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SEREX法筛选免疫相关性全血细胞减少症患者造血细胞靶抗原及其初步鉴定 |
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| 摘要 | 第4-6页 | | Abstract | 第6-7页 | | 缩略语/符号说明 | 第11-13页 | | 前言 | 第13-17页 | | 研究现状、成果 | 第13-16页 | | 研究目的、方法 | 第16-17页 | | 一、K562细胞cDNA噬菌体表达文库构建 | 第17-42页 | | 1.1 对象和方法 | 第17-33页 | | 1.1.1 实验对象 | 第17页 | | 1.1.2 实验试剂 | 第17-19页 | | 1.1.3 实验仪器 | 第19页 | | 1.1.4 主要液体配置 | 第19-21页 | | 1.1.5 实验方法 | 第21-33页 | | 1.2 结果 | 第33-37页 | | 1.2.1 RNA的质量检测 | 第33-34页 | | 1.2.2 LD-PCR琼脂糖凝胶电泳 | 第34-35页 | | 1.2.3 过柱后cDNA凝胶电泳 | 第35页 | | 1.2.4 蓝白斑方法鉴定重组率 | 第35页 | | 1.2.5 PCR方法鉴定插入子的代表性 | 第35-36页 | | 1.2.6 初始文库滴度 | 第36页 | | 1.2.7 扩增文库滴度 | 第36-37页 | | 1.3 讨论 | 第37-40页 | | 1.3.1 总RNA的提取与质量检测 | 第37页 | | 1.3.2 cDNA展示文库质量评价 | 第37-39页 | | 1.3.3 K562文库代表人骨髓CD34+细胞文库 | 第39-40页 | | 1.3.4 噬菌体载体构建cDNA表达文库优于质粒载体 | 第40页 | | 1.4 小结 | 第40-42页 | | 二SEREX方法筛选IRP患者骨髓造血干细胞的自身抗原 | 第42-52页 | | 2.1 对象和方法 | 第42-45页 | | 2.1.1 实验标本 | 第42页 | | 2.1.2 实验试剂 | 第42页 | | 2.1.3 实验步骤 | 第42-45页 | | 2.2 结果 | 第45-46页 | | 2.2.1 最佳的文库稀释比例 | 第45页 | | 2.2.2 免疫筛选后NC膜上的阳性噬菌斑 | 第45页 | | 2.2.3 测序结果以及BLAST比对结果 | 第45-46页 | | 2.3 讨论 | 第46-50页 | | 2.3.1 免疫筛选的注意事项 | 第46-48页 | | 2.3.2 目的克隆由噬菌体载体 λTriplEx2转入质粒载体pTriplEx2 | 第48-50页 | | 2.3.3 关于测序 | 第50页 | | 2.4 小结 | 第50-52页 | | 三、阳性克隆蛋白表达纯化 | 第52-67页 | | 3.1 对象和方法 | 第52-59页 | | 3.1.1 主要标本 | 第52页 | | 3.1.2 主要试剂 | 第52页 | | 3.1.3 主要仪器 | 第52页 | | 3.1.4 主要液体配置 | 第52页 | | 3.1.5 实验步骤 | 第52-59页 | | 3.2 结果 | 第59-64页 | | 3.2.1 目的基因克隆 | 第59-62页 | | 3.2.2 蛋白表达 | 第62-63页 | | 3.2.3 蛋白纯化 | 第63-64页 | | 3.2.4 三种蛋白复性后的浓度 | 第64页 | | 3.3 讨论 | 第64-66页 | | 3.3.1 表达载体的选择 | 第64页 | | 3.3.2 关于目的基因克隆 | 第64-65页 | | 3.3.3 细菌裂解方法的选择 | 第65页 | | 3.3.4 关于包涵体 | 第65-66页 | | 3.4 小结 | 第66-67页 | | 四、初步验证目的蛋白的抗原性 | 第67-86页 | | 4.1 对象和方法 | 第67-71页 | | 4.1.1 研究对象 | 第67页 | | 4.1.2 实验标本 | 第67页 | | 4.1.3 实验仪器： | 第67页 | | 4.1.4 实验主要试剂 | 第67-68页 | | 4.1.5 实验所需液体配制 | 第68页 | | 4.1.6 实验步骤 | 第68-71页 | | 4.2 结果 | 第71-83页 | | 4.3 讨论 | 第83-85页 | | 4.4 小结 | 第85-86页 | | 全文结论 | 第86-87页 | | 论文创新点 | 第87-88页 | | 参考文献 | 第88-93页 | | 发表论文和参加科研情况说明 | 第93-94页 | | 附录 | 第94-95页 | | 综述一 SEREX及其在自身免疫研究方面的应用 | 第95-102页 | | 参考文献 | 第100-102页 | | 综述二 噬菌体展示技术及其在自身免疫病研究中的应用 | 第102-116页 | | 参考文献 | 第113-116页 | | 致谢 | 第116页 |
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论文编号BS2681366，这篇论文共116页
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