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新型荧光探针检测平台的构建及其在miRNA-21和UDG检测中的应用
 
     论文目录
 
摘要第5-7页
Abstract第7-8页
第1章 绪论第12-26页
    1.1 分子信标的结构及原理第12-13页
    1.2 新型分子信标的种类第13-17页
    1.3 分子信标技术的研究现状及应用第17-21页
        1.3.1 分子信标技术在miRNA检测中的应用第17-18页
        1.3.2 分子信标技术在蛋白质检测与分析中的应用第18-19页
        1.3.3 分子信标技术在酶活性分析中的应用第19-21页
    1.4 miRNA检测技术的研究现状及应用第21-24页
        1.4.1 miRNA传统的检测方法第21页
        1.4.2 基于酶促信号放大检测miRNA第21-22页
        1.4.3 基于金纳米材料检测miRNA第22-23页
        1.4.4 基于氧化石墨烯检测miRNA第23-24页
    1.5 本文的选题背景和研究意义第24页
    1.6 本文拟开展的工作第24-26页
第2章 分子信标用于肿瘤相关的miRNA-21的检测第26-43页
    2.1 前言第26页
    2.2 实验部分第26-34页
        2.2.1 分子信标检测miRNA的实验原理第26-27页
        2.2.2 试剂与仪器第27-28页
        2.2.3 实验方法第28-34页
    2.3 结果与讨论第34-42页
        2.3.1 分子信标热变性曲线的建立第34页
        2.3.2 温度和Mg~(2+)对分子信标稳定性的影响第34-35页
        2.3.3 pH值和Mg~(2+)对分子信标杂交性能的影响第35-36页
        2.3.4 分子信标信背比的考察第36页
        2.3.5 分子信标特异性的考察第36-37页
        2.3.6 分子信标杂交标准曲线的建立第37-38页
        2.3.7 细胞总RNA的提取与鉴定第38页
        2.3.8 荧光法检测肝癌细胞中miRNA-21第38-39页
        2.3.9 RT-RCR方法检测肝癌细胞中miRNA-21第39-41页
        2.3.10 荧光法检测胃癌组织中miRNA-21第41页
        2.3.11 RT-PCR方法检测胃癌组织中miRNA-21第41-42页
        2.3.12 miRNA-21调控的靶蛋白的检测第42页
    2.4 本章小结第42-43页
第3章 基于分子信标结合酶促信号放大用于miRNA-21的超灵敏检测第43-56页
    3.1 前言第43-44页
    3.2 实验部分第44-48页
        3.2.0 酶促信号放大检测miRNA原理第44页
        3.2.1 仪器和试剂第44-45页
        3.2.2 实验方法第45-48页
    3.3 结果与讨论第48-54页
        3.3.1 胃癌组织样品的统计与鉴定第48-49页
        3.3.2 分子信标热变性曲线的建立第49页
        3.3.3 分子信标信背比的考察第49-50页
        3.3.4 分子信标抗酶切能力的考察第50-51页
        3.3.5 分子信标杂交缓冲液条件的优化第51-52页
        3.3.6 标准样品检测下限的确定第52页
        3.3.7 DSN酶浓度条件的优化第52-53页
        3.3.8 信号放大检测下限的确定第53页
        3.3.9 胃癌组织样品的检测第53-54页
        3.3.10 RT-PCR实验结果的验证第54页
    3.4 本章小结第54-56页
第4章 基于分子信标实时监测UDG酶活性方法的建立及其应用第56-66页
    4.1 前言第56-57页
    4.2 实验部分第57-59页
        4.2.1 实验设计原理第57页
        4.2.2 试剂与仪器第57-58页
        4.2.3 实验方法第58-59页
    4.3 结果与讨论第59-65页
        4.3.1 UDG酶对分子信标的影响第59-60页
        4.3.2 分子信标信背比的考察第60页
        4.3.3 Mg~(2+)浓度对UDG酶活性的影响第60-61页
        4.3.4 温度对UDG酶活性的影响第61页
        4.3.5 不同UDG酶浓度对反应初速度的影响第61-62页
        4.3.6 UDG酶动力学的研究第62页
        4.3.7 金属离子对UDG酶活性的影响第62-63页
        4.3.8 UDG酶抑制剂的选择第63页
        4.3.9 EDTA对复杂样品体系中UDG酶的影响第63-64页
        4.3.10 细胞样品和血清样品UDG酶含量的测定第64-65页
    4.4 本章小结第65-66页
结论与展望第66-67页
参考文献第67-75页
附录 攻读硕士学位期间参与发表论文和专利第75-76页
致谢第76页

 
论文编号BS3287866,这篇论文共76
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