摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
第一章 绪论 | 第11-19页 |
·盐胁迫对植物的影响 | 第11-12页 |
·盐胁迫对离子分布的影响 | 第11页 |
·盐胁迫对光合作用影响 | 第11页 |
·盐胁迫对渗透调节物质积累的影响 | 第11-12页 |
·盐胁迫对活性氧代谢和细胞质膜透性的影响 | 第12页 |
·植物耐盐机理 | 第12-13页 |
·渗透调节物质的累积 | 第12页 |
·离子区域化 | 第12页 |
·维护膜系统的完整性 | 第12页 |
·大分子蛋白的积累 | 第12-13页 |
·植物耐盐相关基因 | 第13页 |
·与活性氧解毒相关的酶基因 | 第13页 |
·与水分胁迫相关的基因 | 第13页 |
·与渗透胁迫信号转导有关的基因 | 第13页 |
·与渗透保护物质合成有关的基因 | 第13页 |
·Ca~(2+)/H~+逆向转运蛋白研究进展 | 第13-14页 |
·东方山羊豆研究现状 | 第14-15页 |
·抑制性差减杂交技术 | 第15-18页 |
·SSH 操作流程 | 第15-16页 |
·SSH 技术的特点及应用 | 第16-18页 |
·本研究的目的及意义 | 第18-19页 |
第二章 东方山羊豆盐诱导抑制差减杂交cDNA 文库的构建 | 第19-34页 |
·材料 | 第19页 |
·试剂和仪器 | 第19-20页 |
·主要化学试剂 | 第19页 |
·试剂盒 | 第19页 |
·主要仪器设备 | 第19-20页 |
·菌株及克隆载体 | 第20页 |
·溶液的配制 | 第20页 |
·实验方法 | 第20-28页 |
·总RNA 提取与mRNA 的分离、纯化 | 第20-21页 |
·文库构建 | 第21-26页 |
·PCR 产物的纯化 | 第26-27页 |
·消减文库生成 | 第27页 |
·连接产物的转化 | 第27页 |
·重组子的鉴定 | 第27-28页 |
·保存文库 | 第28页 |
·文库质量分析 | 第28页 |
·结果与分析 | 第28-32页 |
·总RNA 以及mRNA 的质量分析和酶切效率检测 | 第28-30页 |
·消减产物第二次PCR 结果 | 第30-31页 |
·Actin 检测消减效率 | 第31页 |
·抑制消减cDNA 文库的扩增及初步鉴定 | 第31-32页 |
·消减文库质量鉴定分析 | 第32页 |
·讨论 | 第32-34页 |
第三章 文库中EST 片段的生物信息学分析 | 第34-40页 |
·方法 | 第34页 |
·测序 | 第34页 |
·载体和接头序列的去除 | 第34页 |
·聚类和拼接 | 第34页 |
·序列同源性比对及基因功能分类 | 第34页 |
·结果 | 第34-38页 |
·序列聚类拼接及BLAST 和SWISS-PROT 数据库比对结果 | 第34-37页 |
·GO 分类 | 第37页 |
·COG 分析 | 第37-38页 |
·讨论 | 第38-40页 |
第四章 Ca~(2+)/H~+逆向转运蛋白基因的克隆及生物信息学分析 | 第40-53页 |
· | 第40页 |
·材料 | 第40页 |
·试剂盒 | 第40页 |
·其他常有试剂盒仪器同前 | 第40页 |
·方法 | 第40-42页 |
·反转录合成cDNA | 第40-41页 |
·引物设计 | 第41页 |
·分别扩增5′和3′序列 | 第41页 |
·ORF 序列扩增 | 第41-42页 |
·序列分析 | 第42页 |
·RT-PCR 分析东方山羊豆中GoCAX 基因表达特性 | 第42页 |
·结果与分析 | 第42-52页 |
·GoCAX 基因3'端cDNA 的克隆 | 第42-43页 |
·GoCAX 基因5'端cDNA 的克隆 | 第43页 |
·GoCAX 基因ORF 扩增 | 第43-45页 |
·GoCAX 基因生物信息学分析 | 第45-52页 |
·讨论 | 第52-53页 |
第五章 结论和展望 | 第53-54页 |
·主要结论 | 第53页 |
·后续工作展望 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-58页 |
附录 | 第58-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
作者简介 | 第68页 |