中文摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-11页 |
中英文缩略语表 | 第11-18页 |
第1章 文献综述 | 第18-34页 |
·植物抗逆相关转录因子的研究进展 | 第18-24页 |
·AP2/ERF 类转录因子 | 第19-20页 |
·bZIP 类转录因子 | 第20-22页 |
·MYB 类转录因子 | 第22-23页 |
·WRKY 类转录因子 | 第23页 |
·NAC 类转录因子 | 第23-24页 |
·ERF 转录因子的研究进展 | 第24-31页 |
·ERF 转录因子的结构特征和分类 | 第24-26页 |
·ERF 转录因子的功能特性 | 第26-27页 |
·ERF 转录因子在植物逆境胁迫信号转导途径中的作用 | 第27-29页 |
·ERF 转录因子在植物抗逆性改良上的应用 | 第29-30页 |
·大豆中的 ERF 转录因子 | 第30-31页 |
·植物转录因子的研究方法 | 第31-33页 |
·植物转录因子的瞬间转化表达分析 | 第31-32页 |
·植物转录因子的功能突变分析 | 第32-33页 |
·本研究的目的与意义 | 第33-34页 |
第2章 GmERF6 和 GmERF7 的克隆及序列分析 | 第34-46页 |
·材料 | 第34-35页 |
·植物材料 | 第34页 |
·宿主菌及载体 | 第34页 |
·酶及试剂 | 第34页 |
·引物及测序 | 第34-35页 |
·主要仪器设备 | 第35页 |
·方法 | 第35-38页 |
·RNA 提取及 cDNA 合成 | 第35-36页 |
·GmERF6 和 GmERF7 的 PCR 扩增 | 第36页 |
·PCR 产物的回收 | 第36-37页 |
·大肠杆菌 DH5α感受态细胞的制备 | 第37页 |
·PCR 产物的克隆 | 第37-38页 |
·冻融法转化大肠杆菌 DH5α感受态细胞 | 第38页 |
·GmERF6 和 GmERF7 序列的生物信息学分析 | 第38页 |
·结果 | 第38-44页 |
·GmERF6 和 GmERF7 基因 cDNA 全长序列的获得 | 第38-39页 |
·GmERF6 和 GmERF7 基因的序列特征分析及编码蛋白的结构功能预测 | 第39-42页 |
·GmERF6 和 GmERF7 基因保守域同源性及进化树分析 | 第42-44页 |
·讨论 | 第44页 |
·小结 | 第44-46页 |
第3章 GmERF6 和 GmERF7 功能的初步分析 | 第46-74页 |
·材料 | 第46-48页 |
·植物材料 | 第46页 |
·宿主菌及载体 | 第46页 |
·酶及试剂 | 第46页 |
·引物及测序 | 第46-48页 |
·主要仪器设备 | 第48页 |
·方法 | 第48-57页 |
·亚细胞定位载体、酵母单杂交载体和原核表达载体的构建 | 第48-49页 |
·亚细胞定位 | 第49-50页 |
·酵母单杂交 | 第50-51页 |
·蛋白纯化及 EMSA | 第51-53页 |
·GmERF6 和 GmERF7 转录调节活性分析 | 第53-56页 |
·GmERF6 和 GmERF7 的表达模式分析 | 第56-57页 |
·结果 | 第57-71页 |
·GmERF6 和 GmERF7 的亚细胞定位 | 第57-58页 |
·GmERF6 和 GmERF7 在酵母中的转录激活活性验证 | 第58-60页 |
·GmERF6 和 GmERF7 蛋白与 GCC-box 的体外结合 | 第60-64页 |
·GmERF6 和 GmERF7 转录调节活性分析 | 第64-67页 |
·GmERF6 和 GmERF7 的表达模式分析 | 第67-71页 |
·讨论 | 第71-73页 |
·小结 | 第73-74页 |
第4章 GmERF6 和 GmERF7 启动子的克隆及瞬时表达分析 | 第74-88页 |
·材料 | 第74-75页 |
·植物材料 | 第74页 |
