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结肠癌组织中hPTTG1和survivin的表达的策略分析
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【药学专业毕业论文】[Key words] Colon cancer； Survivin； hPTTG1； Immunohistochemistry 结肠癌是最为常见的一种消化癌瘤，由于其发病率较高、死亡率大，对人体的健康具有较大的影响。最近研究表明，若要对结肠癌进行准确地诊断，那么就需要对人垂体瘤转化基因1（human pituitary tumo
[Key words] Colon cancer； Survivin； hPTTG1； Immunohistochemistry
结肠癌是最为常见的一种消化癌瘤，由于其发病率较高、死亡率大，对人体的健康具有较大的影响。最近研究表明，若要对结肠癌进行准确地诊断，那么就需要对人垂体瘤转化基因1（human pituitary tumor transforming gene-1，hPTTG1）与存活剂（survivin）在结肠癌组织中的表达进行准确地定位与检测。本研究主要回顾性分析了2007年12月～2011年12月笔者所在医院诊断为结肠癌的80例患者的临床资料，采用免疫组织化学法对hPTTG1与survivin进行检测、相关性分析等，现将具体的研究过程及结果报道如下。
1?资料与方法
1.1?一般资料
回顾性分析了2007年12月～2011年12月入住笔者所在医院、经病理诊断确诊为结肠癌的80例患者的临床资料，其中男47例，女33例；年龄为26～88岁，平均（69.7±6.5）岁；本组患者均有完整的3年随访资料，在实施手术前均没有接受过任何的诸如放疗、化疗以及生物等方面的治疗。对于临床分期，主要参照美国AJCC中关于TNM分期标准来加以执行，即A期为12例，B期为22例，C期为26例，D期为20例。上述四组分期的送检淋巴结：A期为（19.23±8.71）枚，B期为（17.38±7.23）枚，C期为（11.22±5.42）枚，D期为（12.35±7.61）枚。参照世界卫生组织（WHO）对分化程度加以执行，即高～中度分化腺癌为61例，低～未分化腺癌患者数为19例。 代写论文
1.2?方法
主要采用的方法为二步法对其进行检验，仪器为SuperPic TureTM Polymer。首先运用石蜡包埋组织切片，脱蜡，采用微动对抗原对其加以修复，通过内源性过氧化酶对剂孵育加以阻隔，用浓度为10%的正常血清对特异性加以封闭，约为10 min。实验组依次加入一抗（多抗survivin，以及单抗hPTTG1），对照组主要用PBS来代替一抗，将已知的胰腺癌切片作为survivin进行阳性对照组，已知呈现阳性的肾盂肾炎切片可以作为hPTTG1的阳性对照片。最后，分别对hPTTG1与survivin的含量进行检测[3]。
1.3?结果判定标准
对于检测结果的判定，具有十分重要的意义，应该给予高度地重视。检测结果的判定首先由2位病理学医师在独立完成的情况之下对某些免疫组化结果进行较为快速以及准确的判断，然后进行思考，并在这个过程中对结果获得共识。对于hPTTG1与survivin而言，前者多位于细胞核内、但是在胞浆内同样也有一定的表达，后者多位于细胞浆之内进行表达，其蛋白阳性反应为淡黄到棕黄色颗粒。具体需要参照的判断结果：在光学显微镜之下进行观察，细胞核以及细胞浆之中若出现淡黄色直到棕黄色的颗粒的细胞为阳性细胞。对于记分主要包括上述及着色强度。上述两种记分之间相乘即可以归为阳性强度：0分为阴性（-），4分为弱阳性（+）、5～8分为中度阳性（++），9～12分强阳性（+++）[4]。 总结大全 /html/zongjie/
1.4?统计学处理
本研究中所出现的一切数据均由Excel及SPSS13.0两个软件加以统计、处理以及分析，所出现的数据均以（）的形式表示，采用卡方检验的方法对数据进行检验，组间差异以P<0.05表示具有统计学意义。
2?结果
2.1?survivin在结肠癌以及正常结肠组织中的表达意义
survivin在结肠癌组织中阳性表达率为82.5%（66/80），但是在正常的结肠黏膜组织中的阳性表达率为5.0%（1/20），差异有显著统计学意义（P<0.01）。见表1。
2.2?hPTTG1在结肠癌与正常结肠黏膜组织中的表达
hPTTG1在结肠癌组织中的阳性表达率为41.3%（33/80），但是它在正常的结肠黏膜组织中的阳性表达率为85.0%（17/20），这说明hPTTG1在正常结肠黏膜组织中的阳性表达率要明显地高于结肠癌组织中的表达率，差异有显著统计学意义（P<0.01）。见表2。
2.3?hPTTG1和survivin表达的相关性
hPTTG1的表达与结肠癌组织分化程度、Dukes分期以及肠壁的浸润深度等有关。见表3。
2.4?结肠腺癌患者hPTTG1和survivin表达的Kaplan-Meier生存分析
