| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 引言 | 第10-23页 |
| 1.1 CBFs转录因子的特征 | 第11-14页 |
| 1.1.1 CRT/DRE元件和CRT/DRE结合因子 | 第11-12页 |
| 1.1.2 CBF蛋白的结构与特征 | 第12页 |
| 1.1.3 CBFs的表达形式 | 第12-14页 |
| 1.1.4 拟南芥中其他CBF同源基因 | 第14页 |
| 1.2 冷驯化途径中CBF信号途径的功能 | 第14-15页 |
| 1.3 CBFs表达的调控 | 第15-19页 |
| 1.3.1 CBF因子的正调控 | 第16-17页 |
| 1.3.2 CBF因子的负调控 | 第17-19页 |
| 1.4 CBF信号途径与植物激素之间的关系 | 第19-20页 |
| 1.5 其他植物的CBFs因子 | 第20-21页 |
| 1.6 高山离子芥的抗冻性机理 | 第21-22页 |
| 1.7 本论文研究的意义及目的 | 第22-23页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第23-34页 |
| 2.1 实验材料培养及处理方式 | 第23页 |
| 2.2 实验材料DNA、RNA和质粒的提取以及DNA的凝胶回收 | 第23页 |
| 2.2.1 植物DNA的提取 | 第23页 |
| 2.2.2 植物RNA的提取 | 第23页 |
| 2.2.3 质粒的提取 | 第23页 |
| 2.2.4 DNA的凝胶回收 | 第23页 |
| 2.3 实验过程中的反应体系 | 第23-31页 |
| 2.3.1 反转录 | 第23-24页 |
| 2.3.2 3’RACE和5’RACE | 第24-26页 |
| 2.3.3 Tail PCR反应 | 第26-28页 |
| 2.3.4 目标基因克隆PCR、菌液PCR及RT-PCR反应体系 | 第28-29页 |
| 2.3.5 TA clone反应 | 第29-30页 |
| 2.3.6 酶切体系 | 第30页 |
| 2.3.7 Gateway反应 | 第30-31页 |
| 2.4 实验中的引物 | 第31-33页 |
| 2.5 可溶性糖和脯氨酸测定方法 | 第33页 |
| 2.6 拟南芥电导率测定方法 | 第33-34页 |
| 第三章 实验结果 | 第34-57页 |
| 3.1 高山离子芥转录本中拟南芥CBFs同源序列的克隆与分析 | 第34-36页 |
| 3.1.1 5’RACE和3’RACE技术克隆目标基因的5’端和3’端 | 第34页 |
| 3.1.2 CBT42774和CBT49489基因与拟南芥CBF1和CBF4序列同源 | 第34-35页 |
| 3.1.3 CbCBFx1和CbCBFx4蛋白质二级结构预测 | 第35-36页 |
| 3.2 高山离子芥CbCBFx1启动子的克隆与序列分析 | 第36-39页 |
| 3.3 载体的构建 | 第39-41页 |
| 3.3.1 CbCBFx1过表达载体的构建 | 第39-40页 |
| 3.3.2 CBFx4过表达载体的构建 | 第40页 |
| 3.3.3 CbCBFx1启动子连接GUS报告基因载体的构建 | 第40-41页 |
| 3.3.4 拟南芥CBF1、2、3过表达载体的构建 | 第41页 |
| 3.4 转基因植株的筛选 | 第41-43页 |
| 3.4.1 CbCBFx1和CbCBFx4转基因lines的表达情况 | 第42页 |
| 3.4.2 CbCBFx1启动子转基因lines在低温下的表达情况 | 第42-43页 |
| 3.5 转基因植株的表型和生理特性 | 第43-53页 |
| 3.5.1 过表达拟南芥CBFs、CbCBFxl和CbCBFx4抑制拟南芥幼苗的生长 | 第43-45页 |
| 3.5.2 幼苗叶片表型比较 | 第45-46页 |
| 3.5.3 转基因拟南芥表型分析 | 第46-48页 |
| 3.5.4 CbCBFx1和CbCBFx4可提高拟南芥的抗冻性 | 第48-50页 |
| 3.5.5 CbCBFx1和CbCBFx4可提高拟南芥的抗盐性 | 第50-51页 |
| 3.5.6 转基因拟南芥中的生理代谢 | 第51-53页 |
| 3.6 转基因植株基因表达情况 | 第53-57页 |
| 3.6.1 低温诱导CbCBFx1和CbCBFx4的表达 | 第53-54页 |
| 3.6.2 拟南芥中CbCBFx1对拟南芥CORs基因的调控 | 第54-55页 |
| 3.6.3 不同胁迫对CbCBFx1启动子的影响 | 第55-57页 |
| 第四章 讨论 | 第57-61页 |
| 4.1 高山离子芥CbCBFx1基因在拟南芥的功能和作用 | 第57-58页 |
| 4.2 CbCBFx1启动子在拟南芥中的调控 | 第58-59页 |
| 4.3 高山离子芥CbCBFx4基因在拟南芥的功能和作用 | 第59-61页 |
| 第五章 结论 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
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