| 摘要 | 第5-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 目录 | 第12-15页 |
| 符号说明 | 第15-18页 |
| 第一部分 DHTKD1 对线粒体发生及其功能的影响 | 第18-37页 |
| 前言 | 第18-21页 |
| 1. 实验材料 | 第21-24页 |
| 1.1 主要生化与分子细胞生物学试剂 | 第21页 |
| 1.2 主要溶液配方 | 第21页 |
| 1.3 主要仪器设备 | 第21-22页 |
| 1.4 细胞系、质粒、siRNA | 第22页 |
| 1.5 PCR引物设计与合成 | 第22-24页 |
| 2. 实验方法 | 第24-28页 |
| 2.1 细胞培养 | 第24页 |
| 2.2 细胞转染 | 第24页 |
| 2.3 蛋白质印迹 | 第24页 |
| 2.4 RNA抽提及实时定量PCR | 第24-25页 |
| 2.5 OGDHC活性分析 | 第25页 |
| 2.6 ATP定量分析 | 第25页 |
| 2.7 ROS测定 | 第25-26页 |
| 2.8 MTT分析 | 第26页 |
| 2.9 线粒体DNA定量 | 第26页 |
| 2.10 MitoTracker线粒体染色 | 第26页 |
| 2.11 细胞凋亡分析 | 第26页 |
| 2.12 细胞周期分析 | 第26-27页 |
| 2.13 统计分析 | 第27-28页 |
| 3. 实验结果 | 第28-35页 |
| 3.1 DHTKD1影响线粒体功能 | 第28-30页 |
| 3.2 DHTKD1影响线粒体发生 | 第30-31页 |
| 3.3 DHTKD1影响细胞内氧化应激反应 | 第31-33页 |
| 3.4 DHTKD1影响细胞凋亡 | 第33-35页 |
| 4. 讨论 | 第35-37页 |
| 第二部分 Kif18a在小鼠炎症性结直肠癌中的作用研究 | 第37-51页 |
| 前言 | 第37-39页 |
| 1. 实验材料 | 第39-40页 |
| 1.1 主要生化与分子生物学试剂 | 第39页 |
| 1.2 主要溶液配方 | 第39页 |
| 1.3 主要仪器设备 | 第39-40页 |
| 2. 实验方法 | 第40-43页 |
| 2.1 炎症性结直肠癌(CAC)模型 | 第40页 |
| 2.2 H&E染色 | 第40-41页 |
| 2.3 组织病理学分析 | 第41页 |
| 2.4 免疫组织化学染色 | 第41页 |
| 2.5 免疫荧光染色 | 第41-42页 |
| 2.6 原位TUNEL染色 | 第42页 |
| 2.7 统计分析 | 第42-43页 |
| 3. 实验结果 | 第43-49页 |
| 3.1 炎症性结直肠癌(CAC)小鼠模型 | 第43页 |
| 3.2 Kif18a在小鼠CAC中表达上调 | 第43-44页 |
| 3.3 Kif18a基因敲除小鼠不易发生结直肠癌 | 第44-46页 |
| 3.4 Kif18a利于肿瘤细胞的增殖 | 第46-47页 |
| 3.5 Kif18a缺失使肿瘤细胞凋亡增加 | 第47-48页 |
| 3.6 Kif18a缺失导致Akt失活 | 第48-49页 |
| 4. 讨论 | 第49-51页 |
| 第三部分 Rig-Ⅰ调控肠道菌群平衡和结直肠癌的发生 | 第51-91页 |
| 前言 | 第51-54页 |
| 1. 实验材料 | 第54-57页 |
| 1.1 主要生化与分子细胞生物学试剂 | 第54页 |
| 1.2 主要溶液配方 | 第54页 |
| 1.3 主要仪器设备 | 第54页 |
| 1.4 PCR引物设计与合成 | 第54-57页 |
| 2. 实验方法 | 第57-64页 |
| 2.1 试验动物及粪便样本采集 | 第57页 |
| 2.2 粪便微生物基因组提取 | 第57-58页 |
| 2.3 微生物16s rDNA V3区域PCR扩增及测序 | 第58-60页 |
| 2.4 生物信息学与统计分析 | 第60页 |
| 2.5 特定门类细菌Real-time qPCR | 第60-61页 |
| 2.6 粪便中游离及共生结合的IgA测定 | 第61-62页 |
| 2.7 基因表达实时定量PCR | 第62页 |
| 2.8 结直肠癌(CAC)小鼠模型的建立 | 第62页 |
| 2.9 组织病理学染色及评分 | 第62-63页 |
| 2.10 BrdU免疫荧光染色 | 第63-64页 |
| 3. 实验结果 | 第64-88页 |
| 3.1 测序结果及序列多样性 | 第64-68页 |
| 3.2 Rig-Ⅰ影响小鼠肠道微生物组成 | 第68-70页 |
| 3.3 Rig-Ⅰ对小鼠肠道特定微生物相对含量的影响 | 第70-82页 |
| 3.4 Rig-Ⅰ对小鼠肠道IgA功能的影响 | 第82页 |
| 3.5 Rig-Ⅰ~(-/-)小鼠部分炎性因子表达变化 | 第82-84页 |
| 3.6 Rig-Ⅰ~(-/-)小鼠更易诱发结直肠癌 | 第84-88页 |
| 4. 讨论 | 第88-91页 |
| 参考文献 | 第91-102页 |
| 结论 | 第102-103页 |
| 致谢 | 第103-106页 |
| 攻读学位期间发表的 SCI 收录论文 | 第106页 |
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