摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-9页 |
第一章 文献综述 | 第13-35页 |
1 Kiss/Kisspeptin受体系统与大脑垂体性腺轴 | 第13-31页 |
1.1 kiss/kisspepin受体系统简述 | 第13页 |
1.2 kiss1/kiss1R系统研究进展 | 第13-31页 |
1.2.1 Kisspeptin及其的受体的发现 | 第13-15页 |
1.2.2 Kisspeptin及其受体的结构 | 第15-18页 |
1.2.3 Kiss/Kisspeptin受体系统在脊椎动物大脑垂体性腺轴中分布与功能 | 第18-28页 |
1.2.4 Kiss/kisspeptin受体系统与大脑垂体性腺轴相关激素 | 第28-31页 |
2 鳄目(crocodylia)动物的大脑垂体性腺轴相关激素的研究进展 | 第31-33页 |
3 扬子鳄生殖调控机理研究的意义 | 第33-35页 |
第二章 扬子鳄kiss1/kiss1R基因和GnRH1基因的 克隆及其序列分析 | 第35-59页 |
1 引言 | 第35页 |
2 材料和方法 | 第35-45页 |
2.1 实验材料 | 第35-37页 |
2.1.1 主要试剂及仪器 | 第35-37页 |
2.2 实验方法 | 第37-45页 |
2.2.1 实验材料 | 第37页 |
2.2.2 RNA提取 | 第37-38页 |
2.2.3 cDNA第一链的合成 | 第38页 |
2.2.4 kiss1/kiss1R和GnRH1 cDNA序列全长扩增 | 第38-41页 |
2.2.5 DNA提取 | 第41页 |
2.2.6 引物设计及目的片段的扩增和测序 | 第41-42页 |
2.2.7 生物信息学和进化分析 | 第42-45页 |
3 结果 | 第45-57页 |
3.1 扬子鳄kiss1/kiss1R和GnRH1 cDNA全长及氨基酸序列分析 | 第45-51页 |
3.2 kiss1,kiss1R以及GnRH1的系统进化分析 | 第51-53页 |
3.3 扬子鳄kiss1R基因启动子序列分析 | 第53-57页 |
4 讨论 | 第57-59页 |
第三章 kiss1和性类固醇激素受体在扬子鳄脑及 不同组织中的定位表达 | 第59-70页 |
1 引言 | 第59页 |
2 材料和方法 | 第59-61页 |
2.1 实验材料 | 第59-60页 |
2.1.1 主要试剂及仪器 | 第59-60页 |
2.2 实验方法 | 第60-61页 |
2.2.1 取材 | 第60页 |
2.2.2 免疫组织化学SABC法 | 第60-61页 |
3 结果 | 第61-68页 |
3.1 kiss1蛋白在成年扬子鳄各组织中的定位表达 | 第61-64页 |
3.2 类固醇激素受体蛋白在成年扬子鳄脑组织中的定位表达 | 第64-68页 |
4 讨论 | 第68-70页 |
第四章 kiss1/kiss1R以及大脑垂体性腺轴相关基因的 表达规律 | 第70-93页 |
1 引言 | 第70页 |
2 材料和方法 | 第70-72页 |
2.1 实验材料 | 第70页 |
2.1.1 主要试剂及仪器 | 第70页 |
2.2 实验方法 | 第70-72页 |
2.2.1 取材 | 第70-71页 |
2.2.2 总RNA提取 | 第71页 |
2.2.3 cDNA第一链的合成 | 第71页 |
2.2.4 实时荧光定量PCR | 第71-72页 |
3 结果 | 第72-89页 |
3.1 扬子鳄kiss1/kiss1R mRNA在各组织中的相对表达水平 | 第72-74页 |
3.2 扬子鳄大脑垂体性腺轴相关基因在各组织中的相对表达水平 | 第74-80页 |
3.3 扬子鳄生殖周期不同阶段kiss1/kiss1R mRNA在下丘脑、垂体和卵巢中的表达变化 | 第80-83页 |
3.4 扬子鳄生殖周期不同阶段大脑垂体性腺轴相关基因在下丘脑、垂体和卵巢中的表达变化 | 第83-89页 |
4 讨论 | 第89-93页 |
第五章 扬子鳄kiss1R基因双荧光素酶载体构建 及其活性分析 | 第93-106页 |
1 引言 | 第93页 |
2 材料与方法 | 第93-98页 |
2.1 实验材料 | 第93-94页 |
2.1.1 细胞和载体 | 第93页 |
2.1.2 主要试剂及仪器 | 第93-94页 |
2.2 实验方法 | 第94-98页 |
2.2.1 合成扬子鳄kiss1R基因 | 第94页 |
2.2.2 扬子鳄kiss1R基因双荧光素酶表达载体的构建 | 第94页 |
2.2.3 扬子鳄Kiss1R基因的双荧光素酶活性检测 | 第94-98页 |
3 结果 | 第98-103页 |
3.1 扬子鳄kiss1R基因双荧光素酶表达载体的构建 | 第98-101页 |
3.2 扬子鳄Kiss1R的信号转导通路和配体选择性 | 第101-103页 |
4 讨论 | 第103-106页 |
第六章 主要结论与展望 | 第106-108页 |
1 本研究主要结论 | 第106页 |
2 本研究主要创新点 | 第106-107页 |
3 研究展望 | 第107-108页 |
参考文献 | 第108-129页 |
致谢 | 第129-130页 |
附:读博期间论文发表情况 | 第130页 |