| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第一部分 引言 | 第9-18页 |
| 一、肿瘤靶向药物治疗的研究进展 | 第9-10页 |
| （一） 概述 | 第9页 |
| （二） 分子靶向药物分类 | 第9-10页 |
| 二、抗肿瘤药物的筛选 | 第10-12页 |
| （一） 动物水平的药物筛选 | 第10-11页 |
| （二） 细胞和分子水平的药物筛选 | 第11-12页 |
| 三、c-Myc基因与肿瘤 | 第12-18页 |
| （一） c-Myc基因及蛋白质简介 | 第12页 |
| （二） c-Myc的转录表达调控 | 第12-13页 |
| （三） c-Myc的生物学功能 | 第13-17页 |
| （四） 本研究的目的和意义 | 第17-18页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第18-30页 |
| 一、实验材料 | 第18-20页 |
| （一） 质粒和细胞株 | 第18页 |
| （二） 实验试剂及主要试剂盒 | 第18-19页 |
| （三） 实验仪器 | 第19-20页 |
| 二、实验方法 | 第20-30页 |
| （一） c-Myc基因和c-Myc启动子的钓取 | 第20-25页 |
| （二） pcDNA3.0-c-Myc表达载体及pGL3-c-Myc荧光素酶报告载体的构建 | 第25页 |
| （三） 细胞复苏、培养、传代和冻存 | 第25-26页 |
| （四） pGL3-c-Myc荧光素酶报告载体的鉴定 | 第26页 |
| （五） c-Myc表达调节剂的筛选 | 第26-27页 |
| （六） RT-PCR | 第27页 |
| （七） 蛋白免疫印迹分析（Western Blot） | 第27-28页 |
| （八） MTT检测 | 第28-29页 |
| （九） 细胞凋亡检测 | 第29页 |
| （十） 细胞周期检测 | 第29页 |
| （十一） BrdU掺入实验 | 第29-30页 |
| 第三部分 实验结果 | 第30-55页 |
| 一、pcDNA3.0-c-Myc真核表达载体的构建 | 第30-32页 |
| 二、pGL3-c-Myc启动子荧光素酶报告载体的构建及启动子活性分析 | 第32-35页 |
| （一） pGL3-c-Myc荧光素酶报告载体构建 | 第32-34页 |
| （二） pGL3-c-Myc荧光素酶的活性检测 | 第34-35页 |
| 三、基于c-Myc启动子活性的化合物筛选 | 第35-48页 |
| （一） c-Myc转录调节剂的初步筛选 | 第35-46页 |
| （二） c-Myc转录调节剂的复筛 | 第46页 |
| （三） C-Myc表达调节剂的功能验证 | 第46-48页 |
| 四、TI101 的抗肿瘤作用研究 | 第48-55页 |
| （一） MTT法检测TI101 对各细胞系细胞活力的影响以及IC50 值的测定 | 第48-50页 |
| （二） TI101 对HepG2 细胞凋亡的诱导作用 | 第50-52页 |
| （三） TI101 对HepG2 细胞增殖的抑制作用 | 第52-55页 |
| 第四部分 讨论 | 第55-58页 |
| （一） pGL3-c-Myc荧光素酶报告载体的构建及药物筛选 | 第55-56页 |
| （二） TI101 抗肿瘤活性的研究及验证 | 第56-58页 |
| 第五部分 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-64页 |
| 附录 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 作者简介 | 第66页 |
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