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亚心型扁藻细胞核与叶绿体稳定转化系统的构建
 
     论文目录
 
摘要第1-6页
Abstract第6-12页
第一章 绪论第12-40页
 第一节 亚心型扁藻的应用研究进展第13-26页
  1 亚心型扁藻生物学特征概述第13页
  2 亚心型扁藻的细胞形态与结构第13-15页
  3 亚心型扁藻的繁殖第15页
  4 亚心型扁藻的基础研究和应用价值第15-26页
   ·亚心型扁藻的培养第15-18页
   ·亚心型扁藻的多糖第18页
   ·亚心型扁藻产氢研究第18-23页
   ·渗透压第23页
   ·亚心型扁藻线粒体基因组第23-26页
 第二节 真核微藻基因工程研究进展第26-39页
  1 真核微藻细胞核转化系统第26-33页
   ·细胞核转化系统的载体元件第26-31页
   ·转化方法第31-33页
   ·转基因藻株的稳定遗传第33页
  2 真核微藻叶绿体转化系统第33-38页
   ·叶绿体基因组第33-34页
   ·叶绿体转化系统的特点第34-36页
   ·叶绿体遗传转化的原理第36-38页
   ·转化方法第38页
  3 真核微藻线粒体转化系统第38-39页
 第三节 本论文研究内容和意义第39-40页
第二章 亚心型扁藻细胞核核转化系统的建立第40-74页
 第一节 亚心型扁藻的培养第40-48页
  1 材料与方法第41-44页
   ·藻株和培养条件第41页
   ·主要试剂第41页
   ·亚心型扁藻生长曲线测定第41页
   ·藻种纯化和保种第41-42页
   ·提取总基因组DNA第42页
   ·引物合成第42-43页
   ·PCR扩增第43-44页
   ·序列比对与分析第44页
  2 结果与讨论第44-47页
   ·亚心型扁藻生长曲线第44-45页
   ·亚心型扁藻基因组DNA的提取第45页
   ·亚心型扁藻分子标记的克隆和序列比对第45-47页
  3 结论第47-48页
 第二节 亚心型扁藻对不同选择压力的敏感性研究第48-53页
  1 材料与方法第48-49页
   ·亚心型扁藻及培养方法第48页
   ·主要试剂第48页
   ·敏感性实验第48-49页
  2 结果与分析第49-51页
   ·亚心型扁藻对六种抗生素的敏感性第49-50页
   ·亚心型扁藻对除草剂草丁膦的敏感性第50-51页
  3 讨论第51-53页
 第三节 珠磨法介导绿色荧光蛋白在亚心型扁藻中的瞬间表达第53-62页
  1 材料与方法第54-57页
   ·藻种、菌种和培养方法第54页
   ·主要试剂第54-55页
   ·转化载体的制备第55-56页
   ·原生质体制备第56-57页
   ·珠磨法转化第57页
   ·绿色荧光蛋白的瞬间表达第57页
  2 结果与分析第57-60页
   ·制备原生质体第57-59页
   ·绿色荧光蛋白检测第59-60页
  3 讨论第60-62页
 第四节 草丁膦抗性基因在亚心型扁藻细胞核中的稳定表达第62-74页
  1 材料与方法第62-69页
   ·藻种、菌种及培养方法第62页
   ·主要试剂及仪器第62-63页
   ·转化质粒的制备第63页
   ·基因枪转化第63-64页
   ·珠磨法转化第64-65页
   ·筛选第65页
   ·亚心型扁藻基因组提取第65页
   ·PCR扩增bar基因第65-66页
   ·Southern杂交第66-69页
  2 结果第69-72页
   ·除草剂草丁膦筛选亚心型扁藻抗性转化子第69页
   ·PCR检测第69-70页
   ·探针浓度检测第70页
   ·Southern杂交第70-71页
   ·基因枪法和珠磨法转化效率的比较第71-72页
  3 讨论第72-73页
  4 本章小结第73-74页
第三章 亚心型扁藻叶绿体转化系统的建立第74-102页
 第一节 亚心型扁藻叶绿体基因组同源区的克隆第74-79页
  1 材料与方法第74-76页
   ·藻种、菌种及培养方法第74页
   ·亚心型扁藻基因组的提取第74页
   ·引物设计第74-75页
   ·PCR第75页
   ·PCR产物的克隆、测序第75-76页
   ·同源片段的拼接第76页
  2 结果与分析第76-78页
   ·亚心型扁藻基因组DNA的提取第76页
   ·亚心型扁藻叶绿体基因组片段PCR结果第76-77页
   ·PCR产物拼接第77-78页
  3 讨论第78-79页
 第二节 叶绿体转化载体的构建第79-86页
  1 材料与方法第79-83页
   ·藻种、菌种及培养方法第79页
   ·主要试剂第79-80页
   ·亚心型扁藻基因组DNA的提取第80页
   ·引物设计第80-81页
   ·PCR扩增质粒片段第81-82页
   ·PCR产物的克隆、测序第82页
   ·制备质粒第82页
   ·构建亚心型扁藻叶绿体转化质粒第82-83页
  2 结果与分析第83-85页
   ·亚心型扁藻基因组DNA的提取第83页
   ·质粒片段的扩增结果第83-84页
   ·亚心型扁藻叶绿体表达载体第84-85页
  3 讨论第85-86页
 第三节 绿色荧光蛋白在亚心型扁藻叶绿体中的瞬间表达第86-93页
  1 材料与方法第87-89页
   ·藻种、菌种及培养方法第87页
   ·主要试剂及仪器第87-88页
   ·转化质粒的制备第88页
   ·基因枪转化第88页
   ·绿色荧光蛋白的检测第88-89页
  2 结果与分析第89-92页
   ·荧光显微镜观察结果第89页
   ·流式细胞仪分选第89-90页
   ·绿色荧光蛋白的亚细胞定位第90-92页
  3 讨论第92-93页
 第四节 草丁膦抗性基因在亚心型扁藻叶绿体的稳定表达第93-102页
  1 材料与方法第93-96页
   ·藻种、菌种及培养方法第93页
   ·主要试剂及配制方法第93页
   ·转化质粒的制备第93页
   ·基因枪转化第93-94页
   ·筛选第94页
   ·亚心型扁藻基因组提取第94页
   ·PCR检测第94-96页
   ·Southern杂交第96页
  2 结果第96-100页
   ·除草剂草丁膦筛选亚心型扁藻抗性转化子第96页
   ·基因组提取第96-97页
   ·PCR检测第97-99页
   ·探针浓度检测第99页
   ·Southern杂交第99-100页
  3 讨论第100-101页
  4 本章小结第101-102页
本文主要结论和创新性第102-103页
参考文献第103-118页
发表和完成论文情况第118-120页
致谢第120-121页

 
 
论文编号BS2720,这篇论文共121
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