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利用山羊乳腺生物反应器制备具有免疫原性病毒结构蛋白的研究
 
     论文目录
 
摘要第6-8页
ABSTRACT第8-10页
文献综述第15-42页
    第一章 动物乳腺生物反应器研究概况第15-35页
        1.1 动物生物反应器概况第15-18页
            1.1.1 血液生物反应器第16-17页
            1.1.2 膀胱生物反应器第17页
            1.1.3 家禽输卵管生物反应器第17页
            1.1.4 乳腺生物反应器第17-18页
        1.2 乳腺生物反应器的制备第18-33页
            1.2.1 动物的选择第18-19页
            1.2.2 体细胞核移植技术第19-20页
            1.2.3 随机整合转基因技术第20-23页
            1.2.4 基因打靶技术第23-33页
        1.3 总结与展望第33-35页
    第二章 基因工程亚单位疫苗研究进展第35-42页
        2.1. 基因工程亚单位抗原的生产第35-38页
            2.1.1 细菌表达系统第35-36页
            2.1.2 酵母表达系统第36页
            2.1.3 昆虫表达系统第36-37页
            2.1.4 植物表达系统第37页
            2.1.5 哺乳类细胞表达系统第37页
            2.1.6 动物表达系统(乳腺生物反应器)第37-38页
        2.2 兽用基因工程亚单位疫苗的研制与应用第38-41页
            2.2.1 禽流感病毒(H5N1亚型)第38-39页
            2.2.2 猪瘟第39-40页
            2.2.3 猪繁殖与呼吸综合征第40-41页
            2.2.4 口蹄疫第41页
        2.3 总结与展望第41-42页
试验研究第42-104页
    第三章 TALENs表达载体的构建第42-54页
        3.1 试验材料第42-43页
            3.1.1 血液样本第42页
            3.1.2 菌株、质粒和细胞株第42页
            3.1.3 主要试剂第42-43页
            3.1.4 测试化验加工第43页
        3.2 试验方法第43-47页
            3.2.1 TALENs表达载体的构建第43-44页
            3.2.2 TALENs生物活性检测第44-46页
            3.2.3 点突变法制备TALE切口酶表达载体第46-47页
        3.3 结果第47-52页
            3.3.1 靶向BLG exon2 TALENs表达载体的构建及其生物活性验证第47-51页
            3.3.2 TALEs切口酶的鉴定第51-52页
        3.4 讨论第52-53页
        3.5 小结第53-54页
    第四章 EGFP在山羊BLG基因座不同插入位点的表达水平比较第54-76页
        4.1 试验材料第54-55页
            4.1.1 动物组织第54页
            4.1.2 菌株和质粒第54页
            4.1.3 主要试剂第54-55页
            4.1.4 测试化验加工第55页
        4.2 试验方法第55-64页
            4.2.1 针对BLG基因Exon1和Exon2置换型打靶载体的构建第55-59页
            4.2.2 山羊乳腺上皮细胞(GMECs)的培养与鉴定第59-61页
            4.2.3 基因打靶山羊乳腺上皮细胞的建立第61-63页
            4.2.4 EGFP在GMECs中的表达检测第63-64页
        4.3 结果第64-74页
            4.3.1 针对BLG基因exon1和exon2置换型基因打靶载体的构建第64-69页
            4.3.2 GMECs的培养与鉴定第69-70页
            4.3.3 EGFP在山羊BLG基因座不同插入位点的表达水平比较第70-74页
        4.4 讨论第74-75页
        4.5 小结第75-76页
    第五章 基因打靶体细胞的筛选鉴定及转基因山羊的制备第76-95页
        5.1 试验材料第76-77页
            5.1.1 试验动物材料和动物受体第76页
            5.1.2 菌株和质粒第76-77页
            5.1.3 主要试剂第77页
            5.1.4 测试化验加工第77页
        5.2 试验方法第77-83页
            5.2.1 基因打靶载体的构建第77-78页
            5.2.2 西农莎能奶山羊胎儿成纤维细胞的培养与性别鉴定第78-79页
            5.2.3 转染并筛选基因打靶山羊胎儿成纤维细胞第79-81页
            5.2.4 体细胞核移植及胚胎移植第81-82页
            5.2.5 克隆山羊的鉴定第82-83页
        5.3 结果第83-93页
            5.3.1 基因打靶载体的构建第83-85页
            5.3.2 山羊胎儿成纤维细胞培养培养与性别鉴定第85-86页
            5.3.3 基因打靶山羊胎儿成纤维细胞的建立第86-90页
            5.3.4 体细胞核移植生产基因打靶山羊第90-93页
        5.4 讨论第93-94页
        5.5 小结第94-95页
    第六章 转基因山羊乳中rVP1和rE2的表达及免疫原性检测第95-104页
        6.1 试验材料第95-96页
            6.1.1 实验动物第95页
            6.1.2 主要试剂第95-96页
        6.2 试验方法第96-99页
            6.2.1 激素诱导基因打靶奶山羊泌乳第96页
            6.2.2 基因打靶奶山羊乳中E2和VP1蛋白的检测第96-97页
            6.2.3 山羊乳中外源蛋白的纯化第97页
            6.2.4 重组VP1蛋白和重组E2蛋白免疫功能性检验第97-99页
        6.3 结果第99-102页
            6.3.1 基因打靶山羊乳中重组蛋白的检测第99-100页
            6.3.2 乳清中重组蛋白的纯化及检测第100-101页
            6.3.3 rVP1和rE2的免疫功能检验第101-102页
        6.4 讨论第102-103页
        6.5 小结第103-104页
全文结论第104-105页
创新之处与进一步研究的课题第105-106页
参考文献第106-123页
附录 主要仪器第123-125页
缩略词第125-126页
致谢第126-127页
作者简介第127页

 
 
论文编号BS3401170,这篇论文共127
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