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农杆菌介导TvNHX1基因转化矮牵牛及其对NaCl胁迫的响应
 
     论文目录
 
摘要第9-10页
ABSTRACT第10-11页
第1章 绪论第12-21页
    1.1 植物对盐胁迫的响应及耐盐机制第12-15页
        1.1.1 SOS 信号通路第12-13页
        1.1.2 液泡膜 Na~+/H~+逆向转运蛋白 NHX1第13-14页
        1.1.3 盐生植物的耐盐机制第14-15页
    1.2 植物液泡膜 Na~+/H~+逆向转运蛋白研究进展第15-16页
        1.2.1 液泡膜 Na~+/H~+逆向转运蛋白的结构第15页
        1.2.2 液泡膜 Na~+/H~+逆向转运蛋白在植物耐盐中的分子机理第15-16页
    1.3 矮牵牛花色研究第16-18页
        1.3.1 影响矮牵牛花色的因素第16页
        1.3.2 矮牵牛花色的遗传调控第16页
        1.3.3 利用基因工程的方法改变矮牵牛花色的策略第16-17页
        1.3.4 研究前景第17-18页
    1.4 农杆菌介导法在遗传转化中的应用第18页
        1.4.1 农杆菌介导转化法的优点第18页
        1.4.2 农杆菌介导转化法的原理第18页
        1.4.3 影响农杆菌介导转化的因素第18页
    1.5 本研究的目的和意义第18-19页
    1.6 本研究的技术路线及主要实验内容第19-21页
第2章 矮牵牛的遗传转化及分子检测第21-31页
    2.1 试验材料第21-23页
        2.1.1 植物材料第21页
        2.1.2 质粒和菌株第21-22页
        2.1.3 培养基第22页
        2.1.4 主要生化试剂第22页
        2.1.5 引物第22页
        2.1.6 实验仪器设备第22-23页
    2.2 试验方法第23-26页
        2.2.1 质粒 DNA 中量提取第23页
        2.2.2 质粒双酶切及纯化第23-24页
        2.2.3 根癌农杆菌的转化第24页
            2.2.3.1 农杆菌感受态细胞的制备第24页
            2.2.3.2 冻融法转化农杆菌感受态细胞第24页
        2.2.4 目的基因转化矮牵牛第24-25页
            2.2.4.1 农杆菌转化液的制备第24页
            2.2.4.2 基因转化前无菌再生体系的建立第24页
            2.2.4.3 侵染矮牵牛叶片第24-25页
            2.2.4.4 获得再生芽及栽培第25页
        2.2.5 转化植株的 PCR 鉴定第25-26页
            2.2.5.1 植物基因组 DNA 的提取第25页
            2.2.5.2 PCR 检测第25-26页
    2.3 结果与分析第26-29页
        2.3.1 质粒提取及双酶切验证第26页
        2.3.2 转化后根癌农杆菌的鉴定第26页
        2.3.3 矮牵牛无菌再生体系的建立第26-27页
        2.3.4 TvNHX1 基因对矮牵牛的遗传转化第27-28页
        2.3.5 转化植株的分子鉴定第28-29页
    2.4 讨论第29-30页
        2.4.1 矮牵牛再生体系的建立第29-30页
            2.4.1.1 外植体的选择第29页
            2.4.1.2 培养基和培养条件的选择第29页
            2.4.1.3 组培苗的移栽培养第29-30页
    2.5 本章小结第30-31页
第3章 盐胁迫下转 TvNHX1 基因矮牵牛生理指标分析第31-48页
    3.1 材料与方法第31-35页
        3.1.1 试验材料第31页
        3.1.2 主要仪器设备第31页
        3.1.3 试验方法第31-35页
            3.1.3.1 可溶性蛋白含量的测定第31-32页
            3.1.3.2 超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定第32-33页
            3.1.3.3 过氧化氢酶(CAT)活性的测定第33页
            3.1.3.4 过氧化物酶(POD)活性的测定第33-34页
            3.1.3.5 丙二醛(MDA)含量的测定第34页
            3.1.3.6 Na~+、K~+、Ca~(2+)、Mg~(2+)含量的测定第34-35页
    3.2 数据处理第35页
    3.3 结果与分析第35-44页
        3.3.1 转 TvNHX1 基因矮牵牛可溶性蛋白含量变化第35-36页
        3.3.2 转 TvNHX1 基因矮牵牛超氧化物歧化酶(SOD)活性变化第36-38页
        3.3.3 转 TvNHX1 基因矮牵牛过氧化氢酶(CAT)活性变化第38-40页
        3.3.4 转 TvNHX1 基因矮牵牛过氧化物酶(POD)活性变化第40-41页
        3.3.5 转 TvNHX1 基因矮牵牛丙二醛(MDA)含量变化第41-43页
        3.3.6 转 TvNHX1 基因矮牵牛 Na~+、K~+、Ca~(2+)、Mg~(2+)含量变化第43-44页
    3.4 讨论第44-47页
    3.5 本章小结第47-48页
第4章 盐胁迫下转 TvNHX1 基因矮牵牛耐盐基因的表达第48-58页
    4.1 试验材料第48-49页
        4.1.1 植物材料第48页
        4.1.2 主要试剂第48页
        4.1.3 引物第48-49页
        4.1.4 主要仪器设备第49页
    4.2 试验方法第49-51页
        4.2.1 盐胁迫下转 TvNHX1 基因矮牵牛 RT-PCR 分析第49-51页
            4.2.1.1 NaCl 胁迫处理第49页
            4.2.1.2 植物总 RNA 的提取第49-50页
            4.2.1.3 DNase I(RNase Free)消化总 RNA第50页
            4.2.1.4 cDNA 第一条链合成第50页
            4.2.1.5 RT-PCR 反应第50-51页
    4.3 结果与分析第51-56页
        4.3.1 矮牵牛中 TvNHX1 和 SOD 基因半定量 RT-PCR 反应条件的优化第51-53页
            4.3.1.1 植物总 RNA 的检测第51-52页
            4.3.1.2 半定量 RT-PCR 反应条件的确定第52-53页
        4.3.2 盐胁迫下矮牵牛中 SOD 基因和 TvNHX1 基因的表达第53-56页
            4.3.2.1 不同浓度 NaCl 胁迫下 SOD 基因、TvNHX1 基因表达量第53页
            4.3.2.2 NaCl 胁迫不同时间下 SOD 基因、TvNHX1 基因表达量第53-56页
    4.4 讨论第56-57页
        4.4.1 盐胁迫下 SOD 基因在非转基因与转 TvNHX1 基因矮牵牛中表达第56-57页
        4.4.2 盐胁迫下 TvNHX1 基因在转基因矮牵牛中表达第57页
    4.5 本章小结第57-58页
结论第58-59页
参考文献第59-68页
图版第68-69页
图版说明第69-70页
攻读学位期间发表的学术论文第70-72页
致谢第72页

 
 
论文编号BS3695920,这篇论文共72
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