摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
缩略词表 | 第12-13页 |
第一章 胸腺素β4转基因绒山羊调控毛囊生长信号通路的检测 | 第13-21页 |
1 材料 | 第14页 |
1.1 实验仪器设备 | 第14页 |
1.2 实验材料 | 第14页 |
1.3 主要试剂和耗材 | 第14页 |
2 方法 | 第14-16页 |
2.1 蛋白质提取 | 第14页 |
2.2 SDS-PAGE电泳 | 第14-16页 |
2.3 转膜 | 第16页 |
2.4 免疫印迹 | 第16页 |
2.5 ECL检测 | 第16页 |
3 结果 | 第16-18页 |
4 讨论 | 第18-19页 |
参考文献 | 第19-21页 |
第二章 免疫共沉淀联合质谱技术筛选转基因绒山羊胸腺素β4的互作蛋白 | 第21-33页 |
1 材料 | 第21-22页 |
1.1 实验仪器设备 | 第21-22页 |
1.2 实验材料 | 第22页 |
1.3 主要试剂和耗材 | 第22页 |
2 方法 | 第22-26页 |
2.1 分离及培养转胸腺素β4基因的绒山羊耳尖成纤维细胞 | 第22页 |
2.2 免疫细胞化学技术在细胞内定位胸腺素β 4 | 第22-23页 |
2.3 转基因绒山羊耳尖成纤维细胞总蛋白的提取及浓度测定 | 第23页 |
2.4 免疫沉淀相互作用蛋白 | 第23-24页 |
2.5 SDS-PAGE分离相互作用蛋白 | 第24-25页 |
2.6 质谱鉴定 | 第25-26页 |
3 结果 | 第26-28页 |
3.1 分离及培养胸腺素β4基因的绒山羊耳尖成纤维细胞的结果 | 第26页 |
3.2 免疫细胞化学技术在细胞内定位胸腺素β 4的结果 | 第26-27页 |
3.3 免疫共沉淀及考马斯亮蓝染色结果 | 第27-28页 |
3.4 质谱鉴定免疫共沉淀的结果 | 第28页 |
4 讨论 | 第28-30页 |
参考文献 | 第30-33页 |
第三章 哺乳动物双杂交系统验证胸腺素β4与β肌动蛋白、调宁蛋白1和血管抑制因子1之间的相互作用 | 第33-49页 |
1 材料 | 第33-34页 |
1.1 实验仪器设备 | 第33-34页 |
1.2 菌种与载体 | 第34页 |
1.3 主要实验材料、试剂与耗材 | 第34页 |
2 方法 | 第34-42页 |
2.1 克隆相关基因的eDNA序列 | 第36-38页 |
2.2 载体与目的基因片段的连接 | 第38-40页 |
2.3 回收的基因片段与载体线状片段连接 | 第40页 |
2.4 转染细胞和双荧光素酶的检测 | 第40-42页 |
3 结果 | 第42-45页 |
3.1 相关基因cDNA序列的分析 | 第42-43页 |
3.2 相关基因酶切位点的序列分析 | 第43页 |
3.3 载体连接的结果分析 | 第43页 |
3.4 将目的质粒转染到Hela细胞中 | 第43-44页 |
3.5 荧光素酶相对活性检测结果 | 第44-45页 |
4 讨论 | 第45-47页 |
参考文献 | 第47-49页 |
结论 | 第49-50页 |
附录 | 第50-55页 |
文献综述 | 第55-64页 |
参考文献 | 第59-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
硕士期间论文发表情况 | 第65页 |