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当前位置:教育论文中心首页--博士论文--SCMV-CP基因克隆及遗传转化甘蔗研究
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SCMV-CP基因克隆及遗传转化甘蔗研究
 
     论文目录
 
中文摘要第1-9页
英文摘要第9-10页
一 前言第10-33页
 1 甘蔗花叶病及甘蔗花叶病毒第10-13页
   ·甘蔗花叶病发生及其危害第10页
   ·甘蔗花叶病毒第10-12页
     ·甘蔗花病毒株系分类与分布第10-11页
     ·甘蔗花叶病毒寄主第11-12页
   ·马铃薯Y病毒属病毒的基因组结构与功能第12-13页
 2 植物抗病毒基因工程的策略第13-23页
   ·病毒来源的基因介导的病毒抗性第13-21页
     ·外壳蛋白介导的保护作用第13-16页
     ·复制酶介导的保护作用第16-18页
     ·运动蛋白介导的保护作用第18-20页
     ·卫星RNA第20页
     ·缺陷干扰型RNA第20-21页
     ·反义链RNA和核酶第21页
   ·非病毒来源的基因介导的病毒抗性第21-23页
     ·病程相关蛋白基因第21-22页
     ·植物抗病基因第22页
     ·植物抗体基因第22页
     ·核糖体失活蛋白第22-23页
     ·干扰素第23页
 3 植物转基因沉默与RNA介导的病毒抗性第23-30页
   ·植物转基因沉默第23-27页
     ·转录水平上基因沉默(TGS)第23-25页
     ·转录后水平上基因沉默(PTGS)第25-27页
   ·RNA介导的病毒抗性第27-30页
     ·RNA介导的病毒抗性机制第27-28页
     ·RNA介导的抗性与蛋白质介导的抗性差异第28-29页
     ·RNA介导的抗性的同源性的特点第29-30页
 4 甘蔗遗传转化研究进展第30-32页
   ·抗除草剂基因的转导第30页
   ·抗病虫害基因的转导第30-31页
   ·其它基因转导基因的转导第31-32页
 5 本研究的目的及意义第32-33页
二 材料和方法第33-57页
 1 实验材料第33-37页
   ·供试的植物病毒第33页
   ·转化受体材料第33页
   ·菌株与质粒第33页
   ·工具酶及试剂盒第33-34页
   ·常用化学试剂第34页
   ·主要仪器设备第34页
   ·常用溶液的成分和配制第34-37页
   ·常用培养基配制第37页
 2 实验方法第37-57页
   ·SCMV-FJ CP基因克隆及序列分析第37-43页
     ·感病甘蔗叶片总RNA的提取第37-38页
     ·RT-PCR和目的片段回收第38-40页
     ·目的片段的克隆第40-43页
     ·基因测序和序列的比对、分析第43页
   ·SCMV-CP基因遗传转化甘蔗第43-49页
     ·受体材料再生体系的建立第43-44页
     ·G418浓度梯度筛选预实验第44页
     ·基因枪介导的甘蔗遗传转化第44-49页
       ·质粒DNA的大量提取、纯化及鉴定第44-47页
       ·基因枪轰击转化甘蔗第47-48页
       ·转化愈伤组织的筛选和抗性植株再生第48-49页
   ·抗性植株的分子鉴定第49-54页
     ·抗性植株基因组DNA的提取第49-50页
     ·抗性植株基因组DNA的PCR扩增第50-51页
     ·DNA点杂交第51页
     ·Southern杂交第51-53页
     ·转化植株RT-PCR检测第53-54页
     ·转基因植株亚无性系的分子鉴定第54页
   ·转基因植株亚无性系的抗病性鉴定第54-57页
     ·田间病毒接种试验第55页
     ·叶绿素含量及光合参数的测定第55页
     ·抗性相关生理生化指标的测定第55-57页
三 结果和分析第57-84页
 1 SCMV-FJ CP基因克隆及序列分析第57-63页
   ·总RNA的完整性和纯度检测第57页
   ·RT-PCR和目的片段的回收第57-58页
   ·目的片段的克隆及重组质粒的鉴定第58页
   ·序列的测定与分析第58-63页
 2 SCMV-CP基因遗传转化甘蔗第63-71页
   ·甘蔗胚性愈伤组织的诱导及再生植株第63-65页
   ·甘蔗对G418的敏感性第65-66页
   ·基因枪介导的甘蔗遗传转化第66-71页
     ·质粒DNA提取及分析第66-68页
     ·受体材料的选择第68页
     ·基因枪轰击参数第68-69页
     ·转化体筛选和抗性植株获得第69-71页
 3 转化植株的分子鉴定第71-77页
   ·基因组总DNA第71-72页
   ·PCR检测结果第72-74页
   ·Southern杂交结果第74页
   ·RT-PCR第74-75页
   ·转基因植株亚无性系的分子鉴定结果第75-77页
 4 转基因植株亚无性系的抗病性分析第77-84页
   ·转基因植株亚无性系抗病性鉴定结果第77-79页
   ·叶绿素含量及光合参数的变化第79-80页
   ·抗性相关生理生化指标的变化第80-84页
     ·POD酶活性的变化第80-81页
     ·POD同工酶谱的变化第81页
     ·SOD活性的变化第81-82页
     ·CAT活性的变化第82页
     ·MDA含量的变化第82-84页
四 讨论第84-89页
 1 甘蔗花叶病毒(SCMV)株系分类第84-85页
 2 甘蔗花叶病防治及抗性育种第85-86页
 3 转SCMV-CP基因甘蔗的可能抗性机制第86-87页
 4 转基因植株的病毒抗性与活性氧代谢第87-88页
 5 利用转基因技术创造甘蔗新种资和产业化的可行性第88-89页
五 小结第89-92页
 1 主要结论第89-90页
 2 本研究的主要创新点第90-91页
 3 进一步的研究工作计划及展望第91页
 4 在学期间发表的论文与专利情况第91-92页
参考文献第92-109页
附录第109-123页
致谢第123页

 
 
论文编号BS1004371,这篇论文共123
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