶序列功能性变异位点的预测及筛查 | 第48页 |
| 2.2.3 野生型T克隆重组质粒的构建 | 第48-51页 |
| 2.2.4 pDM18-T与W-TGFRB2克隆重组载体的构建 | 第51-52页 |
| 2.2.5 突变型TGFRB2载体构建 | 第52-54页 |
| 2.2.6 野生型和突变型TGFBR2重组表达载体的构建 | 第54-56页 |
| 2.2.7 细胞双荧光素酶活力检测实验 | 第56-58页 |
| 第三章 实验结果 | 第58-62页 |
| 3.1 结直肠癌候选基因的筛查 | 第58页 |
| 3.2 TGFBR2(rs11466537)功能性变异位点的预测 | 第58-59页 |
| 3.3 野生型和突变型TGFBR2重组表达载体鉴定结果 | 第59页 |
| 3.4 野生型与突变型重组表达载体测序结果 | 第59-60页 |
| 3.5 双荧光素酶活力检测 | 第60-62页 |
| 第四章 讨论与结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-70页 |
| 攻读硕士学位期间取得的学术成果 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
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