对结肠癌患者hPTTG1（图1A）和survivin（图1B）表达的Kaplan-Meier 生存进行分析。见图1。 思想汇报 /sixianghuibao/
3?讨论
有关研究显示，survivin是目前作用强度最大的一种凋亡抑制性基因，在很多种肿瘤，尤其是恶性肿瘤，如肺癌、膀胱癌以及乳腺癌等中均能够检测到它的表达。而且，对具体的表达进行有效地检测，能够及早地发现癌变情况，并及时地采取强有效的措施加以治疗。因此，临床上对存活剂进行检测，意义十分重大。存活剂具体的作用机制为：首先通过对凋亡信号进行抑制，来对半胱天冬酶-3以及半胱天冬酶-7对处于细胞分裂周期-2与细胞分裂间期的细胞进行抑制。survivin的表达产物的结构比较独特，能够确保特定的细胞抵抗一系列刺激原加以诱发，从而对细胞的凋亡起到一定的抑制性作用，从而能够对肿瘤细胞的分裂增殖与远处转移起到一定的促进作用[5]。相关研究表明[6-7]，在实际的非小细胞肺癌的研究过程之中发现survivin也可以与半胱天冬酶-3（Capase-3）同时表达阳性，提示出survivin还可以通过非Capase的具体途径来完成抗凋亡的作用。hPTTG1与细胞的分化、增殖、凋亡密切相关，是细胞有丝分裂纺锤体检验点信号通路的核心蛋白。它可能通过以下多种机制参与肿瘤的形成和发展：诱导细胞转化；促进其他原癌基因及促瘤因子的表达；干扰姐妹染色单体分离。
本研究结果显示，survivin在结肠癌组织中阳性表达率为82.5%，明显高于survivin在正常的结肠黏膜组织中的阳性表达率为5.0%，且差异有显著统计学意义（P<0.01）；结肠癌中survivin的表达在性别、年龄、肿瘤所在部位、肿瘤大小、分型、肠壁浸润深度、组织分化程度、远处转移、Dukes分期等之间比较，差异均无统计学意义（P>0.05）；hPTTG1在结肠癌组织中的阳性表达率为41.3%（33/80），但在正常的结肠黏膜组织中的阳性表达率为85.0%（17/20），二者比较，差异有显著统计学意义（P<0.01）；hPTTG1的表达与结肠癌组织分化程度、Dukes分期以及肠壁的浸润深度等有关（P<0.05）；结肠癌组织中，hPTTG1与survivin的表达不存在显著的相关性（R=0.092，P>0.05）。综上所述可以得知，survivin与hPTTG1在结肠癌组织中具有异常表达的现象，这就提示了二者在结肠癌的发生以及发展过程中所起的重要作用。因此，可以将二者作为结肠癌发生及发展
的一个指示物。 [参考文献] [1] 毛银玲，徐刚，孟凡玲，等.P-STAT5 和Survivin 在结肠腺癌组织中的表达及临床意义[J].中国肿瘤临床，2011，38（12）：716-717. [2] 殷江霞，孙红芹，唐摇磊，等.直肠癌组织中hPTTG1和
的一个“指示物”。
[参考文献]
[1] 毛银玲，徐刚，孟凡玲，等.P-STAT5 和Survivin 在结肠腺癌组织中的表达及临床意义[J].中国肿瘤临床，2011，38（12）：716-717.
[2] 殷江霞，孙红芹，唐摇磊，等.直肠癌组织中hPTTG1和survivin的表达及意义[J].现代肿瘤医学，2011，19（5）：951-953.
[3] 王学虎，傅仲学，赵渝，等.Survivin基因的shRNA干扰对结肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响[J].中国肿瘤临床，2010，37（9）：485-489.
[4] 钱敏飞，王家东.肿瘤凋亡抑制蛋白-Survivin 的研究进展[J].中国肿瘤临床，2004，31（11）：657-659.
[5] Jass JR，Sobin LH，Watanabe H.The World Health Organizations histologic classification of gastrointestinal tumors.A commentary on the second edition[J].Cancer，1990，66（10）：2162-2167.
[6] Lee YY，Yu CP，Lin CK，et al.Expression of survivin and cortactin in colorectal adenocarcinoma： association with clinicopathologicalparameters[J].Dis Markers，2009，26（1）：9-18.
[7] Kato H，Inoue T，Asanoma K，et al.Activation of STAT3/5 signal pathways in complete mole and repression in choriocarcinoma cell lines[J].J Reprod Med，2006，51（1）：41-48. 作文 /zuowen/
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