| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 1. 引言 | 第12-23页 |
| 1.1. 前言 | 第12页 |
| 1.2. 造血干细胞及其分化 | 第12-13页 |
| 1.3. 巨核细胞生成和血小板生成 | 第13-14页 |
| 1.4. 巨核细胞分化及多倍体化调节 | 第14-16页 |
| 1.4.1. TPO介导多个信号通路在巨核细胞分化中发挥作用 | 第14-15页 |
| 1.4.2. 多种转录因子在巨核细胞多倍体化中发挥作用 | 第15-16页 |
| 1.4.3. RhoA信号通路是巨核细胞多倍体化的关键调节因子 | 第16页 |
| 1.5. 细胞周期与核内有丝分裂 | 第16-17页 |
| 1.6. 白血病的定义和分类 | 第17-20页 |
| 1.6.1. 骨髓增生性肿瘤 | 第18-19页 |
| 1.6.2. 急性巨核细胞白血病 | 第19-20页 |
| 1.7. 急性巨核细胞白血病治疗研究进展 | 第20页 |
| 1.8. BMP2K概述 | 第20-23页 |
| 1.8.1. BMP家族概述 | 第20-21页 |
| 1.8.2. BMP2K概述 | 第21-23页 |
| 2. 实验方法与材料 | 第23-49页 |
| 2.1. 实验材料 | 第23-29页 |
| 2.1.1. 细胞和菌株 | 第23页 |
| 2.1.2. 实验动物 | 第23页 |
| 2.1.3. 试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.4. 相关试剂配制 | 第24-26页 |
| 2.1.5. 抗体 | 第26-27页 |
| 2.1.6. 耗材 | 第27页 |
| 2.1.7. 质粒 | 第27-28页 |
| 2.1.8. 实验设备 | 第28-29页 |
| 2.2. 实验方法 | 第29-49页 |
| 2.2.1. 感受态的制备 | 第29页 |
| 2.2.2. 质粒DNA或DNA片段的转化 | 第29页 |
| 2.2.3. 质粒提取 | 第29-30页 |
| 2.2.4. 琼脂糖凝胶回收 | 第30-31页 |
| 2.2.5. 质粒构建 | 第31-34页 |
| 2.2.6. 悬浮细胞蛋白提取 | 第34-35页 |
| 2.2.7. 蛋白免疫印迹实验 | 第35-37页 |
| 2.2.8. 免疫印迹共沉淀 | 第37-38页 |
| 2.2.9. 细胞或者组织RNA的提取 | 第38-39页 |
| 2.2.10. cDNA的反转录 | 第39-40页 |
| 2.2.11. 实时荧光定量PCR | 第40-41页 |
| 2.2.12. 细胞培养 | 第41-42页 |
| 2.2.13. 外周血单核细胞分离 | 第42-43页 |
| 2.2.14. 细胞转染 | 第43页 |
| 2.2.15. 病毒包装(以 10cm皿细胞为例) | 第43-44页 |
| 2.2.16. 悬浮细胞系的构建 | 第44页 |
| 2.2.17. 细胞增殖实验 | 第44-45页 |
| 2.2.18. 免疫荧光共定位 | 第45页 |
| 2.2.19. 悬浮细胞周期检测 | 第45-46页 |
| 2.2.20. MLN8237诱导CMK细胞向巨核细胞分化 | 第46页 |
| 2.2.21. 细胞表面标志物蛋白检测 | 第46页 |
| 2.2.22. 细胞倍性检测 | 第46-47页 |
| 2.2.23. 细胞凋亡检测 | 第47页 |
| 2.2.24. 双荧光素酶测定实验 | 第47页 |
| 2.2.25. 胎肝细胞的分离和培养 | 第47-48页 |
| 2.2.26. 数据统计分析 | 第48-49页 |
| 3. 实验结果 | 第49-67页 |
| 3.1. BMP2K与巨核细胞分化与白血病有关 | 第49-52页 |
| 3.1.1. BMP2K在人巨核细胞分化过程中表达上升 | 第49-50页 |
| 3.1.2. BMP2K在AML和AMKL中表达升高 | 第50-51页 |
| 3.1.3. BMP2K在MLM8237诱导的巨核细胞分化中表达量下降 | 第51-52页 |
| 3.2. BMP2K抑制MLN8237诱导的巨核细胞分化 | 第52-55页 |
| 3.2.1. BMP2K过表达抑制MLN8237诱导的巨核细胞分化 | 第52-53页 |
| 3.2.2. BMP2K低表达促进巨核细胞分化 | 第53-55页 |
| 3.3. BMP2K调节MLN8237应激下的细胞周期 | 第55-58页 |
| 3.3.1. BMP2K过表达促进MLN8237应激下的细胞生长 | 第55-56页 |
| 3.3.2. BMP2K缺损降低MLN8237应激下的细胞增殖 | 第56-58页 |
| 3.4. CDK2介导BMP2K在巨核细胞分化中的作用 | 第58-62页 |
| 3.4.1. BMP2K在细胞周期中发挥重要作用 | 第58-59页 |
| 3.4.2. CDK2和BMP2K存在相互作用 | 第59-60页 |
| 3.4.3. 巨核细胞分化过程中,BMP2K发挥作用需要CDK2 | 第60-62页 |
| 3.5. BMP2K抑制小鼠原代胚肝细胞巨核细胞分化 | 第62-65页 |
| 3.5.1. BMP2K过表达抑制小鼠原代胚肝细胞向巨核细胞分化 | 第62-63页 |
| 3.5.2. BMP2K缺损促进小鼠原代胎肝细胞巨核细胞分化 | 第63-65页 |
| 3.6. BMP2K使AMKL细胞对多种化疗药物产生耐药性 | 第65-67页 |
| 3.6.1. BMP2K拮抗多种药物的作用 | 第65-66页 |
| 3.6.2. BMP2K通过影响细胞凋亡或者增殖拮抗多种药物的作用 | 第66-67页 |
| 4. 讨论 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-76页 |
| 附录 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
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