| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 缩略语对照表 | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-24页 |
| 1.1 涡虫简介 | 第12-14页 |
| 1.2 研究历史 | 第14-16页 |
| 1.3 体轴再生 | 第16-17页 |
| 1.3.1 前-后(A/P)轴 | 第16页 |
| 1.3.2 背-腹(D/V)轴 | 第16-17页 |
| 1.3.3 中-侧(M/L)轴 | 第17页 |
| 1.4 Neoblasts与再生 | 第17-19页 |
| 1.5 PI3K信号通路与再生 | 第19-21页 |
| 1.5.1 PI3K基因简介 | 第19-20页 |
| 1.5.2 PI3K基因与再生 | 第20-21页 |
| 1.6 展望 | 第21-22页 |
| 1.7 本论文的研究目的及意义 | 第22-24页 |
| 第二章 东亚三角涡虫Djpi3k基因的克隆 | 第24-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第24页 |
| 2.2 实验试剂 | 第24-25页 |
| 2.3 实验耗材 | 第25页 |
| 2.4 实验仪器 | 第25页 |
| 2.5 主要试剂配制 | 第25-26页 |
| 2.6 实验方法 | 第26-30页 |
| 2.6.1 样品收集 | 第26页 |
| 2.6.2 东亚三角涡虫总RNA提取 | 第26页 |
| 2.6.3 东亚三角涡虫cDNA合成 | 第26-27页 |
| 2.6.4 东亚三角涡虫Djpi3k基因核心序列扩增 | 第27-28页 |
| 2.6.5 目的基因的回收 | 第28页 |
| 2.6.6 连接反应 | 第28页 |
| 2.6.7 转化反应 | 第28-29页 |
| 2.6.8 菌液PCR检测及测序 | 第29-30页 |
| 2.7 实验结果 | 第30-33页 |
| 2.7.1 东亚三角涡虫总RNA提取 | 第30页 |
| 2.7.2 PCR扩增Djpi3k基因 | 第30-31页 |
| 2.7.3 测序结果分析 | 第31-33页 |
| 2.8 小结与讨论 | 第33-34页 |
| 第三章 Djpi3k基因在涡虫再生过程中的时空表达模式 | 第34-52页 |
| 3.1 实验材料 | 第34页 |
| 3.2 实验试剂 | 第34-36页 |
| 3.3 实验耗材 | 第36页 |
| 3.4 实验仪器 | 第36页 |
| 3.5 主要试剂配制 | 第36-38页 |
| 3.6 实验方法 | 第38-44页 |
| 3.6.1 完整涡虫及再生片段形态观察 | 第38页 |
| 3.6.2 不同再生时间点RT-PCR检测 | 第38-39页 |
| 3.6.3 实时定量PCR (qRT-PCR)定量分析 | 第39页 |
| 3.6.4 东亚三角涡虫整体免疫荧光染色 | 第39-40页 |
| 3.6.5 东亚三角涡虫整体原位杂交 | 第40-44页 |
| 3.7 实验结果 | 第44-49页 |
| 3.7.1 完整涡虫形态结构 | 第44-45页 |
| 3.7.2 涡虫再生形态观察 | 第45页 |
| 3.7.3 不同再生时间点RT-PCR检测 | 第45-46页 |
| 3.7.4 实时定量PCR (qRT-PCR)定量分析 | 第46-47页 |
| 3.7.5 地高辛标记探针合成 | 第47-48页 |
| 3.7.6 整体原位杂交观察Djpi3k基因空间分布 | 第48-49页 |
| 3.8 小结与讨论 | 第49-52页 |
| 第四章 Djpi3k基因对涡虫再生的影响 | 第52-64页 |
| 4.1 实验材料 | 第52页 |
| 4.2 实验试剂 | 第52-53页 |
| 4.3 实验耗材 | 第53页 |
| 4.4 实验仪器 | 第53页 |
| 4.5 主要试剂配制 | 第53-54页 |
| 4.6 实验方法 | 第54-56页 |
| 4.6.1 抑制剂最适浓度的确定 | 第54-55页 |
| 4.6.2 实时定量PCR (qRT-PCR)检测neoblasts标志基因 | 第55页 |
| 4.6.3 东亚三角涡虫整体免疫荧光染色 | 第55页 |
| 4.6.4 TUNEL凋亡实验 | 第55-56页 |
| 4.7 实验结果 | 第56-62页 |
| 4.7.1 抑制剂最适浓度的确定 | 第56页 |
| 4.7.2 正常组与抑制剂组东亚三角涡虫形态对比观察 | 第56-57页 |
| 4.7.3 正常组与抑制剂组东亚三角涡虫脑部整体免疫荧光染色 | 第57-58页 |
| 4.7.4 实时定量PCR(qRT-PCR)检测neoblasts标志基因 | 第58-59页 |
| 4.7.5 正常组与抑制剂组东亚三角涡虫H3P标记增殖细胞 | 第59页 |
| 4.7.6 TUNEL检测凋亡细胞 | 第59-62页 |
| 4.8 小结与讨论 | 第62-64页 |
| 第五章 Djpi3k基因在涡虫纤毛维持中的作用 | 第64-68页 |
| 5.1 实验材料 | 第64页 |
| 5.2 实验试剂 | 第64页 |
| 5.3 实验耗材 | 第64-65页 |
| 5.4 实验仪器 | 第65页 |
| 5.5 主要试剂配制 | 第65页 |
| 5.6 实验方法 | 第65-66页 |
| 5.6.1 东亚三角涡虫整体免疫荧光染色 | 第65-66页 |
| 5.7 实验结果 | 第66-67页 |
| 5.7.1 形态观察 | 第66-67页 |
| 5.7.2 正常组与抑制剂组东亚三角涡虫纤毛整体免疫荧光染色 | 第67页 |
| 5.8 小结与讨论 | 第67-68页 |
| 结论 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-78页 |
| 致谢 | 第78-80页 |
| 攻读硕士学位期间取得的科研成果 | 第80页 |
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