中文摘要 | 第3-4页 |
英文摘要 | 第4页 |
第一章 文献综述 | 第9-24页 |
§1.1 蚜虫传毒方式的分类 | 第9-11页 |
§1.2 蚜虫非循回型(non-circulative)传毒的分子机制 | 第11-17页 |
§1.2.1 黄瓜花叶病毒属(Cucumvirus) | 第11-12页 |
§1.2.2 马铃薯Y病毒属(Potyvirus) | 第12-16页 |
§1.2.2.1 外壳蛋白(CP) | 第12-13页 |
§1.2.2.2 蚜传辅助成分(HC-Pro) | 第13-14页 |
§1.2.2.3 CP与HC-Pro的相互作用以及与蚜虫口针病毒附着位点(VAS)的相互作用 | 第14-16页 |
§1.2.3 花椰菜花叶病毒属 | 第16-17页 |
§1.2.3.1 蚜传辅助因子(ATF) | 第16页 |
§1.2.3.2 ORF3产物—P15 | 第16-17页 |
§1.3 蚜虫循回型(circulative)传毒的分子机制 | 第17-21页 |
§1.3.1 蚜虫循回非增殖型传毒的一般模型 | 第17-19页 |
§1.3.2 CP及CP通读蛋白(RTP)在循回传毒中的作用 | 第19-20页 |
§1.3.3 蚜虫内共生菌(Buchnera spp.)GroEL蛋白在循回传毒中的作用 | 第20-21页 |
§1.4 本研究的目的、意义 | 第21-24页 |
第二章 材料与方法 | 第24-35页 |
§2.1 材料 | 第24页 |
§2.1.1 供试蚜虫 | 第24页 |
§2.1.2 菌种、质粒与试剂 | 第24页 |
§2.2 方法 | 第24-35页 |
§2.2.1 模板DNA的提取 | 第24-25页 |
§2.2.2 引物设计与合成 | 第25页 |
§2.2.3 Buchnera groEL基因的扩增 | 第25页 |
§2.2.4 核酸的琼脂糖凝胶电泳 | 第25-26页 |
§2.2.5 PCR产物的纯化 | 第26页 |
§2.2.6 目的片段与克隆载体的连接 | 第26-27页 |
§2.2.7 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第27-28页 |
§2.2.8 质粒DNA的小量提取 | 第28-29页 |
§2.2.9 重组质粒的鉴定 | 第29页 |
§2.2.10 菌种保存 | 第29-30页 |
§2.2.11 全序列测定与分析 | 第30页 |
§2.2.12 Buchnera groEL基因的原核表达 | 第30-31页 |
§2.2.13 SDS-PAGE检测原核蛋白的表达 | 第31页 |
§2.2.14 融合蛋白的纯化 | 第31-32页 |
§2.2.15 抗血清的制备 | 第32页 |
§2.2.16 Western blot检测 | 第32-35页 |
第三章 结果与分析 | 第35-48页 |
§3.1 模板DNA的提取 | 第35页 |
§3.2 PCR扩增目的片段 | 第35页 |
§3.3 groEL基因的克隆与鉴定 | 第35-36页 |
§3.4 序列测定与分析 | 第36-39页 |
§3.5 基因序列分析与比较 | 第39-41页 |
§3.6 蛋白质的氨基酸序列推导 | 第41页 |
§3.7 氨基酸序列分析与比较 | 第41-42页 |
§3.8 原核表达载体的构建 | 第42-45页 |
§3.9 Buchnera groEL基因的原核表达 | 第45-47页 |
§3.10 抗血清的琼脂双扩散检测 | 第47页 |
§3.11 Western blot检测 | 第47-48页 |
第四章 讨论 | 第48-51页 |
§4.1 GroEL蛋白结合位点的预测 | 第48页 |
§4.2 GroEL蛋白结构的预测 | 第48-49页 |
§4.3 Buchnera groEL基因的原核表达 | 第49-50页 |
§4.4 蚜虫Buchnera GroEL蛋白抗血清的Western blot检测 | 第50-51页 |
结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-62页 |
附图 | 第62-70页 |
作者简介 | 第70-71页 |
致谢 | 第71页 |