·宿主菌及载体 | 第74页 |
·酶及试剂 | 第74页 |
·引物及测序 | 第74-75页 |
·主要仪器设备 | 第75页 |
·方法 | 第75-76页 |
·大豆基因组 DNA 的提取 | 第75页 |
·GmERF6 和 GmERF7 基因启动子的克隆 | 第75页 |
·GmERF6P 和 GmERF7P 顺式作用元件预测与分析 | 第75页 |
·表达载体的构建及农杆菌转化 | 第75-76页 |
·烟草叶片的转化及胁迫处理 | 第76页 |
·组织化学染色 | 第76页 |
·GUS 荧光定量 | 第76页 |
·结果 | 第76-85页 |
·GmERF6 和 GmERF7 基因启动子序列的获得 | 第76-77页 |
·GmERF6P 和 GmERF7P 序列顺式作用元件的预测与分析 | 第77-81页 |
·瞬时表达载体的构建及农杆菌转化 | 第81页 |
·GmERF6P 和 GmERF7P 逆境诱导瞬时表达 | 第81-84页 |
·GmERF6 对 GmERF6P 启动活性的反馈调控 | 第84-85页 |
·讨论 | 第85-87页 |
·小结 | 第87-88页 |
第5章 GmERF6 在拟南芥中的表达及抗旱性分析 | 第88-100页 |
·材料 | 第88-90页 |
·植物材料 | 第88页 |
·宿主菌及载体 | 第88页 |
·酶及试剂 | 第88页 |
·引物及测序 | 第88-89页 |
·主要仪器设备 | 第89-90页 |
·方法 | 第90-92页 |
·拟南芥遗传转化 | 第90页 |
·转基因拟南芥的筛选及鉴定 | 第90-91页 |
·T3代转基因拟南芥抗逆相关基因的半定量 RT-PCR | 第91页 |
·拟南芥中抗逆相关基因启动子顺式作用元件预测分析 | 第91-92页 |
·T3 代 GmERF6 转基因拟南芥的抗旱性鉴定 | 第92页 |
·结果 | 第92-98页 |
·GmERF6 转基因拟南芥植株的筛选及检测 | 第92-94页 |
·T3代 GmERF6 转基因拟南芥中抗逆相关基因的表达 | 第94-96页 |
·T3代 GmERF6 转基因拟南芥的抗旱性分析 | 第96-98页 |
·讨论 | 第98-99页 |
·小结 | 第99-100页 |
第6章 GmERF7 在拟南芥和烟草中的表达及抗盐性分析 | 第100-118页 |
·材料 | 第100-101页 |
·植物材料 | 第100页 |
·宿主菌及载体 | 第100页 |
·酶及试剂 | 第100页 |
·引物及测序 | 第100-101页 |
·主要仪器设备 | 第101页 |
·方法 | 第101-104页 |
·拟南芥遗传转化 | 第101页 |
·转基因拟南芥的筛选及鉴定 | 第101页 |
·GmERF7 下游基因半定量 RT-PCR | 第101页 |
·拟南芥中抗逆相关基因启动子顺式作用元件预测分析 | 第101页 |
·T_3代 GmERF7 转基因拟南芥高盐胁迫条件下萌发率测定 | 第101页 |
·烟草遗传转化 | 第101-102页 |
·转基因烟草的筛选及鉴定 | 第102页 |
·T_1代 GmERF7 转基因烟草的抗盐性鉴定 | 第102-104页 |
·结果 | 第104-115页 |
·GmERF7 转基因拟南芥植株的筛选及检测 | 第104-106页 |
·T_3代 GmERF7 转基因拟南芥中抗逆相关基因的表达 | 第106-107页 |
·T_3代 GmERF7 转基因拟南芥高盐胁迫条件下萌发率分析 | 第107-108页 |
·GmERF7 转基因烟草植株的筛选及检测 | 第108-110页 |
·T_1代 GmERF7 转基因烟草的抗盐性分析 | 第110-115页 |
·讨论 | 第115-116页 |
·小结 | 第116-118页 |
结论 | 第118-120页 |
参考文献 | 第120-134页 |
附录 | 第134-140页 |
作者简介及科研成果 | 第140-141页 |
致谢 | 第141-142页 |