| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-24页 |
| 1 NF-κB的信号通路的组成与结构 | 第14-17页 |
| 1.1 NF-κB家族 | 第14-15页 |
| 1.2 IκB家族 | 第15-16页 |
| 1.3 IKK复合物 | 第16-17页 |
| 2 NF-κB信号通路 | 第17-19页 |
| 2.1 NF-κB经典信号途径 | 第17-18页 |
| 2.2 NF-κB非经典信号途径 | 第18页 |
| 2.3 NF-κB信号通路的反馈调节 | 第18-19页 |
| 3 NF-κB的生物学功能 | 第19-21页 |
| 3.1 NF-κB与细胞凋亡 | 第19-20页 |
| 3.2 NF-κB与免疫反应 | 第20-21页 |
| 3.3 NF-κB与癌症 | 第21页 |
| 4 NF-κB家族成员在鱼类中的研究 | 第21-23页 |
| 5 研究目的与意义 | 第23-24页 |
| 第二章 Tro NF-κB家族基因的克隆与免疫应答 | 第24-86页 |
| 1 前言 | 第24-25页 |
| 2 实验材料与仪器 | 第25-26页 |
| 2.1 实验鱼和菌株 | 第25页 |
| 2.2 实验仪器与试剂 | 第25-26页 |
| 3 实验方法 | 第26-32页 |
| 3.1 卵形鲳鲹脾脏总RNA的提取与检测 | 第26-27页 |
| 3.2 模板链的合成 | 第27页 |
| 3.3 扩增Tro NF-κB家族基因的中间片段 | 第27-31页 |
| 3.4 扩增Tro NF-κB家族基因的c DNA末端 | 第31页 |
| 3.5 Tro NF-κB家族基因的生物信息学分析 | 第31-32页 |
| 3.6 引物设计 | 第32页 |
| 3.7 卵形鲳鲹刺激处理样品采集及其c DNA合成 | 第32页 |
| 3.8 q PCR检测与数据处理 | 第32页 |
| 4 结果 | 第32-77页 |
| 4.1 卵形鲳鲹脾脏总RNA样品检测 | 第32-33页 |
| 4.2 Tro NF-κB1 基因的生物信息学分析 | 第33-41页 |
| 4.3 Tro NF-κB2 基因的生物信息学分析 | 第41-49页 |
| 4.4 Tro Rel A基因的生物信息学分析 | 第49-56页 |
| 4.5 TroRelB基因的生物信息学分析 | 第56-62页 |
| 4.6 Troc-Rel基因的生物信息学分析 | 第62-69页 |
| 4.7 Tro NF-κB家族基因在正常组织中的分布情况 | 第69页 |
| 4.8 LPS刺激后Tro NF-κB家族基因的变化 | 第69-72页 |
| 4.9 poly I:C刺激后Tro NF-κB家族基因的变化 | 第72-75页 |
| 4.10 溶藻弧菌刺激后Tro NF-κB家族基因的变化 | 第75-77页 |
| 5 讨论 | 第77-86页 |
| 5.1 Tro NF-κB1 序列特征及其免疫应答分析 | 第77-79页 |
| 5.2 Tro NF-κB2 序列特征及其免疫应答分析 | 第79-81页 |
| 5.3 Tro Rel A序列特征及其免疫应答分析 | 第81-83页 |
| 5.4 TroRelB序列特征及其免疫应答分析 | 第83-84页 |
| 5.5 Troc-Rel序列特征及其免疫应答分析 | 第84-86页 |
| 第三章 TroRelB的原核表达载体及多克隆抗体的制备 | 第86-96页 |
| 1 前言 | 第86-87页 |
| 2 实验材料与仪器 | 第87-88页 |
| 2.1 实验小鼠、载体与菌株 | 第87页 |
| 2.2 实验仪器与试剂 | 第87-88页 |
| 3 实验方法 | 第88-91页 |
| 3.1 TroRelB基因原核表达载体的构建 | 第88-89页 |
| 3.2 原核重组蛋白的表达与可溶性检测 | 第89页 |
| 3.3 原核重组蛋白的纯化 | 第89-90页 |
| 3.4 多克隆抗体的制备及其检测 | 第90-91页 |
| 4 结果 | 第91-94页 |
| 4.1 p ET-32a-TroRelB重组质粒的构建与鉴定 | 第91页 |
| 4.2 重组蛋白的诱导表达及可溶性检测 | 第91-92页 |
| 4.3 蛋白纯化及Western Blot检测 | 第92-93页 |
| 4.4 免疫效价检测及特异性检测 | 第93-94页 |
| 5 讨论 | 第94-96页 |
| 5.1 原核表达载体的选择与应用 | 第94页 |
| 5.2 TroRelB重组蛋白的表达形式 | 第94-95页 |
| 5.3 多克隆抗体的效价和特异性 | 第95-96页 |
| 第四章 小结 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-110页 |
| 致谢 | 第110-111页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第111页 |
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