摘要 | 第3-5页 |
abstract | 第5-6页 |
缩略语表 | 第7-12页 |
第一章 引言 | 第12-19页 |
1.1 鸡蛋过敏 | 第12-14页 |
1.1.1 鸡蛋过敏的危害 | 第12页 |
1.1.2 鸡蛋过敏的免疫学机制 | 第12-13页 |
1.1.3 鸡蛋中的主要过敏原 | 第13-14页 |
1.2 卵白蛋白 | 第14-15页 |
1.2.1 卵白蛋白的理化性质 | 第14页 |
1.2.2 卵白蛋白的致敏性 | 第14-15页 |
1.2.3 卵白蛋白的表位定位 | 第15页 |
1.3 多酚氧化酶交联蛋白的研究进展 | 第15-17页 |
1.3.1 多酚氧化酶交联蛋白的作用机理 | 第15-16页 |
1.3.2 多酚氧化酶交联对过敏原致敏性的影响 | 第16-17页 |
1.4 鸡蛋蛋白的交联研究 | 第17页 |
1.5 立题背景及研究内容 | 第17-19页 |
1.5.1 立题背景 | 第17-18页 |
1.5.2 研究内容 | 第18-19页 |
第二章 鸡蛋卵白蛋白的酶催化交联条件的研究 | 第19-35页 |
2.1 引言 | 第19页 |
2.2 材料与设备 | 第19-22页 |
2.2.1 材料与试剂 | 第19-20页 |
2.2.2 仪器与设备 | 第20页 |
2.2.3 主要溶液的配制 | 第20-22页 |
2.3 实验方法 | 第22-26页 |
2.3.1 鸡蛋卵白蛋白的分离纯化 | 第22-24页 |
2.3.2 多酚氧化酶酶活的测定 | 第24页 |
2.3.3 卵白蛋白与多酚氧化酶交联条件的摸索 | 第24-26页 |
2.4 结果 | 第26-33页 |
2.4.1 鸡蛋卵白蛋白电泳鉴定 | 第26-27页 |
2.4.2 多酚氧化酶的酶活 | 第27页 |
2.4.3 卵白蛋白与多酚氧化酶交联最佳条件的选择 | 第27-33页 |
2.5 讨论 | 第33-34页 |
2.6 小结 | 第34-35页 |
第三章 交联对卵白蛋白结构、消化性及致敏性的影响 | 第35-51页 |
3.1 引言 | 第35页 |
3.2 材料与设备 | 第35-37页 |
3.2.1 材料与试剂 | 第35-36页 |
3.2.2 仪器与设备 | 第36页 |
3.2.3 主要溶液的配制 | 第36-37页 |
3.3 实验方法 | 第37-41页 |
3.3.1 鸡蛋卵白蛋白酶交联产物的制备 | 第37-38页 |
3.3.2 鸡蛋卵白蛋白酶交联产物的结构分析 | 第38-39页 |
3.3.3 体外模拟胃肠消化 | 第39页 |
3.3.4 IgG结合能力评估 | 第39-40页 |
3.3.5 鸡蛋卵白蛋白交联产物的IgE结合能力实验 | 第40-41页 |
3.4 结果 | 第41-48页 |
3.4.1 鸡蛋卵白蛋白酶交联产物结构分析 | 第41-46页 |
3.4.2 体外模拟胃肠消化实验 | 第46-47页 |
3.4.3 IgG结合能力实验 | 第47页 |
3.4.4 IgE结合能力实验 | 第47-48页 |
3.5 讨论 | 第48-50页 |
3.5.1 多酚氧化酶交联卵白蛋白对其结构的影响 | 第48-49页 |
3.5.2 关于卵白蛋白及其酶促交联产物的体外模拟胃肠消化 | 第49-50页 |
3.5.3 关于卵白蛋白及其酶促交联产物的过敏原性 | 第50页 |
3.6 小结 | 第50-51页 |
第四章 鸡蛋卵白蛋白交联产物致敏性的动物学实验评估 | 第51-62页 |
4.1 引言 | 第51页 |
4.2 材料与设备 | 第51-52页 |
4.2.1 材料与试剂 | 第51页 |
4.2.2 仪器与设备 | 第51-52页 |
4.2.3 主要溶液配制 | 第52页 |
4.3 实验方法 | 第52-55页 |
4.3.1 抗原的制备 | 第52页 |
4.3.2 致敏小鼠动物模型的建立 | 第52-53页 |
4.3.3 小鼠血清中特异性抗体IgE、IgG、IgG1、IgG2a的检测 | 第53-54页 |
4.3.4 小鼠血清中肥大细胞蛋白酶mMCP-1的检测 | 第54页 |
4.3.5 小鼠血清中组胺的检测 | 第54页 |
4.3.6 小鼠细胞因子的检测 | 第54-55页 |
4.3.7 十二指肠组织切片 | 第55页 |
4.3.8 数据统计分析 | 第55页 |
4.4 结果 | 第55-60页 |
4.4.1 小鼠过敏临床症状 | 第55-56页 |
4.4.2 小鼠血清中特异性抗体IgE、IgG、IgG1、IgG2a水平 | 第56页 |
4.4.3 小鼠血清中肥大细胞蛋白酶mMCP-1水平 | 第56-57页 |
4.4.4 小鼠血清中的组胺水平 | 第57-58页 |
4.4.5 体外激发小鼠脾脏细胞所分泌的细胞因子含量 | 第58-59页 |
4.4.6 肠组织形态分析 | 第59-60页 |
4.5 讨论 | 第60-61页 |
4.5.1 小鼠血清中特异性抗体 | 第60-61页 |
4.5.2 小鼠脾细胞中相关细胞因子酶促交联前后的变化 | 第61页 |
4.6 小结 | 第61-62页 |
第五章 鸡蛋卵白蛋白酶交联产物的中试生产设计 | 第62-67页 |
5.1 引言 | 第62页 |
5.2 中试工艺路线 | 第62-64页 |
5.2.1 蛋清蛋黄分离操作单元 | 第62页 |
5.2.2 调配罐操作单元 | 第62页 |
5.2.3 离心操作单元 | 第62-63页 |
5.2.4 阴离子层析操作单元 | 第63页 |
5.2.5 冻干操作单元 | 第63页 |
5.2.6 酶促交联操作单元 | 第63-64页 |
5.3 中试生产设备的选型 | 第64-65页 |
5.3.1 蛋清蛋黄分离机 | 第64-65页 |
5.3.2 调配罐 | 第65页 |
5.3.3 阴离子交换层析柱 | 第65页 |
5.3.4 真空冻干设备 | 第65页 |
5.3.5 泵的确定 | 第65页 |
5.4 中试设备流程图 | 第65-66页 |
5.5 中试设备参数 | 第66页 |
5.6 小结 | 第66-67页 |
第六章 结论与展望 | 第67-69页 |
6.1 结论 | 第67页 |
6.2 展望 | 第67-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-78页 |
附录 | 第78页 |